新型鹅源星状病毒广西流行株GoAstV-GXHZ01-2022基因组分子特征分析

为研究新型鹅源星状病毒(GoAstV)广西流行株基因组的分子特征,本研究采集广西3只疑似GoAstV感染发病雏鹅的3份组织病料样品(每份样品包括肾脏、肝脏和脾脏),采用荧光定量RT-PCR(RT-qPCR)检测GoAstV,以GoAstV阳性样品的核酸为模板,经RT-PCR分段扩增、测序及拼接获得GoAstV广西株的全基因组序列,采用BioEdit软件分析上述获得的GoAstV全基因组序列与该病毒参考株各功能基因(ORF1a、ORF1b及ORF2)的相似性,采用Bepipred及NetNGlyc软件预测该病毒Cap蛋白的抗原表位与N-糖基化位点,通过Mega 7.0软件绘制各功能基因的进化树,通过RDP 5软件分析ORF基因序列的重组事件。结果显示,RT-qPCR检出3份GoAstV阳性样品,并经测序获得1条GoAstV广西流行株GoAstV-GXHZ01-2022全基因组序列,该基因组全长为7 149 bp,其中5'非编码区(5'UTR)长143 bp,ORF全长6 929 bp,3'UTR长77 bp;GoAstV-GXHZ01-2022株与经典GoAstV代表株的ORF1a、ORF1b及ORF2基因序列的相似性分别为53.0%~53.4%、63.2%~63.5%及48.2%~48.4%,与新型GoAstV参考株相应基因序列的相似性分别为97.0%~99.6%、98.1%~99.8%及97.5%~99.8%;Cap蛋白抗原表位预测结果为aa6~aa16、aa20~aa66及aa80~aa86等共29个区域存在抗原表位,N-糖基化位点预测结果为^(81)NSTD^(84)、^(401)NTTG^(404)、^(464)NITF^(467)及^(531)NTST^(534);功能基因的进化树结果显示,GoAstV-GXHZ01-2022株与新型GoAstV参考株均处于同一进化分支,与禽星状病毒3型(AAstV-3)流行株遗传距离较近,与AAstV-1次之,与AAstV-2最远;基因重组分析结果显示,GoAstV-GXHZ01-2022株的ORF1a和ORF2检测到重组信号,主要亲本株为新型GoAstV安徽株AstV/AH01/Goose/0512/18,二者相似性为98.6%,次要亲本株为新型GoAstV河南株AstV/HB02/Goose/0310/19,二者相似性为99.1%。表明GoAstV-GXHZ01-2022株与新型GoAstV参考株相似性最高,进化趋势也一致,并检测到重组现象。本研究为丰富GoAstV基因库中广西流行株全基因组序列信息提供基础数据。

猪星状病毒(PAstV)在中国流行的研究进展

猪星状病毒(Porcine astrovirus,PAstV)是一种无包膜的、单股正链RNA病毒,存在5种基因型,是一种常见的猪肠道传染病病毒。PAstV广泛流行于我国猪群中,常与其他猪肠道病原混合感染而引起腹泻,给我国养猪业带来了严重的经济损失。本文综述了PAstV在我国2006年~2021年间猪群中的流行情况,系统分析了PAstV在不同年份的阳性率、各省份地区分布情况、与不同猪肠道病原的混合感染情况以及不同基因型的流行特点,为掌握我国PAstV流行情况以及病毒防控提供重要参考。

1株新型鹅星状病毒的全基因序列分析

为研究新型鹅星状病毒(Novel goose astroviruses,N-GAstV)的遗传进化特征,获得了鹅星状病毒安徽分离株AstV/AHHX的全长基因,为7251 nt。测序分析显示:AstV/AHHX具有典型的新型鹅星状病毒基因组特征。AstV/AHHX与分离株GDZJ37以及山东分离株G538和G576的遗传距离较近;同时与毒株GDZJ37、G538和G576的ORF2氨基酸序列同源性达100%,ORF1a和ORF1b的同源性也有99.6%以上,推测它们由同一毒株演化而来。ORF2氨基酸序列位点分析显示有12高变异位点,分别是第36(Y/S/H)、60(V/I)、224(T/A)、228(A/S/T)、229(P/Q)、289(T/A)、376(T/A)、456(D/E)、540(Q/L)、608(S/T)、610(E/D/G)、614(N/A/T)位氨基酸。其中第224、228、229、608、614位的氨基酸突变可能导致病毒蛋白质的构象及功能发生变化,进而改变病毒的致病能力。

