葡萄糖转运蛋白2在肝源性糖尿病患者肝组织中的表达及意义

目的探讨葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)在肝源性糖尿病肝组织中的表达及意义。方法选取2012年6月-2014年7月首都医科大学附属北京佑安医院重症肝病科和肝胆外科肝组织标本40例,免疫组化检测各组(正常组、慢性乙型肝炎组、肝硬化组、肝源性糖尿病组)肝组织中GLUT2的表达水平。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验,计数资料比较采用Fisher确切概率法。结果肝源性糖尿病组的空腹血糖、糖化血红蛋白、糖化血清白蛋白、BMI以及肝组织脂肪变性比例与其他3组比较差异均有统计学意义(P值均<0.05)。免疫组化显示GLUT2主要表达于肝细胞膜,尤其是靠近窦腔部位的细胞膜上,在正常肝组织、慢性乙型肝炎、肝硬化肝组织的表达均表现为从中央静脉向汇管区逐渐减少的趋势,有1例在肝硬化肝细胞再生结节部位表达增强。肝源性糖尿病肝组织有明显的脂肪变性(6/10),GLUT2在脂变部位呈强阳性表达,且表达相对均匀,在脂变细胞周围肝细胞质中的表达也有所增加,与窦腔侧的表达无明显差别。结论肝源性糖尿病肝组织易合并脂肪变性,且GLUT2的表达明显增加,可能是其糖代谢异常的发病机制之一。

钠-葡萄糖协同转运蛋白2抑制剂抗心律失常作用研究进展

钠-葡萄糖协同转运蛋白-2抑制剂(sodium-glucose cotransporter 2 inhibitors,SGLT2i)是一种新型的降糖药物,在临床实践中已得到广泛应用。近期多项临床研究表明,心力衰竭(简称心衰)患者在规范治疗基础上加用SGLT2i能够显著降低其心衰住院及心血管病死亡风险,且这一保护作用独立于SGLT2i的降糖作用。因此,国内外心衰诊疗指南及专家共识已将SGLT2i列为抗心衰药物治疗的I类推荐。近年来,研究者们致力于进一步探索SGLT2i在抗心律失常方面的作用。研究表明,SGLT2i具有降低心房颤动、室性心律失常和心脏性猝死发生风险的作用,其所涉及的抗心律失常作用机制包括逆转心房和心室电重构及结构重构、降低炎症反应及氧化应激、降低体重及心外膜脂肪组织体积、改善线粒体功能等。本文对SGLT2i抗心律失常作用及其相关潜在机制进行综述,期望为进一步开展深入研究及临床应用提供参考。

钠-葡萄糖协同转运蛋白2抑制剂在非糖尿病慢性肾脏病患者中应用的研究进展

钠-葡萄糖协同转运蛋白2(SGLT2)抑制剂是一种新型降糖药物。近年来临床研究发现SGLT2抑制剂对非糖尿病导致的慢性肾脏病(CKD)具有肾脏保护作用:在肾素-血管紧张素-醛固酮系统抑制剂基础上联合应用SGLT2抑制剂,可进一步降低IgA肾病、轻中度蛋白尿的局灶节段性肾小球硬化患者的尿蛋白水平,延缓CKD进展。根据临床试验结果,推测SGLT2抑制剂在非糖尿病CKD中应用的理论依据:促进葡萄糖排泄,促进钠和水的排泄,通过减少热量来减轻患者体重;改善肾小管-肾小球管球反馈,收缩肾小球入球小动脉,降低肾小球滤过压。现有的临床证据将有助于进一步探讨CKD的进展机制,特别是SGLT2在CKD进展中发挥的作用,将来可能成为非糖尿病CKD的一线治疗。

葡萄糖转运蛋白-2逆转录病毒表达载体构建/包装及其鉴定

目的构建葡萄糖转运蛋白-2(glucose transporter-2,GLUT-2)基因逆转录病毒表达载体及其稳定产毒细胞系,为新型"人工胰岛β细胞"的构建奠定基础。方法质粒pCB7/GLUT2经EcoRⅠ、BamHⅠ双酶切,克隆至逆转录病毒载体PLXSN,构建成重组逆转录病毒表达载体pL-GLUT2-SN,经酶切及测序鉴定;转pL-GLUT2-SN至包装细胞系PA317,G418抗性筛选,检测上清病毒滴度,挑选滴度较高的稳定产毒细胞克隆行PCR及RT-PCR鉴定。结果建立GLUT-2基因逆转录病毒表达载体pL-GLUT2-SN,经酶切及测序证实目的基因插入位点及读码框架正确;所建稳定产毒细胞克隆PA317/GLUT2,其最高病毒滴度达7.1×105CFU/ml,PCR及RT-PCR证实GLUT-2基因整合入其中并稳定表达。结论成功构建GLUT-2基因逆转录病毒表达载体及其稳定产毒细胞系,为"人工胰岛β细胞"的构建奠定了基础。

