沉默星形细胞上调基因-1联合全反式维甲酸抑制胶质瘤血管拟态形成的机制分析

目的研究沉默星形细胞上调基因-1(AEG-1)联合全反式维甲酸(ATRA)对胶质瘤血管拟态(VM)形成的影响及其可能的机制。方法构建AEG-1 shRNA慢病毒稳染U87胶质瘤细胞并用含20μmol/L全反式维甲酸(ATRA)的培养基干预,分组:空白对照组(U87细胞)、ATRA组(U87细胞+20μmol/L ATRA),siCon组(U87-siCon细胞)、siCon+ATRA组(U87-siCon细胞+20μmol/L ATRA),siAEG-1组(U87-siAEG-1细胞)和siAEG-1+ATRA组(U87-siAEG-1细胞+20μmol/L ATRA)。体外管腔形成实验评估U87细胞体外血管拟态形成能力,实时PCR及Western-Blot检测U87细胞中血管拟态形成相关基因表达情况。建立裸鼠胶质瘤皮下移植瘤模型并以10mg/kg剂量给予腹腔注射ATRA干预,分为:对照组(U87细胞造模)、ATRA组(U87细胞造模+ATRA干预),siCon组(U87-siCon细胞造模)、siCon+ATRA组(U87-siCon细胞造模+ATRA干预),siAEG-1组(U87-siAEG-1细胞造模)与siAEG-1+ATRA组(U87-siAEG-1细胞造模+ATRA干预)。定期测量皮下移植瘤大小并绘制肿瘤生长曲线,CD34-PAS双染检测移植瘤中血管拟态。结果沉默AEG-1联合ATRA干预(即siAEG-1+ATRA组)显著抑制胶质瘤细胞及胶质瘤模型中血管拟态形成及皮下移植瘤生长,干预后胶质瘤细胞中基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9),钙黏蛋白(VE-cadherin)表达明显下调。上述结果与对照组比较,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论沉默AEG-1联合ATRA能显著抑制胶质瘤血管拟态形成及肿瘤生长,其机制可能与抑制MMP-2、MMP-9以及VE-cadherin表达有关。

敲低星形胶质细胞上调基因-1表达对二乙基亚硝胺诱导的大鼠原发性肝癌的调控作用

目的探讨敲低星形细胞上调基因-1(astrocyte elevated gene-1,AEG-1)表达对二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)诱导的原发性肝癌的调控。方法将60只大鼠随机分成Control组、DEN组、AEG-1 NC KO DEN组及AEG-1 KO DEN组,每组15只。除Control组外,其余组均以DEN灌胃构建大鼠原发性肝癌模型,Control组和DEN组大鼠每日灌胃等体积生理盐水。AEG-1 KO DEN组和AEG-1 NC KO DEN组分别经腹腔注射稳定转染AEG-1shRNA或shRNA-NC慢病毒表达载体的HCCLM6。比较各组肝脏细胞损伤、凋亡、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)和谷肽甘肽(glutathione peroxidase,GSH)、肝功能,血清IL-6、TNF-α含量,肝脏组织半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3,Cas-3)、半胱氨酸蛋白酶9(caspase-9,Cas-9)表达及P65蛋白表达。结果DEN组AEG-1的表达水平明显高于Control组(P<0.05),AEG-1 KO DEN组的大鼠死亡率及腹水发生率低于DEN组(P<0.05);AEG-1 KO DEN组血清AST、ALT、IL-6和TNF-α水平低于DEN组(P<0.05),SOD活性高于DEN组(P<0.05),GSH和MDA含量低于DEN组(P<0.05),cleaved cas9/cas9、cleaved cas3/cas3和p-P65/P65蛋白表达低于DEN组(P<0.05)。结论AEG-1敲除可降低DEN诱导的大鼠的氧化应激水平以及炎症因子水平,减轻对肝脏组织的损伤,改善肝脏功能。

小鼠抗星形胶质细胞上调基因1(AEG-1)单克隆抗体的制备及应用

目的制备并纯化具有高特异性的抗星形胶质细胞上调基因1(AEG-1)单克隆抗体(mAb),并进行异硫氰酸荧光素(FITC)标记,鉴定标记的mAb与肿瘤细胞的结合能力。方法小鼠腹水诱生法制备并纯化抗AEG-1 mAb,Western blot法和免疫组织化学染色检测mAb的纯度及免疫活性。流式细胞术检测FITC标记mAb的标记效率,流式细胞术及免疫细胞化学染色检测FITC标记mAb与肿瘤细胞的结合能力。结果纯化得到了具有较高纯度的抗AEG-1 mAb,免疫活性良好;流式细胞术检测结果显示,FITC标记的mAb标记的肿瘤细胞表面荧光强度明显增加,标记率可达到90%以上;FITC标记的mAb可特异性识别并结合AEG-1阳性表达的肿瘤细胞,还能与小鼠体内注射的肿瘤细胞结合,在BALB/c小鼠血液中可检测出荧光染色阳性的肿瘤细胞。结论成功制备出小鼠抗AEG-1 mAb并进行了FITC标记,标记的mAb在体内外均可与肿瘤细胞特异性结合。