一株基因Ⅱ型鹅星状病毒的分离鉴定及培养特性

【目的】明确鹅星状病毒(Goose astrovirus,GAstV)的致病性和体外培养特性。【方法】对广东某鹅场表现为内脏和关节痛风的发病鹅组织样品进行病原学检测、病毒分离鉴定、病毒基因序列测定与分析、病毒培养特性及致病性研究。【结果】从中分离到1株鹅星状病毒,命名为GD2208株;ORF2基因核苷酸序列比对分析显示,该毒株与基因Ⅱ型鹅星状病毒(GAstV-Ⅱ)参考株同源性最高,为97.4%~99.1%;进化树分析显示该毒株与GAstV-Ⅱ参考株处于同一进化分支。动物回归试验显示,以该毒株感染3日龄雏鹅后致死率为20%,感染鹅临床症状、剖检病变及病理组织学变化与自然发病鹅相似。禽胚及细胞适应性研究结果显示,该毒株能在鹅胚中稳定增殖,但盲传4代后仍无法适应SPF鸡胚和番鸭胚;病毒在GEK和LMH细胞中均能稳定增殖且可见明显细胞病变,在DF-1上可稳定繁殖,但盲传至8代后仍未见细胞病变。【结论】本研究自表现痛风症状雏鹅中分离到1株GAstV-Ⅱ毒株,该毒株感染3日龄雏鹅可发生典型痛风症状,对鹅胚、GEK、LMH和DF-1细胞均有一定适应性,以上结果为进一步开展GAstV的致病机制、疫苗和药物研发奠定了基础。

鹅星状病毒研究进展

鹅星状病毒(goose astrovirus,GAstV)是近年来新发的一种传染性疾病的病原,引起我国多个省份主要养鹅地区暴发一种高致病率和高致死率的雏鹅痛风。发病的雏鹅以内脏和关节出现尿酸盐沉积为主要病变,该病可通过粪口和种蛋广泛的传播,给养鹅业造成巨大经济损失,目前尚无有效的防治手段。本文对GAstV的流行病学、致病性、诊断方法等研究进展进行综述,以期对雏鹅痛风疫苗研究及综合防控等提供参考。

鹅星状病毒RdRp蛋白对细胞因子转录水平的影响

为了解鹅星状病毒(GAstV)RdRp蛋白对细胞因子转录水平的影响,试验将构建的pCMV-RdRp真核质粒转染293细胞,并于转染后12、24、36 h收集细胞,提取核酸检测细胞内CCL2、CCL5、IL-1β、IFN-α、TNF-α、IFITM1和IFITM2的转录水平。结果发现,GAstV RdRp蛋白于12、24、36 h极显著抑制CCL2转录,12 h极显著促进CCL5表达,24、36 h极显著抑制CCL5表达(P<0.01);GAstV RdRp蛋白于24、36 h极显著促进IL-1β转录(P<0.01);GAstV RdRp蛋白于12 h极显著促进IFN-α的转录,于24、36 h极显著抑制IFN-α转录(P<0.01);GAstV RdRp蛋白于12、24、36 h显著或极显著抑制TNF-α转录(P<0.01);GAstV RdRp蛋白于24 h极显著抑制IFITM1转录(P<0.01),于36 h显著抑制IFITM1转录(P<0.05),于12、36 h极显著促进IFITM2转录(P<0.01),于24 h极显著抑制IFITM2的转录(P<0.01)。表明GAstV RdRp蛋白过表达能够诱导IL-1β的转录,抑制CCL2、TNF-α和IFITM1的转录;GAstV RdRp蛋白早期促进CCL5和IFN-α的转录,后期抑制CCL5和IFN-α的转录;GAstV RdRp蛋白早期和晚期促进IFITM2转录,中期抑制IFITM2转录。