钠-葡萄糖共同转运体2抑制剂对2型糖尿病患者胰岛素敏感性及血清GPC-4的影响

目的 :探讨达格列净对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者胰岛素敏感性及血清磷脂酰肌醇蛋白聚糖-4(glypican-4,GPC-4)的影响。方法:80例T2DM患者采用达格列净治疗12周,观察血糖、血脂、胰岛素敏感性及血清GPC-4水平的变化。以40例健康人作为正常对照。结果:T2DM组(5.05±0.98)的血清GPC-4水平低于正常对照组(6.42±0.51)(P=0.000),T2DM组经达格列净治疗后血糖(P=0.000)、HbA1c(P=0.000)和HOMA-IR(P=0.000)均降低,而GPC-4水平升高(P=0.000)。在T2DM组,HbA1c(β=-0.608,P=0.000)和1/HOMA-IR(β=-2.566,P=0.003)均是血清GPC-4的独立影响因子,但治疗前后GPC-4的升高程度与HbA1c降低程度正相关(r=0.397,P=0.002),与HOMA-IR的变化无关(r=-0.062,P=0.539)。结论:达格列净具有降糖、改善胰岛素敏感性和升高循环GPC-4水平的作用,但其对血清GPC-4的影响可能与降糖有关,与其改善胰岛素敏感性的作用无关。

钠-葡萄糖共转运蛋白2抑制剂相关性糖尿病酮症酸中毒

钠-葡萄糖转运蛋白2抑制剂(SGLT2i)是一种通过增加尿糖排泄来降低血糖的新型口服降糖药,因具有心肾保护作用而广泛地应用于2型糖尿病(T2D)患者。但在临床中发现该类药物可通过多种途径升高血酮体水平,在疾病的急性期、手术、食物和液体摄入减少、脱水、酒精中毒、胰岛素用量骤减等情况,特别是当胰岛素缺乏和脱水同时出现时,血酮体水平的进一步升高会引起非高血糖性酮症酸中毒(euDKA)。值得注意的是在这类DKA发生时,患者的血糖水平可以正常或轻度升高,而且起病初期临床症状往往不太典型,仅有轻微的头晕、乏力、恶心或只是略感不适,常常会延误诊断。因此,临床医生在给患者使用SGLT2i之前,需要评估患者是否具有发生DKA的高危因素,选择合适的患者使用该药。在用药过程中,定期监测血β-羟丁酸水平,在出现可能导致DKA的诱因时及时停用该药。

钠-葡萄糖共转运蛋白2抑制剂致非高血糖性酮症酸中毒研究进展

钠-葡萄糖共转运蛋白2抑制剂(SGLT2i)通过抑制近端小管的葡萄糖重吸收,增加尿糖排泄来降低血糖水平,并且具有心血管、肾脏保护作用,已经逐渐成为二线降糖药物。随着应用人群的不断扩大,其非高血糖性酮症酸中毒(euDKA)的副作用报道逐渐增加,因患者血糖通常正常或稍高于正常值,不易引起医生及患者注意,易误诊。因此,本文主要就SGLT2i导致euDKA的相关机制及诱因、预防措施进行综述,为降低此类药物在临床上的不良风险提供依据。

羊栖菜多糖对糖尿病大鼠胰岛β细胞葡萄糖转运蛋白-2表达的影响

探讨羊栖菜多糖对2型糖尿病(2-diabetes mellitus,2-DM)大鼠降血糖作用机制。通过静脉注射链脲佐菌素(STZ)将Wistar大鼠制作成2型糖尿病模型。8周后,测定空腹血糖(FPG)和空腹胰岛素(FINS);并用RT-PCR法检测胰岛β细胞中葡萄糖转运蛋白-2 mRNA(Glut-2 mRNA)的表达水平,发现羊栖菜多糖可能通过上调糖尿病大鼠胰岛β细胞中Glut-2 mRNA表达,从而改善大鼠胰岛素抵抗、降低血糖。

