明胶酶MMP-2和MMP-9及其组织抑制剂与眼科疾病

基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)构成基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMPs)家族中的明胶酶。MMP-2,MMP-9作为MMPs家族分布最广的两种亚型,参与了多种眼科疾病的病理过程,如翼状胬肉、角膜炎、白内障、青光眼、增生性玻璃体视网膜疾病及黄斑变性等。我们就其结构、功能、在眼科疾病中作用以及研究的最新进展做一综述。

COPD患者外周血SIRT1及NF-KB、MMP-9的表达水平分析

探讨COPD患者外周血沉默信息调节因子相关酶1(SIRT1)及核因子κB(NF-κB)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达水平及作用。比较患者SIRT1、NF-κB、MMP-9等水平情况。结果显示患者血清SIRT1水平随病情加重而降低,患者血清NF-κB、MMP-9水平随病情加重而增高。COPD稳定期组和急性加重组患者SIRT1mRNA和蛋白相对表达量明显低于对照组;NF-κB、MMP-9mRNA和蛋白相对表达量明显高于对照组。实验证明COPD患者SIRT1表达水平降低与肺功能下降相关,可作为COPD潜在标志物;SIRT1可能通过对NF-κB、MMP-9的调节作用来调控COPD的发生与发展。

慢性阻塞性肺病及吸烟人群血清MMP-9、NGAL、MMP-9/NGAL前体及中性白细胞弹性蛋白酶水平变化

目的确定吸烟情况对慢性阻塞性肺病(慢阻肺)患者血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、中性粒细胞明胶酶蛋白(NGAL)、MMP-9/NGAL前体及中性白细胞弹性蛋白酶(NE)水平的影响。方法在80名慢性阻塞性肺病患者(65名吸烟者,15名不吸烟者)和35名健康成年人(26名吸烟者,7名不吸烟者)中收集血清样本,随后进行ELISA测定血清样本中研究因子的水平。结果在患有慢阻肺的吸烟者中,MMP-9、NGAL和MMP-9/NGAL水平明显升高。此外,患有慢阻肺的吸烟者与健康的吸烟者相比,NE和MMP-3水平显著增高。结论 MMP-9、NGAL、MMP-9/NGAL和NE的血清水平能够反应与吸烟有关的慢阻肺患者的全身炎症状态。

TGFβ_1和明胶酶B在子痫前期胎盘中的表达及相关性研究

目的通过检测子痫前期患者胎盘组织中TGFβ1和MMP-9(明胶酶B)的表达,探讨其在子痫前期发病机制中的作用及两者之间的相关性。方法用SP免疫组化染色法观察正常妊娠(15例),子痫前期(24例)剖宫产后胎盘组织中TGFβ1和MMP-9的分布与定位,通过HMIAS-2000型全自动医学彩色图像分析系统对其进行定量分析。结果在重度子痫前期组胎盘组织中TGFβ1表达明显高于正常对照组和轻度组(P<0.05),轻度组与正常组比较差异无显著性(P=0.087);MMP-9在轻、重子痫前期组胎盘组织中表达均明显低于正常对照组(P<0.05);胎盘组织中TGFβ1的表达水平和MMP-9的表达水平呈负相关(P<0.05)。结论胎盘组织中TGFβ1、MMP-9表达异常引起滋养细胞浸润不足,提示两者可能并共同参与子痫前期的发生和发展。

氧化苦参碱对肝纤维化大鼠血清中MMP-2、MMP-9和TGF-β_1的影响

目的通过观察氧化苦参碱对肝纤维化大鼠血清纤维化指标及血清基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和转化生长因子β1(TGF-β1)的影响。方法采用四氯化碳诱导大鼠肝纤维化模型,同时以氧化苦参碱进行干预。造模8 w后,用放射免疫法检测大鼠血清中透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)的变化;用ELISA方法检测大鼠血清中MMP-2、MMP-9和TGF-β1。结果经氧化苦参碱治疗后,血清HA、LN、PCⅢ及TGF-β1明显降低(P<0.01);血清MMP-2、MMP-9升高,且MMP-2与模型组相比具有统计学意义(P<0.01)。结论氧化苦参碱可以通过降低血清TGF-β1及提高血清MMP-2和MMP-9水平而发挥抗肝纤维化的作用。