鹅星状病毒capsid蛋白对细胞因子的影响

为了解鹅星状病毒(GAstV)capsid蛋白对细胞因子的影响,试验将构建的pCMV-capsid真核质粒转染293细胞,并于转染后12、24、36h收集细胞,提取核酸检测细胞内CCL2、CCL5、IL-1β、TNF-α、IFITM1和IFITM2的转录水平。结果显示,capsid蛋白于12、36h显著抑制CCL2转录,12h显著促进CCL5表达,24h显著抑制CCL5表达;capsid蛋白于24、36h显著促进IL-1β的转录;capsid蛋白于24、36h显著抑制IFN-α的转录;capsid蛋白于36h显著促进TNF-α的转录;capsid蛋白于24h显著抑制IFITM1的转录,于36h显著促进IFITM1和IFITM2的转录。结果表明,GAstVcapsid蛋白过表达能够诱导IL-1β、TNF-α和IFITM的转录,抑制CCL2和IFN-α的转录;对于CCL5,capsid蛋白早期促进CCL5的转录,后期抑制CCL5的转录;对于IFITM1,capsid蛋白早期抑制IFITM1转录,后期促进IFITM1转录。

Ⅱ型鹅星状病毒VP27蛋白生物信息学分析

为探究Ⅱ型鹅星状病毒(GAstⅤ-Ⅱ)VP27蛋白的结构和功能,运用生物信息学软件,对具有良好免疫原性的GAstⅤ-ⅡZYL02株进行分析。通过Expasy-ProtParam、PSORTⅡPrediction、ProtScale、SignalP 4.1、TMHMM 2.0和SOPMA等在线软件预测分析VP27蛋白的生物学特性,运用BepiPred-2.0、ABCpred、IEDB、ToxinPred2和VaxiJenv2.0等在线软件预测分析VP27蛋白的B细胞抗原表位,从中筛选出优势抗原表位;使用Phyre2在线软件对VP27蛋白进行建模,运用PyMOL软件准确定位预测的优势表位在模型中的分布。结果显示:VP27蛋白是不稳定的亲水蛋白,其亚细胞定位位于细胞质,无跨膜结构域和信号肽;二级、三级结构中无规卷曲平均占比为41.91%,延伸链平均占比为29.05%,α螺旋平均占比为22.41%,β转角平均占比为6.64%;共预测出26条B细胞抗原表位,筛选出4条B细胞优势抗原表位,分别位于26~41aa(FGIPQADSRSRYNANI)、48~57 aa(RGRTSTSFTL)、111~126 aa(TSTGGQITELRNRLNI)、174~189 aa(PVLINWSVSDSQEQYN);三级结构定位发现,4条优势B细胞表位均位于该蛋白表面。结果表明,GAstⅤ-ⅡVP27蛋白有多处可诱导体液免疫的潜在位点。本研究运用生物信息学分析方法预测了GAstⅤ-ⅡVP27蛋白的理化性质和结构,对进一步深入研究VP27蛋白功能,研发相应疫苗具有重要指导意义。

新型鹅星状病毒衣壳蛋白原核表达及多克隆抗体制备

为了研制针对新型鹅星状病毒(GAstV)的血清学检测方法和高效抗体,克隆新型GAstV HNZZ-4毒株的ORF2基因序列,构建pET-32a-Cap重组质粒,进行衣壳蛋白(Cap)原核表达;用重组Cap蛋白免疫兔只制备多克隆抗体,并采用Western blot和免疫过氧化物酶单层试验鉴定制备的多克隆抗体的反应原性。结果表明,重组质粒pET-32a-Cap经限制性内切酶NdeⅠ和XhoⅠ进行酶切后,得到大小约5000 bp和750 bp的2个与预期一致的条带;阳性重组质粒测序结果显示,成功构建了重组表达载体pET-32a-Cap;pET-32a-Cap原核表达获得了分子质量约为27.5 ku的GAstV重组Cap蛋白;制备的兔抗GAstV Cap多克隆抗体能够与重组Cap蛋白发生特异性反应,且能特异性结合感染LMH细胞的GAstV。综上,制备的兔源抗新型GAstV Cap多克隆抗体保留了抗原性,特异性较好。

禽星状病毒检测技术研究进展

禽星状病毒(avian astroviruses,AAstV)是一种严重危害禽类健康的病原,可引起火鸡肠炎、鸡肾炎、鸭肝炎、雏鹅内脏痛风等病症,导致禽类生长缓慢、孵化率降低、死亡率增加。由于目前尚无有效疫苗及药物对AAstV感染进行防治,因此病原检测在AAstV感染的监测和鉴别诊断中起着重要作用。本文主要综述了电镜法以及病毒分离鉴定、免疫荧光、ELISA及PCR等AAstV检测技术的优缺点,以期为相关人员根据不同场合及需求选择合适的检测方法提供参考。

