自发性狼疮小鼠明胶酶A、B的表达变化及肾乐的影响

为探讨MRL/lpr自发性狼疮小鼠肾脏明胶酶A(MMP 2 )与明胶酶B(MMP 9)的表达变化 ,明确中药复方肾乐的调节作用及机制 ,将 90只 8周龄狼疮小鼠随机分为肾乐治疗组、甲基强的松龙 (MPS)治疗组与对照组 ,肾乐治疗组经饲料服用肾乐 ( 4g·kg-1·d-1) ,MPS治疗组腹腔注射甲基强的松龙 2 5mg·kg-1·d-1,共 2 0周。观察 3组小鼠的存活率、蛋白尿、肾功能与肾脏病理改变。并利用免疫组化检测明胶酶A、B的表达变化 ,明胶酶谱法检测肾脏与尿液明胶酶A、B的活性变化。结果发现 ,肾乐、MPS与对照组相比均能够延长狼疮小鼠的存活率 ( 70 %∶80 %∶5 0 % )、减少蛋白尿的出现比率 ( 4 0 %∶33.3%∶80 % )并减轻肾脏病理改变 ;与 8周龄狼疮小鼠比较 ,2 8周龄狼疮小鼠肾小球内明胶酶A、B的表达明显增加 ,肾脏与尿液中明胶酶A、B的活性均明显增加 ,与狼疮性肾炎的病理损害密切相关。提示肾乐与MPS能够明显抑制肾小球明胶酶A、B的表达及活性变化 ,这可能是肾乐减轻MRL/lpr自发性狼疮小鼠肾脏病理损害的主要机制之一。

过氧化氢对血管平滑肌细胞增殖和明胶酶A及其抑制因子基因表达的影响

目的 :探讨过氧化氢 (H2 O2 )对体外培养大鼠血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖和明胶酶A(MMP - 2 )、及其抑制因子 (TIMP - 2 )基因表达的影响。方法 :先用四甲基偶氮唑 (MTT)法筛选出H2 O2 对VSMC的毒性作用浓度和增殖作用浓度 ,在此基础上用逆转录聚合酶链反应 (RT -PCR)法测定H2 O2 对MMP - 2、TIMP - 2mRNA表达的影响。结果 :H2 O2 浓度大于 30 0 μmol/L后显示出对VSMC的致死毒性作用 ;H2 O2 浓度在 0 0 1 - 50 μmol/L内可以刺激VSMC的增殖 ,且呈时间依赖性 ;1 μmol/LH2 O2 、1 0 μmol/LH2 O2 对MMP - 2基因转录有明显的促进作用 ;不同浓度的H2 O2对TIMP - 2基因转录无明显促进作用。结论 :适当浓度的H2 O2 可以促进VSMC的增殖和MMP - 2mRNA表达 ,但对TIMP - 2mRNA表达无明显作用 ,提示H2 O2 参与了血管重塑的不同病理环节。

阿托伐他汀降低不稳定型心绞痛患者血浆尿酸和明胶酶A/B的研究

目的比较阿托伐他汀、辛伐他汀对不稳定型心绞痛患者血尿酸、明胶酶A/B(MMP2、MMP9)和心绞痛发作的影响。方法入选110例伴有高尿酸血症的不稳定型心绞痛患者,随机分为阿托伐他汀(AV)组、辛伐他汀(SV)组和对照(NC)组进行治疗,比较治疗1个月后3组患者血尿酸、MMP2、MMP9水平及心绞痛发作的情况。结果治疗后两治疗组患者TC、LDL-C、心绞痛发作频率、持续时间较对照组均有所降低(P<0·05),两治疗组比较,上述指标间差异均无显著性意义(P>0·05);两治疗组患者MMP2、MMP9不同程度下降,SV组降幅更大;AV组患者血尿酸显著降低,SV组无明显变化。结论阿托伐他汀和辛伐他汀都能够降低不稳定型心绞痛患者的总胆固醇和LDL-胆固醇,改善不稳定型心绞痛症状。在治疗合并高尿酸血症的不稳定型心绞痛时,他汀类药物的选择以阿托伐他汀为宜。