星形胶质细胞上调基因-1(AEG-1)与肿瘤

星形胶质细胞上调基因-1(astrocyte elevated gene-1,AEG-1)是位于8q22的单跨膜蛋白,可表达于多种细胞的不同部位。目前认为它是一种癌基因,在多种肿瘤中表达上调,能通过多条信号转导通路影响肿瘤细胞周期,具有增强细胞的成瘤能力、促进瘤细胞增殖和生长、增强瘤细胞侵袭及转移能力等生物学功能。随着研究深入,AEG-1有望成为判断肿瘤预后和基因治疗的新靶点。

星形胶质细胞上调基因-1蛋白在鼻咽癌中的表达及临床意义

目的探讨星形胶质细胞上调基因-1(astrocyte elevated gene-1,AEG-1)蛋白在鼻咽癌中的表达及其临床意义。方法采用Western blotting技术检测AEG-1蛋白在4株鼻咽癌细胞株、47例鼻咽癌组织及21例鼻咽部黏膜中的表达。结果 AEG-1蛋白在鼻咽癌细胞和组织中的表达较鼻咽部黏膜均显著上调,其表达水平与患者血清EB病毒滴度的高低(P=0.046)、T分级(P=0.001)、临床分期(P=0.001)、颈部淋巴结转移(P=0.010)呈显著正相关。结论 AEG-1蛋白可能在鼻咽癌的发生发展中起重要作用。

星形细胞上调基因1（AEG -1）在肝细胞癌中的研究进展

星形细胞上调基因1（Astrosyte elevated gene 1， AEG-1）自2002年作为艾滋病病毒诱导的新型癌基因被发现以来，有关其在细胞中的生物学功能及人类肿瘤中的作用一直是研究热点。本文详细阐述了近年来发现AEG-1的重要生物学功能以及它的一些生化特性，包括一些氨基酸序列及核定位信号通路，并总结了AEG-1在肝细胞癌（ Hepatocellular carcinoma ，HCC）中的相关研究进展。认识到AEG-1发挥生物学效应的分子机制及作用的具体信号通路，能够帮助我们对AEG-1本身及其在HCC中的重要作用有更深入的了解。

PDTC对A549细胞增殖、细胞周期、凋亡及星形细胞上调基因-1表达的影响

目的:观察NF-κB特异性抑制剂PDTC对人肺腺癌A549细胞增殖、细胞周期、凋亡及星形细胞上调基因-1(AEG-1)表达的影响。方法:用不同浓度(25、50、100、200μmol/L)的PDTC分别处理A549细胞,对照组不给PDTC。应用MTT法检测处理24、48、72h后细胞增殖抑制率,流式细胞术检测处理24h后细胞周期的变化,Ho-echst33342荧光染色检测处理24h后细胞的凋亡情况,RT-PCR和Westernblot检测处理24h后细胞AEG-1mRNA和蛋白的表达。结果:经PDTC处理的A549细胞增殖明显受抑,呈时间和浓度依赖性(F时间=531.981,F浓度=388.475,P<0.05);与对照组相比,PDTC处理24h后A549细胞G0/G1期细胞比例上升(P<0.05),细胞形态出现明显凋亡改变;随着PDTC浓度的增加,癌细胞内AEG-1mRNA和蛋白的表达水平降低(F=275.162、59.473,P<0.05)。结论:PDTC可抑制A549细胞的增殖,诱导其凋亡,其机制可能与PDTC抑制NF-κB、AEG-1的表达有关。

胆囊癌组织星形胶质细胞上调基因1异常表达与临床病理及预后的关系

目的探讨胆囊癌组织星形胶质细胞上调基因1(AEG-1)表达与临床病理及预后的关系。方法选取2016年1月至2018年6月收治的128例胆囊癌患者,均于术后进行癌组织AEG-1检测。随访2年,记录生存时间。采用多因素COX回归分析胆囊癌患者预后影响因素,绘制Kaplan-Meier生存曲线。结果128例患者癌组织AEG-1阳性率71.87%。手术方式、肿瘤最大径、分化程度、TNM分期、胆总管浸润、淋巴结转移、AEG-1表达是生存影响因素(P<0.05)。AEG-1阳性和阴性患者生存情况差异有统计学意义(P=0.009)。结论胆囊癌组织AEG-1表达与肿瘤最大径、病理分型、分化程度、TNM分期、周围组织侵犯等有关,且AEG-1表达是预后影响因素。