小鹅瘟病毒、鹅星状病毒Ⅰ型与鸭疫里默氏杆菌混合感染的诊断及病原分析

【目的】2023年4月,河南新乡某地鹅场雏鹅群急性发病,死亡率高达25%,为确定引起该鹅场雏鹅发病的病因,本研究对送检的病死雏鹅进行剖检和实验室诊断。【方法】无菌采集病死雏鹅肝脏、脾脏、肾脏和小肠等组织样品及心血和肝脏外层纤维素性渗出物,通过对心血及肝脏外层纤维素性渗出物样品进行细菌分离培养、革兰染色镜检观察、16S rRNA基因及药物敏感性试验鉴定病鹅感染细菌及感染菌株的药物敏感性情况;通过PCR/RT-PCR方法对其常见雏鹅病毒性传染病病原核酸进行检验,并对阳性病原的主要结构蛋白基因进行测序分析,确定病鹅感染的病毒性病原及其分子流行病学情况。【结果】细菌学试验结果显示,分离菌株在血平板上呈半透明圆形突起、边缘整齐、表面光滑菌落,形态学观察显示,该菌为单个和成对的革兰阴性短杆菌,符合鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)的特性。16S rRNA基因扩增测序与BLAST分析进一步证实该菌为RA。药敏试验结果显示,该菌株对头孢曲松和头孢噻肟敏感,对阿莫西林、四环素和多黏菌素B耐药。常见雏鹅病毒性传染病病原核酸PCR/RT-PCR检测发现,该鹅场样品小鹅瘟病毒(Goose parvovirus,GPV)和鹅星状病毒Ⅰ型(genotypeⅠGoose astrovirus,GAstV-1)核酸呈阳性,GAstV-2、禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)和鹅呼肠孤病毒(Goose reovirus,GRV)核酸阴性,将致病毒株分别命名为GPV/HN-2023和GAstV-1/HN-2023。进一步对GPV/HN-2023和GAstV-1/HN-2023的主要结构蛋白基因分析发现,GPV/HN-2023与DY-16株的亲缘关系较近,属于DY-16-like毒株,且VP3蛋白存在2个特有的氨基酸位点突变D248E和V314L;GAstV-1/HN-2023与GAstV-1毒株亲缘关系较近,属于GAstV-1分支,ORF2蛋白存在3个特有的氨基酸位点突变G47R、S207G和A628T。【结论】本研究通过综合诊断方法明确了GPV、GAstV-1与RA混合感染是引起该鹅场雏鹅发病的病因,分析了致病菌RA的耐药性和病毒性致病原GPV和GAstV-1的遗传演化及变异特点,为河南地区雏鹅疫病的科学防控提供理论参考。

失眠认知行为疗法联合星状神经节阻滞对新型冠状病毒感染后失眠的影响

目的观察失眠认知行为疗法(CBT-I)联合星状神经节阻滞(SGB)对新型冠状病毒感染后失眠的治疗效果。方法选择麻醉睡眠门诊中新型冠状病毒感染后失眠患者84例,男26例,女58例,年龄18~64岁,BMI 20~32 kg/m^(2)。采用随机数字表法将患者分为两组:CBT-I联合SGB组(S组)和CBT-I组(C组),每组42例。两组患者均执行6周相同的CBT-I方案。S组在第1周每日左右侧交替行SGB,注入1%利多卡因3 ml,维生素B 11 ml(50 mg),维生素B_(6)1 ml(50 mg),共5 ml。第2至6周每周行1次SGB,共计12次。C组不行SGB。记录治疗前、治疗后6周、3个月和6个月的匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)评分。记录治疗前、治疗后1周、6周的失眠严重程度指数(ISI)、阿森斯(AIS)失眠量表评分、血清皮质醇(Cor)和5-羟色胺(5-HT)浓度。记录患者对治疗方案的依从性。结果与治疗前比较,治疗后6周、3个月和6个月两组PSQI评分明显降低(P<0.05),S组治疗后1和6周的ISI评分、AIS评分和血清Cor浓度均明显降低(P<0.05),血清5-HT浓度明显升高(P<0.05),C组治疗后6周ISI评分、AIS评分和血清Cor浓度明显降低(P<0.05),血清5-HT浓度明显升高(P<0.05)。与C组比较,S组治疗后6周PSQI评分明显降低(P<0.05),治疗后1周、6周ISI评分、AIS评分和血清Cor浓度明显降低(P<0.05),血清5-HT浓度明显升高(P<0.05),S组对治疗方案的依从性明显升高(P<0.05)。结论失眠认知行为疗法联合星状神经节阻滞可改善新型冠状病毒感染后失眠患者的短期睡眠质量,并能提高患者对治疗方案的依从性。