二苯乙烯苷对C反应蛋白诱导的小鼠巨噬细胞明胶酶A和B表达的影响

目的为探讨二苯乙烯苷(TSG)预防动脉粥样硬化斑块不稳定的可能机制,观察TSG对C反应蛋白(CRP)诱导的巨噬细胞表达明胶酶A和B的影响。方法体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞,分为空白对照组、模型组(给CRP20mg·L-1)、模型+辛伐他汀100μg·L-1组、模型+TSG120及60μg·L-1组。给予CRP12h后加入干预药物,共同培养24h后进行指标的检测。用蛋白免疫印迹法观察各组细胞明胶酶A和B蛋白表达的差异;用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)观察各组细胞明胶酶A和B mRNA表达的差异;ELISA法测定细胞培养液中白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNFα)含量。结果蛋白免疫印迹分析显示,模型组明胶酶A和B蛋白的表达较空白对照组明显增加;与模型组(明胶酶A:1.14±0.26,明胶酶B:1.26±0.24)相比,辛伐他汀(明胶酶A:0.71±0.12,明胶酶B:0.73±0.15)及TSG(120μg·L-1组:明胶酶A,0.74±0.11,明胶酶B,0.88±0.13;60μg.±0.18,明胶酶B,1.12±0.18)均能降低明胶酶A和B蛋白的表达,并随TSG处理浓度的增加有下降趋势。RT-PCR显示,模型组明胶酶A和B的mRNA表达较空白对照组明显增加;与模型组(明胶酶A:2.45±0.18,明胶酶B:2.59±0.19)相比,辛伐他汀(明胶酶A:0.86±0.06,明胶酶B:0.98±0.10)及TSG(120μg·L-1组:明胶酶A,0.98±0.09,明胶酶B,1.24±0.13;60μg·L-1组:明胶酶A,1.32±0.12,明胶酶B,1.80±0.15)均能降低明胶酶A和B的mRNA表达,并随TSG处理浓度的增加有下降趋势。ELISA结果显示,与空白对照组比较,模型组IL-6和TNF-α水平明显升高;与模型组IL-6(614±52)ng·L-1,TNFα(82.5±4.7)mg·L-1相比,辛伐他汀IL-6(290±32)ng·L-1,TNFα(36.3±2.7)mg·L-1及TSG120μg·L-1组:IL-6(310±28)ng·L-1,TNFα(42.1±3.1)mg·L-1;60μg·L-1组:IL-6(498±46)ng·L-1,TNFα(58.6±3.4)mg·L-1能明显降低细胞培养液中IL-6和TNFα含量。结论TSG可通过抑制上调的明胶酶A和B的表达、IL-6及TNFα的分泌以抑制斑块不稳定。

纤维蛋白诱导活化系膜细胞表达明胶酶A、B的机制研究

为观察纤维蛋白对系膜细胞 (HMC)表达明胶酶A(MMP 2 )、明胶酶B(MMP 9)的作用并探讨其活化机制 ,应用RT PCR、明胶酶谱分析法分别在基因转录水平与蛋白质活性水平上检测纤维蛋白对HMC表达MMP 2、MMP 9的作用 ,采用纤维蛋白酶谱法与平板法检测纤维蛋白对HMC表达纤溶酶原激活物 (PA)活性的影响。结果发现 ,纤维蛋白呈剂量与时间依赖性促进HMCMMP 2与MMP 9表达的上调 ,并同时促进HMCtPA与uPA的表达 ;应用抑肽酶阻断纤溶酶活性后能够完全阻断 pro MMP 2与pro MMP 9的活化。提示肾脏局部沉积的纤维蛋白可以促进HMC表达与活化MMP 2、MMP 9,而MMP 2与MMP 9的活化依赖于PA/纤溶酶系统的调控。