MRL/lpr小鼠血清与尿液中明胶酶活性的增龄变化及意义

目的检测不同周龄MRL/lpr小鼠血清与尿液中明胶酶A(MMP-2)与B(MMP-9)的活性,观察其随增龄的变化及在肾脏病变中的意义。方法留取8、16与24周龄MRL/lpr小鼠的血清、尿液与肾脏组织标本,SDS-PAGE明胶酶谱法检测明胶酶活性,检测不同周龄小鼠尿蛋白含量,并对肾组织进行病理学分级;对尿液中明胶酶的活性与尿蛋白进行相关性分析。结果8,16与24周龄MRL/lpr小鼠血清中仅检测到非活化态MMP-2与MMP-9的活性及微弱的活化态MMP-9,其表达随增龄无明显变化;8周龄小鼠尿液中可以检测到较弱的MMP-2与MMP-9活性,以非活化态为主;16与24周龄小鼠尿液中活化态的MMP-2、MMP-9的表达明显增加,肾组织明胶酶的活性亦随增龄明显增加,变化趋势与尿液相似。尿液中明胶酶的活性与尿蛋白的含量及肾脏组织学改变呈正相关。结论MRL/lpr小鼠尿液中MMP-2、MMP-9活性随增龄明显增加,其活性变化与尿蛋白的发生密切相关,可以反映肾组织增龄性病变程度。

明胶酶与恶性肿瘤

肿瘤的发生、发展是多因素作用的结果,明胶酶在其中发挥着广泛作用,已成为目前研究的一个热点。本文将近些年对明胶酶的结构、作用底物、激活和抑制等方面的基本特性,以及它与恶性肿瘤的生长、血管发生、转移和治疗等方面的研究进展作一综述。

格尔德霉素对HGF诱导的人胶质瘤细胞MMP-2及MMP-9活性的影响

目的研究格尔德霉素(geldanamycin,GDM)对肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)诱导的人胶质瘤细胞基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMP)-2及MMP-9活性的影响。方法应用细胞培养技术培养人恶性胶质瘤细胞系U251-MG和U87-MG,用酶谱法测定MMP-2及MMP-9活性。结果HGF作用24h后,U251-MG细胞中MMP-2及MMP-9活性较正常组明显增强(P<0.05);而GDM组则能够显著抑制其活性(P<0.05),并且1000nmol/L的GDM对HGF诱导的肿瘤细胞MMP-2及MMP-9活性增强有明显抑制作用(P<0.05)。结论GDM能够抑制胶质瘤细胞MMP-2及MMP-9的表达,而且对HGF诱导的人胶质瘤细胞MMP-2及MMP-9的活性增强具有明显抑制作用。

紫杉醇对腺样囊性癌细胞侵袭力及明胶酶的影响

目的:研究紫杉醇(taxol)对人高转移腺样囊性癌细胞(ACC-M)侵袭力及明胶酶(MMP-2、MMP-9)的影响。方法:在0.01、0.06、0.1mg/L紫杉醇作用下,用MTT法检测细胞毒作用及ACC-M的黏附能力;用改良BOYDEN小室,检测ACC-M运动及对细胞外基质凝胶(ECM)的侵袭力;采用空斑法及酶联免疫吸附实验(ELISA)检测培养上清液中明胶酶的活性及含量,对所得数据进行t检验。结果:经0.01～0.1mg/L紫杉醇处理后,ACC-M黏附、运动及侵袭ECM能力均下调,培养上清液中明胶酶活性及含量也明显下调,并且与taxol浓度呈剂量依赖关系,P<0.01。结论:低浓度taxol能够下调ACC-M黏附、运动及对ECM的侵袭力,同时能显著下调ACC-M明胶酶的活性及表达,从而推断taxol能显著抑制ACC-M的侵袭力。