钠-葡萄糖同向转运蛋白2(SGLT2)及其抑制剂研究进展

在2型糖尿病的发病机制中,提出了"八重奏"的病理生理理论,基于该理论,肾脏对糖尿病的重吸收作用也成为治疗的新靶点,而钠-葡萄糖同向轻化蛋白2(SGLT2)在肾近端小管表达,可介导葡萄糖的重吸收,增加尿糖排泄从而降低血糖,因此SGLT2有望成为2型糖尿病的治疗新药物,现将SGLT2的结构及在糖尿病患者中的表达以及临床研究结果相关文献进行回顾总结。

易化葡萄糖载体研究进展

位于细胞膜上的易化葡葡糖载体 (facilitatedglucosetransporter,GLUTs)促进体内葡葡糖的跨膜转运 ,它对稳定细胞能量和维持生命活动起到至关重要作用。到目前为止已相继发现并鉴定了 12种GLUTs ,它们由不同基因编码 ,具有相似的蛋白质结构和生物功能 ,在基因表达和细胞内分布受多种因素调控 ,其中最重要的是胰岛素。胰岛素通过PI3K信息通路和Cbl激活蛋白 (Cb1activatingprotein ,CAP) Cbl信息通路实现对GLUT4等的快速周转 ,从而改变葡葡糖进入细胞的量。深入了解GLUTs的生物学特性和调控机制具有重要的临床意义。

CV-1细胞中固醇调节元件结合蛋白-1c对Ⅰ型葡萄糖载体mRNA稳定性及蛋白表达的影响

[目的]探讨在CV-1细胞中固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)对Ⅰ型葡萄糖载体mRNA稳定性和蛋白表达的影响.[方法]利用DNA克隆技术,将SREBP-1c和其阴性表达体(ADDN)DNA序列重组到表达载体pSV-sport上.用SREBP-1c转染CV-1细胞,应用Northern Blot方法观察SREBP-1c对Ⅰ型葡萄糖载体mRNA的表达及其稳定性的影响,应用Western Blot方法观察SREBP-1c对Ⅰ型葡萄糖载体蛋白表达的影响.[结果]SREBP-1c可增加Ⅰ型葡萄糖载体的mRNA表达水平及稳定性,可提高Ⅰ型葡萄糖载体的蛋白表达水平.[结论]SREBP-1c可增强Ⅰ型葡萄糖载体的蛋白表达,可能通过调节Ⅰ型葡萄糖载体的表达水平而参与胰岛素对血糖的调节过程.

肠道上皮主要葡萄糖转运载体及其作用机制

葡萄糖在肠道的吸收主要通过Na^+依赖性葡萄糖转运载体1(SGLT1)和易化葡萄糖转运载体2(GLUT2)实现。许多影响肠道葡萄糖吸收功能的因素都是通过调控SGLT1和GLUT2转录水平、mRNA稳定性及蛋白水平来实现的。通过对葡萄糖转运载体结构和功能的研究,不仅为人类肥胖症和糖尿病等相关疾病提供潜在药物靶点,还能为调节动物营养物质吸收提供思路。本文综述了肠道上皮主要葡萄糖转运载体SGLT1和GLUT2的功能和影响其在肠道上皮表达的因素,旨在从分子层面揭示葡萄糖在肠道的吸收以及体内葡萄糖平衡的调控。

钠-葡萄糖协同转运蛋白2抑制剂治疗心力衰竭的潜在机制及临床研究进展

钠-葡萄糖协同转运蛋白2(sodium-glucose cotransporter 2,SGLT-2)抑制剂是一种新型降糖药物,通过抑制近端肾小管对葡萄糖的重吸收,导致尿糖增加、血糖水平下降。多项心血管结局试验已经证明,SGLT-2抑制剂对糖尿病及非糖尿病患者均有显著的心血管益处,尤其是可以明显降低心力衰竭(简称心衰)患者的心血管死亡或心衰住院风险,但其机制尚未完全阐明,可能与其对心脏负荷、心肌能量代谢、心室重塑及心肌纤维化的改善作用,以及保护肾脏和维持心脏离子稳态等作用有关。本文就SGLT-2抑制剂治疗心衰的潜在机制及临床研究进展进行综述。

