易化葡萄糖载体研究进展

位于细胞膜上的易化葡葡糖载体 (facilitatedglucosetransporter,GLUTs)促进体内葡葡糖的跨膜转运 ,它对稳定细胞能量和维持生命活动起到至关重要作用。到目前为止已相继发现并鉴定了 12种GLUTs ,它们由不同基因编码 ,具有相似的蛋白质结构和生物功能 ,在基因表达和细胞内分布受多种因素调控 ,其中最重要的是胰岛素。胰岛素通过PI3K信息通路和Cbl激活蛋白 (Cb1activatingprotein ,CAP) Cbl信息通路实现对GLUT4等的快速周转 ,从而改变葡葡糖进入细胞的量。深入了解GLUTs的生物学特性和调控机制具有重要的临床意义。

CV-1细胞中固醇调节元件结合蛋白-1c对Ⅰ型葡萄糖载体mRNA稳定性及蛋白表达的影响

[目的]探讨在CV-1细胞中固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)对Ⅰ型葡萄糖载体mRNA稳定性和蛋白表达的影响.[方法]利用DNA克隆技术,将SREBP-1c和其阴性表达体(ADDN)DNA序列重组到表达载体pSV-sport上.用SREBP-1c转染CV-1细胞,应用Northern Blot方法观察SREBP-1c对Ⅰ型葡萄糖载体mRNA的表达及其稳定性的影响,应用Western Blot方法观察SREBP-1c对Ⅰ型葡萄糖载体蛋白表达的影响.[结果]SREBP-1c可增加Ⅰ型葡萄糖载体的mRNA表达水平及稳定性,可提高Ⅰ型葡萄糖载体的蛋白表达水平.[结论]SREBP-1c可增强Ⅰ型葡萄糖载体的蛋白表达,可能通过调节Ⅰ型葡萄糖载体的表达水平而参与胰岛素对血糖的调节过程.

肠道上皮主要葡萄糖转运载体及其作用机制

葡萄糖在肠道的吸收主要通过Na^+依赖性葡萄糖转运载体1(SGLT1)和易化葡萄糖转运载体2(GLUT2)实现。许多影响肠道葡萄糖吸收功能的因素都是通过调控SGLT1和GLUT2转录水平、mRNA稳定性及蛋白水平来实现的。通过对葡萄糖转运载体结构和功能的研究,不仅为人类肥胖症和糖尿病等相关疾病提供潜在药物靶点,还能为调节动物营养物质吸收提供思路。本文综述了肠道上皮主要葡萄糖转运载体SGLT1和GLUT2的功能和影响其在肠道上皮表达的因素,旨在从分子层面揭示葡萄糖在肠道的吸收以及体内葡萄糖平衡的调控。

肝细胞核因子-1α对小鼠Ⅰ型葡萄糖载体表达的影响

[目的]探讨在CV-1细胞中肝细胞核因子-1α(HNF-1α)对小鼠Ⅰ型葡萄糖载体(mGLUT1)表达的影响.[方法]利用DNA克隆技术,将HNF-1αcDNA序列重组到表达载体pSV-sport上,以HNF-1α转染CV-1细胞,应用Northern blot方法测定HNF-1α对mGLUT1 mRNA表达的影响.[结果]HNF-1α可提高mGLUT1 mRNA表达水平及稳定性.[结论]HNF-1α可增强mGLUT1的表达,可能通过调节GLUT1的表达参与胰岛素对血糖的调节过程.

罗格列酮对小鼠Ⅱ型葡萄糖载体mRNA表达的影响

[目的]探讨罗格列酮对小鼠Ⅱ型葡萄糖载体(mGLUT2)mRNA表达的影响.[方法]采用分子克隆技术将过氧化物酶体增殖物受体γ(PPARγ)、维甲酸类受体X(RXRα)及mGLUT2cDNA分别克隆到表达载体pCMX和pGL3b上.PPARγ,RXRα,mGLUT2克隆载体转染NIH3T3细胞,处理或不处理罗格列酮,应用荧光素酶活性测定法及RNA印迹方法等测定罗格列酮对mGLUT2重组体荧光素酶活性调节及对mRNA表达的影响.[结果]罗格列酮可激活mGLUT2重组体荧光素酶的活性,亦可增加mRNA的表达水平.[结论]罗格列酮可增强mGLUT2的表达,可能参与PPARγ对mGLUT2的调节过程.