大鼠颞叶癫痫点燃后海马星形细胞上调基因-1 mRNA和蛋白水平的表达变化

目的颞叶癫痫反复发作,对颞叶癫痫发病机制深入研究尤其重要。文中旨在探讨颞叶癫痫脑损伤后星形细胞上调基因-1(astrocyte elevated gene-1,AEG-1)mRNA和蛋白水平的表达变化。方法雄性SD大鼠60只,随机数字表法分为对照组、癫痫组,每组30只。癫痫组一侧海马注射海人酸制备癫痫大鼠模型,对照组注射相同体积等渗盐水。通过RT-PCR、Western blot以及免疫组化等技术检测AEG-1mRNA和蛋白分子水平变化。结果在海人酸致痫大鼠模型中,AEG-1 mRNA较对照组明显升高[(1.508±0.090)vs(1.000±0.150),P<0.05];AEG-1蛋白的表达亦明显增加[(1.048±0.080)vs(0.749±0.550),P<0.05];免疫组化结果表明,癫痫组大鼠海马CA1、CA3、DG区AEG-1表达均高于对照组。结论 AEG-1与颞叶癫痫有高度相关性,AEG-1mRNA和蛋白水平表达变化说明AEG-1可能参与了癫痫发作过程。

上调星形胶质细胞中PP2A对APP/PS1双转基因小鼠的神经保护作用

目的:探讨上调星形胶质细胞中蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)对APP/PS1双转基因小鼠的神经保护作用。方法:构建带胶质细胞原纤维酸性蛋白启动子的e GFP-wt PP2A慢病毒,特异性上调星形胶质细胞中的PP2A。将实验小鼠随机分为野生对照+慢病毒空载体组(Con组)、APP/PS1双转基因小鼠+慢病毒空载体组(APP/PS1组)和APP/PS1双转基因小鼠+慢病毒感染组(PP2A组),各组小鼠经侧脑室注射慢病毒4周后,采用脑片免疫荧光检测β-淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)的水平,通过Golgi染色观察树突棘密度和形态学变化,电镜检测突触后致密物(postsynaptic density,PSD)的厚度,Morris水迷宫定位航行实验检测感染慢病毒后对学习和记忆的影响。结果:上调星形胶质细胞中PP2A降低APP/PS1双转基因小鼠Aβ的水平,增加树突棘密度、有突触功能的蘑菇状树突棘比例和PSD厚度,缩短寻找平台逃避潜伏期。结论:上调星形胶质细胞中PP2A改善APP/PS1双转基因小鼠AD样Aβ聚集的病理改变,具有重塑突触结构与功能和改善学习记忆能力的作用。

星形胶质细胞上调基因-1表达与食管鳞状细胞癌预后的相关性研究

目的：探讨食管鳞状细胞癌组织中星形胶质细胞上调基因-1（AEG-1）的表达情况及其与临床分期、预后的相关性。方法：应用半定量RT-PCR、Western blotting及免疫组织化学技术检测AEG-1基因在食管鳞状细胞癌组织中的表达情况,并与肿瘤临床分期特征及预后进行相关性分析。结果：食管鳞状细胞癌组织中AEG-1 mRNA及蛋白表达量分别为癌旁正常组织的8.2-18.5倍及4.6-13.2倍。76例食管鳞状细胞癌石蜡包埋组织中AEG-1蛋白表达阳性占70例。AEG-1在男性患者中的表达强度强于女性患者,在中晚期病变中的表达强度强于早期病变,另AEG-1表达强度与患者生存时间呈负相关。结论：AEG-1不仅可以用于预测食管癌患者预后,也可能成为一个潜在的基因治疗靶点。