葡萄糖转运蛋白SGLT1和GLUT2在槲皮素肠道吸收中的作用研究

目的探讨槲皮素在人小肠吸收模型Caco-2单层细胞上的吸收特征以及基于葡萄糖肠道吸收中的主动转运蛋白--Na^+依赖性葡萄糖转运蛋白1和易化扩散转运蛋白--葡萄糖易化扩散转运蛋白2的跨膜吸收机制。方法采用Caco-2单层细胞模型,利用Na^+依赖性葡萄糖转运蛋白1和葡萄糖易化扩散转运蛋白2特效抑制剂根皮苷和根皮素,以丁螺环酮为内标、LC-MS法测定孵育30~150分钟内各时间节点Caco-2细胞透过面槲皮素浓度,研究Na^+依赖性葡萄糖转运蛋白1和葡萄糖易化扩散转运蛋白2在槲皮素肠道吸收中的作用,探讨槲皮素的肠道吸收机制。结果在孵育30~150分钟各时间点,均在透过面检测到相应的槲皮素原形;透过面的槲皮素含量在150分钟孵育时间内呈现先升后降的趋势特征,120分钟达峰,随后下降,没有观察到平台期;葡萄糖和根皮苷对槲素的跨膜转运均表现出了明显的抑制作用,跟皮苷的抑制作用随孵育时间逐渐减弱,而根皮素却明显上调了槲皮素的透过水平(P<0.05),原因不明。结论槲皮素可以以完整分子的形式透过Caco-2细胞单层,Na^+依赖性葡萄糖转运蛋白1和葡萄糖易化扩散转运蛋白2可能同时参与槲皮素的跨膜转运,Na^+依赖性葡萄糖转运蛋白1在槲皮素的跨膜转运占据重要的位置,而葡萄糖易化扩散转运蛋白2的作用有待进一步研究。

钠-葡萄糖共转运蛋白2抑制剂治疗室性心律失常的临床研究和作用机制研究进展

室性心律失常是导致心脏性猝死的重要原因之一。钠-葡萄糖共转运蛋白2(SGLT2)抑制剂可以减少室性心律失常的发生。上市的SGLT2抑制剂有达格列净、恩格列净、卡格列净和艾托格列净。SGLT2抑制剂临床用于治疗室性心律失常,其作用机制为影响离子通道、线粒体和氧化应激、心肌纤维化、低血糖和QT间期、能量代谢。总结了SGLT2抑制剂治疗室性心律失常的临床研究和作用机制,为开拓室性心律失常的治疗提供新思路。

桃胶多糖对Caco-2细胞模型吸收葡萄糖的影响

目的:通过Caco-2体外细胞模型研究桃胶多糖影响葡萄糖吸收的机制。方法:以培养的Caco-2单层细胞为葡萄糖吸收模型,观察在桃胶多糖影响下,葡萄糖吸收量随时间的变化关系,从而推断桃胶多糖对葡萄糖跨膜转运过程的影响。结果:一定浓度桃胶多糖作用下,不同浓度葡萄糖的吸收量与对照组相比,均有显著差异(P<0.05),表明葡萄糖吸收受到桃胶多糖的抑制,且葡萄糖浓度越低,桃胶多糖抑制葡萄糖吸收的效果越显著(P<0.05);不同浓度的桃胶多糖作用下,相同浓度葡萄糖的吸收量与对照组相比,均有显著差异(P<0.05),且桃胶多糖浓度越高,抑制葡萄糖吸收的效果越好(P<0.05)。结论:桃胶多糖能够竞争性抑制葡萄糖的吸收,其是否可能通过影响或者占据肠道刷状缘侧钠葡萄糖共转运载体1(SGLT-1)上葡萄糖的吸收位点达到降血糖目的,其机制尚有待进一步研究。

葡萄糖转运体1缺陷综合征三例报告并文献复习

目的:探讨葡萄糖转运体1缺陷综合征(GLUT1-DS)的临床特征与治疗。方法:报道3例SLC2A1基因突变所致GLUT1-DS患儿的临床和遗传学资料,并复习相关文献。结果:男1例,女2例,首次就诊年龄分别为2岁7个月、3岁7个月、1岁3个月;首次就诊主诉导致诊断分别为:热性惊厥、脑性瘫痪、癫痫;基因检测原因分别为:热性惊厥患儿病程中伴有双眼上翻且脑脊液检查葡萄糖降低、脑性瘫痪患儿语言运动发育落后且病程中伴有发作性下肢无力、癫痫患儿经丙戊酸钠治疗后仍频繁抽搐且自幼语言运动发育落后;基因检测结果均为SLC2A1新发突变,生酮饮食治疗有效。结论:GLUT1-DS具有不同临床表现,患儿出现发作性症状(惊厥或运动障碍)伴语言运动发育落后时,应考虑GLUT1-DS,基因检测有助于确诊,生酮饮食治疗有效。