葡萄糖转运蛋白1缺陷综合征误诊剖析

目的：探讨葡萄糖转运蛋白1缺乏综合征（ glucose transporter type 1 deficiency syndrome, GLUT1-DS）的临床特点,分析误诊原因并提出防范误诊的措施。方法对GLUT1-DS 1例的临床资料进行回顾性分析。结果本例以早发惊厥为主要临床表现,同时伴有精神发育迟滞、共济失调等,曾多次就诊外院,行脑脊液、脑电图、头颅MRI及染色体核型分析等诊断为不典型化脓性脑膜炎、癫痫,予相关治疗后不缓解。到我院后查脑脊液糖1.50 mmol/L,脑脊液糖与血糖比值为0.319；脑电图示：背景活动慢,以中高幅4～5 Hz θ波为主。疑诊存在基因突变,不除外GLUT1-DS,遂行SLC2A1基因检测示c.516＋2T＆gt;G,明确诊断为GLUT1-DS,予生酮饮食治疗后症状缓解。结论 GLUT1-DS为可治疗的常染色体显性遗传病,脑细胞葡萄糖水平低下可造成不同程度的脑损伤。临床应提高对本病的认识,尽早诊断并治疗可显著改善患儿预后。

小肠上皮单糖转运体GLUT5与SGLT1的基本生理和功能

易化性单糖转运体5(GLUT5)和Na+依赖性单糖转运体1(SGLT1)是哺乳动物体内的2种单糖转运体,分别属于GLUTs家族和SGLTs家族,主要存在于小肠上皮细胞肠腔侧,对碳水化合物的吸收起重要作用。其表达与年龄、肠道部位、日周期节律等因素有关,并受到饮食、激素分泌、周围电生理变化以及底物浓度等多种因素的影响。其数量和功能上的异常可导致一系列病理改变和临床症状。但目前对于这两种转运体基本机理还远未阐明,有待于进一步研究。

葡萄糖转运载体及其在单糖肠吸收中的作用研究进展

糖类物质是机体的主要能源物质,对机体代谢与内环境稳态有非常重要的作用。葡萄糖作为该类化合物主要的消化尾产物,其吸收主要通过位于肠黏膜上皮细胞的两类葡萄糖转运载体家族来完成。在该吸收过程中,Na+依赖性葡萄糖转运载体1(SGLT-1)和易化性葡萄糖转运载体2、5(Glut-2、Glut-5)发挥了重要的作用。本文综述了肠道不同葡萄糖转运载体家族的成员和分类,并结合葡萄糖肠吸收跨膜转运的机理详细阐述了上述三个载体的分布和影响其功能及表达的因素。

葡萄糖转运蛋白1和结蛋白在胸膜反应性间皮细胞增生及上皮样恶性间皮瘤中的表达及其意义

目的探讨葡萄糖转运蛋白1（GLUT-1）和结蛋白在胸膜上皮样恶性间皮瘤（EMM）和反应性间皮细胞增生（RMH）中的表达情况及其在辅助胸膜良恶性病变鉴别诊断中的意义。方法选取胸膜活检组织142例，其中RMH58例，EMM53例，另选取胸膜转移性腺癌（MAC）31例作为对照。应用免疫组织化学EliVision法检测GLUT-1及结蛋白在各组病例的表达情况，并分析各组表达差异。结果GLUT-1在RMH、EMM及MAC中的阳性表达率分别为13．8％（8／58）、81．1％（43／53）和77．4％（24／31），恶性病变EMM及MAC组的阳性率均显著高于良性病变RMH组，差异均有统计学意义（均P〈0．01）。结蛋白在RMH、EMM及MAC中的阳性表达率分别为77．6％（45／58）、9．4％（5／53）及0（0／31），RMH组显著高于其余两组，差异均有统计学意义（均P〈0．01）。组合分析两抗体，GLUT-1阳性及结蛋白阴性仅见于1例（1．7％，1／58）RMH病例，而见于41例（77．4％，41／53）EMM病例、24例（77．4％，24／31）MAC病例，两抗体的此种组合表达模式在RMH组出现几率显著低于其余两组，差异均有统计学意义（均P〈0．01）。结论GLUT-1和结蛋白在RMH、EMM及MAC中的表达差异可辅助部分良恶性问皮病变的鉴别诊断，组合应用两个抗体具有更高的特异性。