大鼠脑缺血-再灌注损伤时MMP-9的表达

目的观察大鼠脑缺血-再灌注后基质金属蛋白酶（MMPs）的表达，探讨其与脑缺血-再灌注损伤的关系．方法应用明胶酶谱法（SDS．PAGE enzymograph）测各组大鼠脑组织不同时间点MMP-9的表达．结果MMP-9的动态变化：模型组缺血-再灌注6h后，大鼠缺血部位脑内可见少量的MMP-9的表达，24h明显升高，48h达高峰，3d时有所下降，5d时水平更低．假手术组大鼠脑内未见MMP-9的表达，24h和48h组与模型组相比有显著性差异．结论脑缺血-再灌注可引起MMP-9表达异常，并且呈动态变化；MMP-9的表达与大鼠脑缺血后的炎性病理损害及脑水肿有关系．

体外循环前后患者血浆基质金属蛋白酶-9浓度及激活程度的变化

目的研究体外循环前后患者血浆基质金属蛋白酶-9(MMP-9)浓度和激活程度的变化。方法拟行心内直视手术的成年患者20例为体外组,同期行其他开胸手术的成年患者8例为对照组。所有患者均采用芬太尼静脉复合麻醉。体外组患者在肝素化后常规建立体外循环,以2.2￣2.4L/(m2·min)恒流灌注,体外循环期间维持鼻温27℃～29℃。分别在手术开始前、转流开始前和停机成功后取血液标本2ml,肝素抗凝,分离出血浆,分装并置于-20℃冰箱中保存。对照组患者的采血时间为手术开始前、进胸后和关胸时,标本处理和保存方法同体外组。全部标本均测定血浆总MMP-9浓度和活性MMP-9浓度,计算MMP-9激活程度。结果体外组患者血浆总MMP-9、活性MMP-9浓度及其激活程度于停机成功后高于对照组(对照组为关胸时)(P<0.01);与手术开始前比较,体外组患者上述指标于停机成功后显著升高(P<0.01),而对照组各时点间差异无统计学意义(P>0.05)。结论体外循环可导致患者血浆MMP-9浓度和激活程度显著升高。

肿瘤坏死因子-α、刀豆素A及机械损伤刺激人支气管上皮细胞系H292表达基质金属蛋白酶-9

目的 :探讨人支气管上皮细胞在受到肿瘤坏死因子 (TNF -α)、刀豆素A(ConA)及机械损伤刺激时基质金属蛋白酶 - 9(MMP - 9)的表达情况。方法 :采用逆转录聚合酶链式反应 (RT -PCR)和金属蛋白酶功能测定法(gelatinzymograhpy) ,观察肿瘤坏死因子 (TNF -α)、刀豆素A(ConA)及机械损伤刺激人支气管上皮细胞系H2 92后 4个时点 (2、6、12h及 2 4h)MMP - 9表达和分泌的动态变化。结果 :TNF -α、ConA及机械损伤刺激均可诱导人支气管上皮细胞系H2 92表达和分泌MMP - 9,无刺激时则不表达 ;单纯机械刺激后 2h ,MMP - 9mRNA开始表达 ,12h达高峰 ,2 4h仍有表达 ,但有所降低 ;ConA与机械损伤联合刺激时 ,MMP - 9表达量明显高于其它各组。同时显示 ,仅在刺激后 2 4h表达MMP - 9活性 ,且以ConA与机械损伤联合刺激组MMP - 9活性为最高。结论 :人支气管上皮细胞在受到TNF -α、ConA及机械损伤刺激时 ,可表达分泌MMP - 9。