小分子干扰RNA下调星形细胞上调基因1的表达对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨小分子干扰RNA(siRNA)下调星形细胞上调基因1(AEG-1)表达对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响。方法卵巢癌细胞株SKOV3分为3组:空白对照组(不做任何处理)、阴性对照组(对照siRNA转染)和观察组(AEG-1 siRNA转染)。用反转录聚合酶链反应观察AEG-1 siRNA对AEG-1基因表达的影响;甲基噻唑基四唑法观察AEG-1 siRNA对卵巢癌SKOV3细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测AEG-1 siRNA对卵巢癌SKOV3细胞凋亡和细胞周期的影响。结果空白对照组和阴性对照组AEG-1 mRNA表达、SKOV3细胞增殖、细胞凋亡率及在DNA合成前期(G0/G1期)、合成期(S期)、合成后期(G2/M期)的细胞比例差异均无统计学意义(P>0.05)。观察组SKOV3细胞AEG-1 mRNA表达显著低于空白对照组和阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。观察组SKOV3细胞增殖在24、48、72 h较空白对照组和阴性对照组均显著减慢,差异有统计学意义(P<0.01)。观察组SKOV3细胞凋亡率显著高于空白对照组和阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.01);观察组SKOV3细胞在DNA合成前期(G0/G1期)细胞比例显著高于空白对照组和阴性对照组(P<0.01),而合成期(S期)、合成后期(G2/M期)的细胞比例均显著低于空白对照组和阴性对照组(P<0.01),差异均有统计学意义。结论 siRNA可通过下调卵巢癌SKOV3细胞AEG-1基因的表达,抑制其增殖,促进其凋亡。

星形细胞上调基因-1下游分子miR-885-5p裸鼠肝癌转移实验

目的研究星形细胞上调基因-1（metadherin,MTDH）调控的下游分子mi R-885-5p在调控肝癌转移中的作用。方法收集10名癌症患者的癌组织和癌旁样品,检测MTDH和mi R-885-5p表达量。分别构建mi R-885-5p过表达慢病毒质粒和随机序列的阴性对照质粒,带有荧光标签;慢病毒包装后侵染人类肝癌细胞MHCC-97H,使用流式细胞仪分选出稳定细胞系;分别以稳定表达mi R-885-5p的MHCC-97H细胞和稳定表达随机序列的MHCC-97H阴性对照细胞对裸鼠进行腹腔及肝注射,4周后使用活体荧光成像系统检测荧光素酶信号,观察肝癌细胞在裸鼠体内成瘤的动态变化过程。结果 MTDH在肝癌组织样品的表达量较癌旁样品提高2~5倍,mi R-885-5p在肝癌组织样品的表达量较癌旁样品降低40%~90%。注射表达mi R-885-5p的肝癌细胞的动物中,荧光面积和荧光强度较对照组均明显降低（50%）。结论在肝癌组织中MTDH高表达,并且可以负调控mi R-885-5p。动物实验证明,mi R-885-5p对肝癌转移起到抑制作用。

星形胶质细胞上调基因-1在乳腺癌中的表达及临床意义

目的研究乳腺癌中星形胶质细胞上调基因-1(AEG-1)的表达及其与临床病理指标之间的关系,探讨AEG-1在乳腺癌发生发展中的作用。方法应用免疫组化Envision法检测128例乳腺癌组织中AEG-1的表达,同时分析乳腺癌中AEG-1表达与临床病理指标之间的关系。结果乳腺癌中AEG-1的阳性表达率为90.6%。AEG-1在有淋巴结转移的乳腺癌中的阳性表达率明显高于无淋巴结转移者(P<0.05),随着临床分期的增高,AEG-1的阳性表达率也明显增高,差异有统计学意义(P<0.05)。乳腺癌中AEG-1的表达与ER、PR和HER-2表达均无关(P>0.05)。结论 AEG-1可能参与了乳腺癌的进展,是乳腺癌侵袭性的一个标记物。检测乳腺癌中AEG-1表达可有助于预测乳腺癌的生物学行为。

子宫内膜样腺癌中酪氨酸蛋白激酶受体A7和星形胶质细胞上调基因-1的表达及相关性

目的应用免疫组化方法检测子宫内膜样腺癌中酪氨酸蛋白激酶受体(Eph)A7和星形胶质细胞上调基因(AEG)-1的表达特征,探讨二者与临床病理特征的关系。方法观察组为57例确诊为子宫内膜样腺癌并行手术根治的患者,对照组1为子宫内膜复杂性增生伴不典型增生21例,对照组2为子宫内膜复杂性增生不伴不典型增生21例,对照组3为子宫脱垂后行子宫全切后15例,均留取术后子宫内膜的蜡块组织,Eph A7和AEG-1的表达均应用免疫组化SP法检测。结果 4组Eph A7和AEG-1表达的阳性率差异有统计学意义(P<0.05)。观察组Eph A7和AEG-1表达与肿瘤增殖指数、肿瘤最大径相关;AEG-1表达与肿瘤浸润深度密切相关。二者均与年龄、肿瘤分化程度及淋巴结转移无明显相关性。相关分析显示观察组Eph A7和AEG-1表达呈正相关。结论 Eph A7和AEG-1在子宫内膜样腺癌中的表达升高,二者具有正向协同作用,共同促进肿瘤的形成和进展。