一例原发性肾性糖尿患者的临床与基因突变分析

目的探讨1例原发性肾性糖尿(primary renal glucosuria,PRG)患者的临床表现及其分子生物学基础。方法详细收集患者的临床资料、生化检查及影像学检查结果,抽取外周静脉血,提取基因组DNA,聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增SLC5A2基因的14个外显子及其与内含子的交界区,测序确定突变情况。结果患者临床表现、实验室检查和影像学检查符合PRG诊断。基因突变分析显示,患者SLC5A2基因c DNA序列的第877位腺嘌呤A突变为胸腺嘧啶G(c.877 A>G),造成第293位氨基酸由丝氨酸改变为半胱氨酸(p.Ser293Cys),该突变位于SLC5A2的第7外显子。蛋白序列的保守性分析和突变蛋白的功能分析均表明p.Ser293Cys为致病性突变。结论通过SLC5A2基因突变分析,从分子遗传学方面证实患者PRG的诊断。临床上血糖正常的患者出现尿糖阳性且无其他近端肾小管功能障碍表现的患者应该考虑到该疾病可能,基因分析有助于确诊。

葡萄糖转运蛋白1在卵巢浆液性肿瘤中的表达及其意义

目的探讨葡萄糖转运蛋白1（GLUT-1）在卵巢浆液性肿瘤中的表达及其意义。方法收集100例卵巢浆液性肿瘤患者手术标本，采用多克隆抗体的GLUT-1免疫组织化学SP法进行染色，分析其异常表达与肿瘤临床分期及分型之间的相关性。结果正常组织中GLUT-1表达为阴性，GLUT-1在良性、交界性、恶性卵巢浆液性肿瘤中的表达呈增高趋势（P〈0．001），GLUT-1的表达与卵巢浆液性囊腺癌临床分期呈正相关（P〈0．001）。结论GLUT-1的过度表达与卵巢浆液性肿瘤的组织学和分期相关。GLUT-1有望成为检测卵巢浆液性肿瘤恶变的标志物。

SLC2A9基因rs13137074位点双荧光素酶报告系统的构建及其对基因活性的影响

目的构建该实验室定点突变联合双荧光素酶报告系统,并通过该系统了解rs13137074基因位点突变对葡萄糖易化转运蛋白-9(SLC2A9)基因转录活性的影响。方法采用定点突变法对rs13137074基因位点进行点突变,并通过双酶切的方式连接构建双荧光素酶报告系统质粒。随后通过细胞转染及荧光素酶检测等方法确定突变位点对SLC2A9基因转录活性的影响程度。结果rs13137074基因位点突变成功;质粒转染过程中Lipofectamine 3000终水平为1.5μL/mL,转染时间为48 h时效果最佳;rs13137074位点发生突变时可导致SLC2A9基因转录活性下降23.60%。结论人群血尿酸水平可能受SLC2A9基因调控区rs13137074位点单核苷酸多态性的影响。

葡萄糖转运蛋白1、缺氧诱导因子-1α和Ki-67在肝细胞癌中的表达及其相关性研究

目的探讨葡萄糖转运蛋白1（Glutl）、缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和Ki-67在肝细胞癌中的表达及其相关性。方法运用组织芯片技术，通过免疫组织化学Envision法检测171例肝细胞癌组织、55例癌旁组织、22例正常肝组织中Glutl、HIF-1α和Ki-67的表达情况，并结合临床病理因素进行分析。结果Glutl、HIF-1α和Ki-67在171例肝细胞癌组织中的阳性表达率分别为15．2％、19．9％和66．1％，明显高于其在癌旁肝组织（1．8％、1．8％和5．5％）和正常肝组织（均阴性）中的表达率（P〈0．05）。Glutl和HIF-1α表达与肝细胞癌分化程度和TNM分期有关（P〈0．01，P〈0．05）；Ki-67表达与肝细胞癌分化程度有关（P〈0．01）。肝细胞癌组织中Glutl与HIF-1α的表达呈正相关（r1=0．553，P〈0．05）；Glutl、HIF-1α与Ki-67均呈正相关（r2=0．560，r3=0．613，P〈0．05）。结论Glutl、HIF-1α和Ki-67在肝细胞癌的发生发展中起着不同程度的作用，联合检测Glutl、HIF-1α和Ki-67可能有助于判断肝细胞癌的恶性程度、转移潜能及预后分析。