2型鹅星状病毒VP27蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

为进一步研究2型鹅星状病毒(GAstV-2)及其纤突结构蛋白VP27,通过基因密码子优化合成构建pCZN1-VP27原核表达质粒;利用大肠杆菌系统通过IPTG诱导表达VP27蛋白后进行纯化,以纯化的VP27蛋白免疫新西兰白兔,收获抗血清并纯化得到VP27多克隆抗体;分别通过间接ELISA和SDS-PAGE分析抗体的效价和纯度;将GAstV-1、GAstV-2病毒液接种LMH细胞,通过免疫印迹和免疫荧光试验对VP27多克隆抗体进行验证;将GAstV-2阳性或阴性的临床病料组织研磨液接种LMH细胞,利用VP27多克隆抗体进行免疫荧光检测以评价其临床应用效果。结果显示:纯化后的VP27多克隆抗体效价高达1∶3280500,纯度高于85%。免疫印迹试验结果显示,GAstV-2感染组在35ku处出现特异性条带,GAstV-1感染组则未出现该条带;免疫荧光结果显示仅GAstV-2感染组可观察到特异性荧光;临床病料组织的免疫荧光试验结果显示,GAstV-2阳性的病料组织均可出现特异性荧光,GAstV-2阴性的病料组织未出现荧光。研究获得了可特异性识别GAstV-2的VP27多克隆抗体,为深入研究VP27蛋白在GAstV-2的感染和致病机制中的作用提供生物材料,也为建立GAstV-2抗原免疫检测技术奠定基础。

基因1型鹅星状病毒VP27蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备与鉴定

【目的】制备可特异性识别基因1型鹅星状病毒(Goose astrovirus genotype 1,GAstV-1)且与GAstV-2不发生交叉反应的多克隆抗体,以期为后续GAstV-1免疫检测技术的建立提供材料。【方法】通过比对GAstV-1与GAstV-2衣壳蛋白的氨基酸序列以寻找其差异较大的区域作为靶基因。对GAstV-1 GDYJ-21-01株VP27基因密码子进行偏嗜性优化合成,构建原核表达质粒pCZN1-GAstV-1 VP27,转化大肠杆菌Top10感受态细胞以诱导表达VP27蛋白;将纯化后的VP27蛋白免疫新西兰白兔后收获抗血清以制备GAstV-1 VP27多克隆抗体,通过间接ELISA和SDS-PAGE分析该纯化抗体的效价和纯度,并利用间接免疫荧光试验(IFA)检测多克隆抗体的特异性。【结果】试验成功构建重组质粒pCZN1-GAstV-1 VP27;SDS-PAGE显示其表达的重组蛋白分子质量约为35 ku,主要以包涵体形式存在。间接ELISA试验结果显示,纯化后的GAstV-1 VP27多克隆抗体效价高达1∶9 841 500,纯度高于85%。IFA结果显示,GAstV-1 VP27多克隆抗体可特异性识别GAstV-1,且与GAstV-2无交叉反应。临床病料组织检测结果显示,GAstV-1核酸阳性的病料组织均可出现特异性荧光,而GAstV-2核酸阳性且GAstV-1核酸阴性的病料组织未出现荧光。【结论】本研究获得了高效价且可特异性识别GAstV-1(与GAstV-2无交叉反应)的VP27多克隆抗体,为建立鉴别诊断GAstV-1的抗原免疫检测技术奠定了基础。