明胶酶A及其抑制剂在卵巢癌中的表达

目的 :检测明胶酶A及其抑制剂在卵巢癌中的表达情况 ,探讨其与卵巢癌发生、发展的关系。方法 :采用免疫组织化学S P法 ,检测 3 2例卵巢上皮性恶性肿瘤、2 1例交界性肿瘤和 10例良性肿瘤组织中明胶酶A及其抑制剂 (TIMP 2 )蛋白的表达状况。结果 :明胶酶A及其抑制剂在肿瘤细胞和间质细胞中均可见不同程度的表达。明胶酶A蛋白在卵巢癌组织中的表达率明显高于交界性或良性肿瘤组织 ;TIMP 2在良性肿瘤组织中表达率最低 ,明显低于恶性组或交界性组 ;明胶酶A及其抑制剂在卵巢癌肿瘤细胞中的表达与FIGO分期相关 (III IV期高于I II期 )。结论 :明胶酶A可能促进卵巢癌的发生发展 ;内源性TIMP

明胶酶A与急性白血病髓外浸润的相关性研究

急性白血病尤其是伴有粒单分化的髓系细胞或T淋巴细胞常常并发髓外组织浸润，如中枢神经系统白血病，是导致白血病复发及死亡的重要因素之一。髓外浸润过程比较复杂，包括白血病细胞的趋化、黏附、迁移、异位器官侵袭、生存、增殖以及抗凋亡等多个环节。明胶酶A（gelatinaseA）参与了急性白血病的髓外浸润行为．并与其细胞浸润能力有一定的相关性。本文对明胶酶A在急性白血病髓外浸润中的作用研究综述如下。

不稳定性心绞痛患者循环血单核细胞产生明胶酶A、B的变化

目的：观察不稳定性心绞痛（ＵＡ）患者循环血单核细胞产生明胶酶Ａ、Ｂ（ＭＭＰ２、ＭＭＰ９）的变化，探讨其在斑块稳定性心绞痛（ＳＡ）和ＵＡ发病中的作用。 方法：应用酶联免疫分析试剂盒，测定２１例不稳定性心绞痛（ＵＡ组）、２５例稳定性心绞痛（ＳＡ组）及１８例健康者（正常对照组）循环血单核细胞培养上清液中ＭＭＰ２、ＭＭＰ９含量及经皮冠状动脉腔内成形术（ＰＴＣＡ）、心肌缺血发作前后ＭＭＰ２、ＭＭＰ９的变化。 结果： ＵＡ组 ＭＭＰ２、 ＭＭＰ９均显著高于正常对照组，有非常显著性差异（ Ｐ＜ ０．００１）。 ＰＴＣＡ术后， ＵＡ组ＭＭＰ２、ＭＭＰ９较术前增加（Ｐ＜０．０１～０．００１），均有非常显著性差异。 结论：ＵＡ患者循环血单核细胞产生ＭＭＰ２、ＭＭＰ９增加，并可能直接参与ＵＡ的发病过程。

胶质瘤明胶酶A基因表达研究

目的 了解明胶酶A在胶质细胞瘤发展中的作用。方法 取36例脑胶质细胞瘤患者的肿瘤组织及正常脑组织,其中Ⅰ～Ⅱ胶质瘤13例,Ⅲ～Ⅳ级胶质瘤23例。提取组织总RNA;用逆转录共扩增定量PCR方法测定明胶酶A(MMP2)基因表达水平。结果 Ⅲ～Ⅳ级胶质瘤明胶酶A基因表达水平(1.41±0.43)明显高于Ⅰ～Ⅱ级胶质瘤(0.54±0.07)及正常脑组织(0.29±0.04)。胶质瘤MMP2基因表达水平与肿瘤大小无关,而与肿瘤分化程度有关。结论 明胶酶A在脑胶质瘤的进展中可能起重要作用。