钠-葡萄糖共转运蛋白2基因突变致原发性肾性糖尿一例并文献复习

目的通过报道1例原发性肾性糖尿（PRG）并复习相关文献，提高临床医师对PRG的临床特征及分子致病机制的深入认识。方法收集1例PRG患者的临床资料、实验室检查、影像学检查及SLC5A2基因突变结果，并回顾性分析自1979年至今国内学者报道的肾性糖尿患者的资料，汇总我国已报道的SLC5A2基因突变型。结果患者实验室检查提示其糖代谢正常，分子诊断发现该患者的SLC5A2基因第8外显子发生了错义突变（c.917 G〉T，p.S306I）。复习国内文献报道的85例PRG患者，涉及17个家系及多个散发病例。其中男性52例，女性33例，发病年龄7-73岁（平均年龄34.03岁），大多数患者无任何症状，11例患者（占12.9%）有不同程度的＂口干、多饮、多尿、消瘦、乏力＂症状，3例以尿路感染起病。上述患者均符合肾性糖尿诊断标准，其空腹血糖波动于2.8-6.6 mmol/L，61例患者经口服葡萄糖耐量试验排除糖尿病，6例患者进行了为期4个月至15年的随访，均无明显并发症出现。结论PRG患者临床表现多为良性过程，基因分析有助于该病的病因诊断。

妊娠合并糖代谢异常孕妇胎盘内葡萄糖转运蛋白表达的变化

目的研究妊娠合并糖代谢异常孕妇胎盘内葡萄糖转运蛋白（glucose transporter，GLUTs）的表达变化，探讨其对母儿间葡萄糖转运功能的影响及其与新生儿体重的关系。方法于北京大学第一医院收集孕前糖尿病孕妇的胎盘组织标本7例、妊娠期糖尿病A110例、妊娠期糖尿病A214例、妊娠期糖耐量受损10例及正常孕妇胎盘组织标本15例，用免疫组织化学方法测定GLUT1和GLUT3的表达，并记录新生儿出生体重。结果免疫组化显示GLUT1主要表达于胎盘的细胞滋养细胞和合体滋养细胞，各组间GLUT1的表达强度差异具有统计学意义（P〈0．01）；GLUT3在部分胎盘绒毛间质的血管内皮细胞中表达，各组间的表达差异也具有统计学意义（P〈0．01）。GLUT1的表达强度与新生儿出生体重存在等级相关性（rs=0．532，P〈O．01），GLUT3表达强度则与新生儿出生体重无相关性（rs=0．178，P〉O．01）。结论妊娠合并糖代谢异常孕妇胎盘内GLUT1和GLUT3的表达增强，且GLUT1在胎儿对葡萄糖的摄取过程中可能发挥主要作用。

β-CM5对离体大鼠小肠葡萄糖吸收的影响

为了探讨β-酪啡肽-5(β-CM5)对大鼠小肠葡萄糖吸收的影响,利用翻转的离体小肠模型,通过测定60 min内β-CM5不同浓度组肠囊内葡萄糖含量及葡萄糖的转运率;测定离体肠道黏膜α-葡萄糖苷酶、Na+-K+-ATP酶活力,分析大鼠小肠钠依赖性葡萄糖共转运载体(SGLT-1)及葡萄糖转运载体2(GLUT-2)mRNA表达水平,揭示β-CM5对葡萄糖吸收影响及机制。结果:不同浓度β-CM5肠囊内葡萄糖的转运量及转运率均显著低于对照组;β-CM5组小肠黏膜中α-葡萄糖苷酶和Na+-K+-ATP酶活力显著低于对照组;β-CM5组小肠黏膜中SGLT-1、GLUT-2 mRNA表达量与对照组相比均显著性下调。结果表明:β-CM5可以通过抑制葡萄糖吸收的相关酶活性,下调葡萄糖转运载体mRNA的表达,从而抑制肠道葡萄糖的吸收,提示β-CM5可能具有降糖作用。

