基于热、药分离方式的明目解毒方熏蒸对兔单纯疱疹病毒性角膜炎影响的实验研究

目的采用热、药分离的方式探讨明目解毒方熏蒸对于单纯疱疹病毒性角膜炎(HSK)的作用途径。方法90只健康新西兰大白兔采用随机数字表法分为正常对照组、模型组、中药熏蒸组、热熏蒸组和熏蒸液组5组,每组18只。除正常对照组外,其余各组均采用眼表划痕法给予单纯疱疹病毒I型(HSV-1)接种建立HSK模型。造模后模型组和正常对照组不予药物处理,中药熏蒸组采用明目解毒方每日熏蒸干预,热熏蒸组采用蒸馏水熏蒸,熏蒸液组采用明目解毒方熏蒸液滴眼。分别于造模前1 d和造模1 d、3 d、7 d,对各组实验兔的角膜病变程度进行评分。并在治疗1 d、3 d、7 d随机抽取每组6只眼,采用PCR法检测角膜组织中HSV-1的表达,ELISA法检测房水中IL-2和IFN-γ的含量;采用Western blot方法检测外周血中CD4、CD8的蛋白表达情况。结果治疗3 d、7 d,中药熏蒸组、熏蒸液组和热熏蒸组的兔角膜HSV-1含量低于模型组(P<0.05);各组间房水中IFN-γ的含量差异无统计学意义(P>0.05),治疗7 d,中药熏蒸组和热熏蒸组存在交互作用。治疗1 d、3 d、7 d,中药熏蒸组房水中IL-2含量与模型组差异有统计学意义(P<0.05);治疗1 d、7 d熏蒸液组与模型组房水中IL-2含量差异有统计学意义(P<0.05)。治疗3 d、7 d中药熏蒸组较模型组外周血CD4蛋白表达明显增强(P<0.05)。结论明目解毒方熏蒸可通过热、药效应清除HSK角膜组织中的HSV-1病毒,并且影响局部免疫因子IL-2水平,上调外周血CD4的表达。

明目解毒方熏蒸对单纯疱疹病毒性角膜炎HSV-1及角膜CD4、CD14的影响

目的探讨明目解毒方熏蒸对单纯疱疹病毒性角膜炎(HSK)动物模型HSV-1及角膜CD4、CD14表达的影响。方法将20周龄新西兰大耳白兔60只随机分为4组:空白组6只,模型组、对照组、联合组各18只。除空白组外,其余各组实验兔皆予眼表单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)接种造模。对照组予阿昔洛韦滴眼液点眼,联合组予以阿昔洛韦滴眼液点眼联合明目解毒方熏蒸治疗,空白组、模型组不予任何治疗。分别在治疗1 d、3 d、7 d后评价各组实验兔角膜上皮及基质损害的严重程度、记录角膜HSV-1含量。空白组分别在治疗的第3 d和第7 d,各随机抽取3只眼采用免疫组化SP法检测角膜CD4、CD14的表达结果,并随机抽取模型组、对照组、联合组每组6只眼,采用同样的方法检测角膜组织CD4、CD14、HSV-1的表达。结果(1)模型组的临床体征评分逐渐上升,对照组及联合组评分在治疗7 d后下降。(2)PCR检测结果,治疗1 d后,模型组、对照组、联合组均能检测出HSV-1表达;治疗3 d后,模型组6个样本皆可检测出HSV-1,对照组2个样本可检出,联合组未检出,差异有统计学意义(χ^2=12.600,P=0.002);治疗7 d后,模型组6个样本皆检出HSV-1,对照组、联合组均未检出,差异有统计学意义(χ^2=18.000,P=0.000)。(3)治疗后,模型组CD4表达较空白组、对照组及联合组表达均增强;治疗3 d后,对照组和联合组角膜CD4表达相当;治疗7 d后,联合组较对照组表达略增强。(4)治疗后,联合组的CD14表达较同期对照组增强。结论明目解毒方熏蒸联合阿昔洛韦滴眼液能有效地清除角膜组织HSV-1,提高角膜CD14的表达。