妊娠早中期尿中MMP-9蛋白表达与妊高征初筛

目的 :探讨孕妇妊娠早中期尿液基质金属蛋白酶 9(matrixmetalloproteinase 9,MMP 9)和组织金属蛋白酶抑制物 1(tissueinhibitorsofmatrixmetalloproteinase 1,TIMP 1)蛋白表达与妊高征发生的相关性。评价尿液MMP 9及TIMP 1检测在妊高征早期诊断中的临床意义。方法 :用WesternBlotting技术检测了 12例正常未孕育龄妇女和 88例孕妇妊娠早中期尿中的MMP 9及TIMP 1蛋白 ,将 88例孕妇按妊高征发生与否分为妊高征组和非妊高征组。结果 :( 1)在 88例孕妇中 ,有 14例在妊娠晚期相继发生妊高征。 ( 2 )未妊娠组尿中均未检出MMP 9及TIMP 1。 ( 3 )MMP 9在妊高征组和非妊高征组早期 ,阳性表达率分别为 2 1 43 %和 5 1 3 5 % ,两者之间差异有显著性(P <0 0 5 ) ;在中期 ,阳性表达率分别为 14 2 9%和 44 5 9% ,两者之间差异也有显著性 (P <0 0 5 )。 ( 4 )TIMP 1在妊高征组和非妊高征组早期 ,阳性表达率分别为 7 14 %和 12 16% ;在中期 ,阳性表达率分别为 14 2 9%和 2 0 2 7% ,两组之间差异均未见显著性 (P >0 0 5 )。结论 :研究表明 ,妊高征孕妇在其妊娠早中期时尿中MMP 9蛋白的低检出率可能和妊高征相关 ,因此 ,尿中MMP 9的表达有可能成为妊高征临床早期诊断的一个有效而无创的初筛指标。

糖皮质激素抑制狼疮肾炎MMP-2与MMP-9表达的实验研究

目的明确糖皮质激素调控MMP-2、MMP-9表达与活性变化与治疗狼疮肾炎的关系。方法采用MRL/lpr自发性狼疮小鼠为模型,将8wk龄小鼠随机分为甲基强的松龙(MPS)治疗组与对照组(control),MPS治疗组腹腔注射甲基强的松龙25mg·kg-1·d-1,将小鼠饲养至28wk,观察小鼠的存活率、蛋白尿、肾功能与肾脏病理改变。采用免疫组化检测MMP-2与MMP-9的表达变化,利用含有放射自显影的成像乳胶对冰冻肾组织切片进行原位明胶酶活性的检测。结果MPS能够延长狼疮小鼠的存活率(P<0·05)、降低蛋白尿的发生率(P<0·01)、降低血清尿素氮(P<0·01),并减轻肾小球、肾小管-间质以及肾小血管的病理改变(P<0·05)。狼疮小鼠肾小球内MMP-2、MMP-9的表达与活性随增龄明显增加(P<0·01)。MPS能够明显抑制肾小球MMP-2、MMP-9的表达及肾组织原位明胶酶的活性变化(P<0·01)。结论甲基强的松龙对自发性狼疮小鼠的治疗作用与抑制肾脏异常MMP-2与MMP-9的表达与活性密切相关,该作用可能是糖皮质激素治疗狼疮肾炎的机制之一。

MMP-2、MMP-9在系统性硬化病小鼠模型中的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)在系统性硬化病(SSc)小鼠模型中的表达。方法选取16只雌性BALB/c小鼠,随机分成对照组与SSc组,每组8只。SSc组小鼠给予博莱霉素,对照组给予磷酸缓冲盐水(PBS)处理。采用HE、Masson三色染色法观察小鼠皮肤和肺部病理改变,测定羟脯氨酸(HYP)的含量。荧光定量PCR法检测皮肤、肺组织中MMP-2和MMP-9的mRNA含量。结果与SSc组相比,模型组纤维化和炎症反应加重(P<0.05),HYP含量增加(P<0.05),MMP-2和MMP-9的mRNA表达量降低(P<0.05)。结论MMP-2、MMP-9在博来霉素诱导的SSc小鼠模型皮肤、肺组织中表达量增高,MMP-2、MMP-9可能在SSc发生发展中起重要作用。

基质金属蛋白酶9与肺癌关系的研究进展

肺癌的侵袭和转移是指肺癌细胞从原发癌部位脱落后向周围和(或)远处组织侵袭和转移，包括瘤细胞穿过细胞外基质(ECM)屏障、血管壁的基底膜及穿出血管壁进入宿主微环境的过程。而瘤细胞侵袭转移的能力和其诱导产生蛋白酶，从而降解细胞外基质和基底膜的能力密切相关，MMPs是其中最为重要的一组蛋白酶，而MMP-9(又称明胶酶B)能降解ECM的主要成分胶原Ⅳ等，在肺癌的侵袭和转移中有着重要的作用。