葡萄糖转运蛋白1和单羧酸转运蛋白1、单羧酸转运蛋白4在结肠癌组织中的表达和意义

目的观察葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)和单羧酸转运蛋白1(MCT1)、MCT4在结肠癌组织中的表达及其与临床特征之间的相关性。方法收集杭州市第一人民医院2008年1月至2016年1月经手术切除的结肠癌组织标本84例和相应的癌旁正常结肠组织标本40例,采集患者的临床资料,采用免疫组化检测患者GLUT1、MCT1、MCT4的表达,进行统计分析。结果结肠癌组织中GLUT1、MCT1、MCT4阳性表达率分别为54.8%(46/84)、47.6%(40/84)、58.3%(49/84),均显著高于正常结肠组织的12.5%(5/40)、7.5%(3/40)、15.0%(6/40),两者差异均有统计学意义(χ^2=19.987、19.253、20.615,均P<0.01);GLUT1、MCT1、MCT4的表达与性别、年龄、肿瘤大小无关,与病变部位、分化程度、淋巴结转移、远处转移和临床分期有相关性(GLUT1:χ^2=6.227、11.629、10.029、14.817、4.709;MCT1:χ^2=6.891、8.615、9.185、5.337、16.131;MCT4:χ^2=8.641、7.077、12.131、6.917、7.077;均P<0.05)。结论结肠癌组织高表达GLUT1、MCT1、MCT4,GLUT1、MCT1、MCT4可能通过能量代谢途径影响结肠癌的发生、发展。

心肌细胞葡萄糖转运蛋白4的转运调控及与心肌活力关系的研究进展

葡萄糖是心肌能量代谢的主要底物之一，在心肌缺血时是心肌的主要能量来源。葡萄糖通过细胞膜进入细胞内是心肌细胞葡萄糖代谢的第一步，也是心肌细胞利用葡萄糖的主要限速步骤。葡萄糖是依靠细胞膜上的葡萄糖转运蛋白（GLUTs）而进入细胞内的，GLUT4是心肌细胞主要的葡萄糖转运载体。GLUT4的质和量对心肌葡萄糖的跨膜转运起着决定性作用。因此，明确心肌葡萄糖转运及心肌细胞GLUT4的基因表达调控机制、转位调控机制、内在活性调控机制，对临床诊断心肌能量代谢性疾病具有重要意义。该文对近年来有关心肌葡萄糖转运及GLUT4调控方面的研究进行综述。

妊娠期高血糖胎盘葡萄糖转运代谢的研究进展

妊娠期高血糖作为常见的妊娠合并症，对妊娠结局及母子双方的近远期健康具有重要影响。胎盘作为母胎间物质转运的重要场所，其葡萄糖转运代谢能力的异常是妊娠期高血糖影响母儿近远期健康的关键机制，而胎盘葡萄糖转运蛋白的分布表达及其调控是影响胎盘葡萄糖转运代谢功能的主要影响因素。本文对不同类型妊娠期高血糖孕妇胎盘中常见葡萄糖转运蛋白的分布表达改变及其与子代发育的关联，以及影响葡萄糖转运蛋白表达的主要调控机制进行概述，以期为妊娠期高血糖影响母儿健康的机制探讨提供依据。

妊娠期糖尿病患者肌肉组织中胰岛素信号转导和GLUT-4表达的变化

目的研究妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)孕妇肌肉组织中胰岛素信号通路及葡萄糖转运蛋白表达的变化,探讨其在GDM发病过程中的作用。方法将40例孕妇分为糖耐量正常(NGT)组和GDM组,每组20例,分离少量腹直肌,分别置于含和不含胰岛素的培养液中温育30 min。用Real-time PCR法检测胰岛素受体底物1(insu-lin receptor substrate 1,IRS-1)、胰岛素受体底物2(IRS-2)、葡萄糖转运蛋白2(glucose transporter 2,GLUT-2)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT-4)mRNA的表达,Western blot检测蛋白激酶B(Akt)的磷酸化程度、GLUT-4蛋白水平的变化。结果①基础状态时,GDM组IRS-1、IRS-2和GLUT-2 mRNA表达较NGT组降低(P<0.05);GLUT-4 mRNA表达2组无统计学差异(P>0.05);经胰岛素刺激后,NGT组中GLUT-4 mRNA较基础状态升高(P<0.05),而GDM组则无明显变化(P>0.05)。②NGT组经胰岛素刺激后,Akt蛋白的磷酸化程度明显增高(P<0.05),GDM组无明显变化(P>0.05);基础状态时,GDM组与NGT组相比,GLUT-4蛋白表达明显降低(P<0.05);经胰岛素刺激后,GLUT-4蛋白的表达水平均增高,NGT组增加的幅度明显高于GDM组(P<0.05)。结论 GDM患者胰岛素信号通路中的关键效应分子存在转录或翻译水平的缺陷,对胰岛素的反应降低,导致胰岛素抵抗。