明胶酶A及其抑制剂TIMP-1在宫颈癌中的表达及其临床意义

目的研究明胶酶A及其抑制剂（TIMP-1）在子宫颈癌中的表达及与预后的关系。方法采用免疫组织化学（S-P）法检测47例子宫颈癌组织标本,31例CIN组织标本,31例正常宫颈组织标本中明胶酶A及其抑制剂（TIMP-1）的阳性表达。结果明胶酶A、TIMP-1在宫颈癌组织中的阳性表达率分别为80.85%、57.45%,在CIN组织中的阳性表达率分别为32.26%、19.35%,在正常宫颈组织中的阳性表达率分别为9.68%、6.45%;明胶酶A在三组间阳性率比较,差异有统计学意义（χ^2=41.680,P=0.00）。TIMP-1因子在三组间阳性率比较,差异有统计学意义（χ^2=25.516,P=0.00）。明胶酶A及TIMP-1在宫颈癌有无淋巴转移之间,差异有统计学意义。明胶酶A及TIMP-1在宫颈癌组织中的阳性表达与肿瘤生长类型、临床分期、病理分级、组织类型、患者年龄之间,差异无统计学意义。结论明胶酶A高表达与宫颈癌的侵袭、转移及预后有较密切关系,明胶酶A可以作为判断预后的指标之一。

明胶酶A在急性白血病细胞中的表达及其对髓外浸润的意义

目的 探讨急性白血病细胞中明胶酶A(MMP - 2 )的表达及其临床意义。方法 应用逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)检测了 4 6例初治急性白血病患者明胶酶A的表达 ,还在体外进行了白血病细胞株穿膜实验。结果 4 6例白血病患者中 2 6例 (5 6 .5 % )明胶酶A表达阳性 ,其中AML2 0例 (2 0 /34,5 8.8% ) ,ALL 6例 (6 /12 ,5 0 % )。明胶酶A阳性组与阴性组发生髓外浸润的比例分别为 5 0 %和 2 0 % (P <0 .0 5 ) ;外周血幼稚细胞百分率分别为 72 .0 1± 14 .3%和 6 1.5 3± 16 .8% (P <0 .0 5 )。体外穿膜实验证实了明胶酶A对白血病细胞侵袭能力的影响。结论 明胶酶A可能参与白血病细胞从骨髓释出并浸润组织的过程。

肺癌患者明胶酶A基因表达的研究

目的 了解肺癌患者明胶酶A基因表达的情况。方法 19例肺癌患者术中取癌组织及正常肺组织 ;提取组织总RNA ;用共扩增逆转录定量PCR方法测定其基因表达水平。结果 肺癌组织明胶酶A(MMP2 )的基因表达明显高于正常肺组织 ;肺癌组织MMP2 基因表达水平与肿瘤大小 ,肿瘤组织类型无关。结论 明胶酶A在肺癌的浸润中可能起重要作用。

大鼠肺炎链球菌性脑膜炎脑组织明胶酶A、B mRNA的表达及活性分析

目的:研究大鼠肺炎链球菌性脑膜炎脑组织明胶酶A、明胶酶BmRNA的表达及活性的变化。方法:建立幼大鼠脑膜炎模型,用逆转录-聚合酶链反应法测定脑组织明胶酶A、BmRNA表达;用SDS-PAGE明胶酶谱学测定脑脊液中明胶酶A、B的活性。结果:大鼠蛛网膜下腔和软脑膜发生炎症反应,脑组织明胶酶BmRNA表达显著增强(1.04±0.34,P<0.01);脑脊液中明胶酶B活性也显著增高(1554.2±264.5,P<0.01)。而明胶酶AmRNA表达及酶活性无显著改变(P均>0.05)。结论:明胶酶B参与了肺炎链球菌性脑膜炎的病理生理过程。