基质金属蛋白酶9对系统性红斑狼疮预后的影响

目的探讨基质金属蛋白酶9(MMP-9)对系统性红斑狼疮(SLE)预后的指导意义。方法选取2008年3月至2011年5月重庆市急救医疗中心收治的SLE患者83例,按照狼疮活动计算标准评价患者疾病活动积分并进行分组:积分>2分纳入SLE活动组(62例),积分≤1分纳入SLE稳定组(21例),另外同期选择80例健康体检者作为正常对照组。比较3组受试者的MMP-9水平及SLE患者治疗前后的MMP-9水平。结果 3组受试者MMP-9水平比较差异有统计学意义(P<0.01),且SLE活动组和SLE稳定组MMP-9水平显著低于正常对照组(P<0.05)。治疗前SLE患者MMP-9水平为(78±16)g/L,治疗后为(79±17)g/L,差异无统计学意义(P>0.05)。SLE患者MMP-9与其24 h尿蛋白、系统性红斑狼疮疾病活动度评分、抗ds-DNA呈明显负相关(r=-0.517,-0.832,-0.439,均P<0.05),与C3、C4呈明显正相关(r=0.355,0.360,均P<0.05)。结论患者外周血MMP-9水平下降提示机体炎性组织和受损血管中MMP-9水平上升,预后较差。

明胶酶与皮肤鳞状细胞癌的相关性研究进展

明胶酶（gelatinase）又称为Ⅳ型胶原酶,属基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase,MMPs）家族中的一个重要成员,包括MMP-2和MMP-9。MMPs[1]是一组在结构上具有极大同源性、能降解细胞外基质（extracellu larmatrix,ECM）的内肽酶的总称,因为含有金属离子（锌、钙）而得名。MMPs能参与机体的许多生理和病理过程,在正常成人体内表达水平和活性较低,当系统受到刺激或处于某种病理状态时有所升高。

基质金属蛋白酶9在妊娠及分娩中的作用

基质金属蛋白酶9（MMP-9）是人体内最重要的蛋白酶之一,属于众多基质金属蛋白酶中明胶酶的一种,又称明胶酶B,相对分子质量为95 000,通过酶系统分解细胞外基质从而参与人体许多生理及病理过程.生理pH值时,在锌离子作用下,参与细胞外基质的降解与重建,故也称其为基质因子.在正常生理情况下,能够切断任何细胞外基质成分,调节细胞黏着性、作用于细胞外成分或其它蛋白成分而启动潜在生物学功能.研究表明MMP-9在人体妊娠过程中直接或间接参与胚胎发育、组织模型再塑及创伤修复等正常生理过程.MMP-9的底物主要是Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型胶原,明胶及弹性纤维.因其作用底物的广泛,表达细胞众多而备受重视,成为近年来国际国内研究的焦点之一.现就MMP-9在产科妊娠及分娩中的国内外研究进展做一个综合阐述.

基质金属蛋白家族中明胶酶在原发性肝癌诊断与治疗中的研究进展

原发性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是全球第5位常见的恶性肿瘤,占恶性肿瘤致死原因的第3位,是威胁人类生命的主要恶性肿瘤之一。HCC的生物学行为包括生长、浸润、转移,三者均是HCC患者死亡的重要原因,约90%患者死于癌细胞的侵袭和转移。癌细胞的侵袭和转移依赖于多种因子和信号传递途径,其中基质金属蛋白酶家族(matrix metalloproteinases,MMPs)中明胶酶(MMP-9、MMP-2)在HCC的侵袭、转移中起着重要作用,在恶性肿瘤侵袭和转移的过程中,癌细胞必须突破细胞外基质(extracelluar matrix,ECM)和基底膜(basement membrance,BM),而二者组成成分几乎都能被明胶酶分解,因此,明胶酶可作为一种新的肿瘤标记物判断患者转移、复发、预后情况,此外明胶酶作为药物作用的靶点应用于临床的前景日益广阔。本文旨在对明胶酶的结构、生物学特性、活性调节机制等方面,以及其在临床诊断和治疗中的应用前景做一综述。