阻塞性睡眠呼吸暂停综合征合并高血压患者全基因组甲基化及葡萄糖转运蛋白4基因的DNA甲基化与并发糖尿病的关系

目的收集睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)合并高血压和原发性高血压(EH)患者进行全基因组甲基化测序寻找差异甲基化位点。在高血压人群,进一步探讨OSAS合并糖尿病与葡萄糖转运蛋白4基因[溶质载体家族2A4(SLC2A4)基因]DNA甲基化的关系。方法全基因组甲基化阶段:从2010年1月至3月,连续招募年龄30~60岁、肾功能和肝功能正常的高血压患者,完善多导睡眠监测,中重度OSAS合并高血压患者作为试验组(12例),年龄、体重指数匹配的非OSAS EH患者作为对照组(12例),通过Microarray高通量基因表达检测外周血甲基化情况。单基因验证阶段:全基因组甲基化检测和京都基因和基因组数据库(KEGG)富集通路发现2型糖尿病通路有四个差异基因,选取其中的SLC2A4基因,进一步扩大样本量在高血压人群收集OSAS合并糖尿病(40例)、OSAS非糖尿病(66例)、非OSAS非糖尿病(39例)三组患者,验证单基因甲基化差异位点。结果全基因组研究中,OSAS合并高血压相比较EH共鉴定出516个差异甲基化位点(低甲基化361个,高甲基化155个),所有选择的差异甲基化位点均存在显著性差异(P<0.05和∣Beta值差异∣>0.14)。通过基因本体(GO)、KEGG富集进行功能学基因富集分析。与非OSAS非糖尿病组相比,OSAS非糖尿病组中SLC2A4基因存在高甲基化位点:CpG2-11、CpG2-13、CpG2_15、CpG1_18、CpG2_21.22、CpG2_23.24和CpG22_27;OSAS合并糖尿病组高低甲基化位点并存,低甲基化位点为CpG1_2、CpG1_5、CpG2_6、CPG17、CPG110.11、CPG117、CPG118.19、CPG214、CPG218、CPG225、CPG227,高甲基化位点为CpG2-13、CpG2_15和CpG2_20。结论OSAS合并高血压较EH,存在差异甲基化位点,为后续甲基化研究提供差异甲基化基因数据库。选取2型糖尿病通路中的SLC2A4基因进行单基因验证,证实该基因甲基化差异参与OSAS糖尿病共病。

肝细胞核因子-1α对小鼠Ⅰ型葡萄糖载体表达的影响

[目的]探讨在CV-1细胞中肝细胞核因子-1α(HNF-1α)对小鼠Ⅰ型葡萄糖载体(mGLUT1)表达的影响.[方法]利用DNA克隆技术,将HNF-1αcDNA序列重组到表达载体pSV-sport上,以HNF-1α转染CV-1细胞,应用Northern blot方法测定HNF-1α对mGLUT1 mRNA表达的影响.[结果]HNF-1α可提高mGLUT1 mRNA表达水平及稳定性.[结论]HNF-1α可增强mGLUT1的表达,可能通过调节GLUT1的表达参与胰岛素对血糖的调节过程.

罗格列酮对小鼠Ⅱ型葡萄糖载体mRNA表达的影响

[目的]探讨罗格列酮对小鼠Ⅱ型葡萄糖载体(mGLUT2)mRNA表达的影响.[方法]采用分子克隆技术将过氧化物酶体增殖物受体γ(PPARγ)、维甲酸类受体X(RXRα)及mGLUT2cDNA分别克隆到表达载体pCMX和pGL3b上.PPARγ,RXRα,mGLUT2克隆载体转染NIH3T3细胞,处理或不处理罗格列酮,应用荧光素酶活性测定法及RNA印迹方法等测定罗格列酮对mGLUT2重组体荧光素酶活性调节及对mRNA表达的影响.[结果]罗格列酮可激活mGLUT2重组体荧光素酶的活性,亦可增加mRNA的表达水平.[结论]罗格列酮可增强mGLUT2的表达,可能参与PPARγ对mGLUT2的调节过程.