星形细胞上调基因-1的研究进展

星形细胞上调基因-1(AEG-1)在多种恶性肿瘤中显著高表达,在肿瘤的发生、增殖、血管生成、抗凋亡、侵袭转移及抗药性等多方面发挥重要作用,还参与炎性反应和自然免疫过程。研究表明AEG-1与PI3K/Akt、NF-κB、Wnt/β-catenin等多种信号通路相关,同时参与RNA诱导沉默复合体介导的基因沉默。因此,AEG-1有望成为肿瘤靶向治疗的新靶点。

星形细胞上调基因-1在肿瘤中的研究进展

星形细胞上调基因-1(AEG-1)最早于2002年被发现并成功克隆。AEG-1是一种癌基因,在多种肿瘤中高表达,与肿瘤分化、淋巴结转移、TNM分期和不良预后有关。AEG-1基因能激活PI3K/AKT、NF-κB、MAPK、Wnt等重要信号通路,通过改变下游基因的表达调控细胞的生理和病理过程,包括肿瘤的增殖、侵袭、转移、血管的形成及耐药性等。研究发现,AEG-1对于恶性肿瘤的诊断及预后的判断具有重要的参考价值,其有望成为肿瘤预后评估的重要指标及基因治疗的新靶点。

星形细胞上调基因-1及基质金属蛋白酶9在肾癌中表达及临床意义

目的研究星形细胞上调基因(AEG)-1及基质金属蛋白酶(MMP)9在肾癌组织中的表达,探讨其相互关系及临床意义。方法采用Western印迹检测AEG-1及MMP9在15例肾癌及癌旁组织中的表达,然后采用免疫组化方法检测其在81例肾癌组织中的表达,进一步研究AEG-1及MMP9与肾癌病理、临床特征的关系。结果AEG-1及MMP9蛋白在肾癌中高表达,在癌旁组织中低表达。在肾癌组织中,AEG-1蛋白阳性表达的患者与阴性表达的患者相比预后较差(P=0.005);MMP9蛋白阳性表达的患者与阴性表达的患者相比预后较差(P=0.018)。AEG-1及MMP9蛋白表达与肾癌的临床分期,病理分级,淋巴结转移密切相关;AEG-1与MMP9呈正相关。结论AEG-1或MMP9高表达的患者预后不良;联合检测AEG-1和MMP9有助于肾癌的早期诊断及判断患者预后。

星形细胞上调基因-1和p53在结肠癌中的表达及临床意义

目的 通过检测结肠癌组织中星形细胞上调基因-1（AEG-1）和p53的表达,探讨其与临床病理特征的关系.方法 采用免疫组化法检测63例结肠癌和30例癌旁正常组织中AEG-1和p53的蛋白表达,并分析其与结肠癌临床病理特征之间的关系.结果 结肠癌组织中AEG-1和p53阳性表达率分别为68.3％（43/63）和61.9％（39/63）,正常结肠组织阳性表达率分别为26.7％（8/30）和0.00％（0/30）.AEG-1和p53在癌组织中的表达均高于正常结肠组织（P＜0.05）.AEG-1的表达与结肠癌组织分化程度、TNM分期呈正相关,与患者性别、年龄及肿瘤大小无相关性.结论 AEG-1在结肠癌中表达增强,其异常表达与结肠癌的发生、发展相关.

组织芯片检测星形胶质细胞上调基因1与原发性肝细胞癌病理因素的相关性

背景:星形胶质细胞上调基因1是肿瘤发生转移早期的重要标记分子之一,很有可能成为肝癌临床治疗的分子靶标。目的:探索原发性肝细胞癌患者星形胶质细胞上调基因1在其癌组织中的表达水平,并推测其在原发性肝细胞癌患者微创疗效中的地位。方法:采用组织芯片方法和免疫组织化学染色方法检测120例原发性肝细胞癌患者肿瘤组织中星形胶质细胞上调基因1蛋白表达水平,并与其临床病理资料进行相关性分析。结果与结论:原发性肝细胞癌患者星形胶质细胞上调基因1蛋白表达水平与其临床分期和组织分化程度密切相关,且其星形胶质细胞上调基因1蛋白高表达水平与Ki-67阳性率和肿瘤微血管密度有关,但该蛋白高表达与患者的性别及年龄无相关性。说明星形胶质细胞上调基因1蛋白表达水平与常规恶性检测指标相关,检测该蛋白表达水平对于判断原发性肝细胞癌具有重要意义。