明胶酶A及其特异性组织抑制剂在胎膜早破中的作用

目的:通过检测自发性胎膜早破患者和正常分娩产妇及择期剖宫产产妇胎膜组织中明胶酶A(MMP 2)及其特异性组织抑制剂(TIMP 2) mRNA和蛋白质的表达,探讨明胶酶A及其特异性组织抑制剂在正常分娩前后和病理状态胎膜中的表达及其作用。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)和SP法对8例自发性胎膜早破患者、8例正常分娩产妇以及8例择期剖宫产产妇的胎膜组织中 MMP 2 和 TIMP 2 mRNA和蛋白的表达及定位进行检测。用光镜观察胎膜组织形态学特征的改变。结果: MMP 2 蛋白和mRNA在胎膜早破组表达明显高于正常分娩组和剖宫产组,两者比较,差异有显著性(P<0.05),而在正常分娩组的表达与剖宫产组比较差异无显著性 (P>0.05)。TIMP 2蛋白和mRNA在剖宫产组表达最高,正常分娩组次之,胎膜早破组最低,两两比较差异有显著性(P<0.05)。MMP 2在羊膜细胞内表达,在羊膜细胞的间叶细胞个别表达,强表达于绒毛膜的光滑的滋养细胞;TIMP 2表达于羊膜上皮细胞、网状细胞、绒毛膜滋养层。胎膜早破组的胎膜结构发生了明显改变。结论:胎膜早破组的胎膜中MMP 2的表达明显增高,而 TIMP 2 的表达明显降低,MMP 2 和 TIMP 2 的表达失调将导致胎膜基质的降解增加并最终导致胎膜的破裂。

胃癌组织中明胶酶A的表达

目的 探讨明胶酶A在胃癌组织中的表达及其意义。方法 采用免疫组化方法检测 3 6例胃癌组织明胶酶A的表达。结果 明胶酶A在正常胃组织中表达极低 (2 /14 ) ,癌旁组织低表达 (7/18) ,胃癌组织高表达 (3 1/3 6)。明胶酶A表达与胃癌大小、Lauren分型无关。早期胃癌不表达 ,进展期胃癌特别是有浆膜侵袭和转移者 ,其明胶酶A呈显著高表达。明胶酶A表达定位于胃癌基质 ,以巨噬细胞为主。结论 明胶酶A表达可作为判断胃癌侵袭与转移的标志 ;

明胶酶A(MMP-2)蛋白在评估膀胱移行细胞肿瘤进展期的作用

目的 研究明胶酶A(MMP 2 )在不同病理分期、分级的膀胱移行细胞肿瘤 (TCCB)中的表达规律 ,并探讨以MMP 2来判断TCCB进展情况的可能性及方法。方法 通过免疫组织化学和明胶酶谱等方法对 4 7例手术切除的TC CB组织中MMP 2蛋白进行定量检测 ,同时取 5例正常膀胱组织作为对照。对检测结果进行统计学分析。结果 (1)MMP 2蛋白在TCCB中呈阳性表达 ,在正常膀胱组织中MMP 2不表达或呈微量表达 ;(2 )随着TCCB临床病理分期、分级的升高 ,MMP 2表达量呈现增高趋势 ,有统计学意义 (P <0 .0 1)。结论 MMP 2蛋白表达与TCCB的恶性发展密切相关。临床上可将MMP 2作为判断TCCB进展情况的标志物。

明胶酶A基因高表达与胃癌浸润转移的关系

目的 研究明胶酶A基因表达对胃癌浸润转移的影响。方法 采用原位杂交技术检测 3 6例胃癌组织明胶酶AmRNA表达。结果 正常胃组织、癌旁和胃癌组织明胶酶AmRNA表达阳性率分别是 8.3 %、3 5 .7%和 83 .3 % ,三者间差异均有显著性意义 (P<0 .0 1)。有浆膜浸润和淋巴结转移的胃癌 ,其表达阳性率分别为 93 .1%和 90 .6% ,无浆膜浸润和淋巴结转移的胃癌其表达阳性率分别为 42 .9%和 2 5 .0 % ,差异均有显著性意义 (P<0 .0 1)。明胶酶AmRNA表达定位于肿瘤浸润边缘的基质成分 ,以巨噬细胞为主。结论 明胶酶AmRNA高表达可促进胃癌的浸润和转移 。