广东部分地区鹅星状病毒的分离鉴定、全基因组测序及遗传进化分析

【目的】了解鹅星状病毒(Goose astrovirus, GAstV)在广东部分地区的流行及遗传变异情况,阐明其遗传进化与全基因组的特征,为GAstV的防控提供理论基础。【方法】使用GAstV特异性引物对2021―2022年广东地区养鹅场内出现疑似痛风的36份鹅病料进行PCR检测,选取4份具有代表性的GAstV强阳性样品,利用鹅细小病毒、坦布苏病毒、禽流感病毒、新城疫病毒的特异性引物进行检测,以排除病料中存在其他常见的外源性病毒;在此基础上利用鹅胚及鸡肝癌细胞系(leghorn male hepatoma, LMH)对4份GAstV样品进行病毒的分离和纯化,使用透射电镜对病毒粒子的形态进行观察;设计7对特异性引物对4株GAstV进行全基因组扩增和测序,运用DNAStar软件对序列进行整理与拼接以获取GAstV的全基因组序列,利用MegAlign软件进行核苷酸相似性比对,并对关键氨基酸位点的变异情况进行分析,应用Mega-X软件对全基因及单个ORF基因(ORF1a、ORF1b、ORF2)进行系统进化树构建。【结果】经PCR鉴定发现被检样品中共有30份是GAstV阳性,选取的4份代表性GAstV阳性样品均不存在其他外源性病毒感染,利用鹅胚及LMH细胞成功分离出了该4株GAstV病毒,并获得了4株全长均为7 131 bp的GAstV基因组序列,包括18 bp的5′-UTR和184 bp的3′-UTR、3个阅读开放框(ORF1a、ORF1b和ORF2基因),其中ORF1a、ORF1b和ORF2基因分别长3 255、1 551和2 115 bp,与报道的GAstV全基因组特征基本一致。相似性分析显示,4株GAstV之间的核苷酸相似性在99.4%~99.8%之间,与GenBank收录的其他19株GAstV的核苷酸相似在57.6%~99.6%之间。全基因组及3个ORF基因的遗传进化分析显示,获得的4株GAstV均属于GAstV-Ⅱ型。氨基酸序列分析显示,4株GAstV的氨基酸存在22处位置上的突变,其中ORF1a基因有8处突变,ORF2基因有14处突变。【结论】分离的4株GAstV均为GAstV-Ⅱ型毒株,与中国其他地区流行的基因型基本一致,该4株病毒的氨基酸突变主要发生在ORF1a和ORF2区域,为后续疫苗研发、流行病学调查及致病机理等方面提供参考依据。

牛星状病毒病研究进展

牛星状病毒(Bovine Astrovirus,BoAstV)是一种无囊膜的单股正链RNA病毒。1978年,BoAstV首次在英国的犊牛腹泻粪便样本中被发现,此后在许多其他国家都有报道。它具有广泛的组织嗜性,在肠道、呼吸道和神经系统均可检测到病毒。由于BoAstV在无症状牛和临床感染牛中普遍存在,且通常与其他病毒存在共感染模式,因此BoAstV的致病性尚不清楚。目前越来越多的流行病学研究表明,BoAstV与犊牛腹泻、脑炎的症状相关,国内对BoAstV的关注日益增加。本文对BoAstV的病原学、流行病学、致病性、共感染、诊断方法和综合防控措施进行综述,为BoAstV的研究及综合防控提供参考。

三种消毒剂对鹅星状病毒杀灭效果的评价

为了解不同成分的消毒剂对鹅星状病毒的杀灭效果,该试验选择复方戊二醛、二氯异氰脲酸钠粉、聚维酮碘溶液进行杀灭效果评估,以指导临床实践中的消毒灭源工作。经对三种消毒剂在10℃、25℃、37℃下不同稀释比例、不同作用时间对鹅星状病毒的杀灭效果进行实验室评价,结果显示:在室温环境下(25℃),作用时间为1 min、5 min和10 min,复方戊二醛1∶80倍稀释可完全杀灭鹅星状病毒(104.0 EID50),而复方戊二醛1∶300倍稀释及其他两种消毒剂在推荐使用浓度下均未能有效杀灭鹅星状病毒。对于尿囊液里高含量(104.0 EID50)的鹅星状病毒,1∶80倍稀释的复方戊二醛溶液在10℃时需要作用10 min才能有效杀灭星状病毒,但尿囊液里低含量(103.0 EID50)的鹅星状病毒在此浓度下作用1 min就能被完全杀灭。当温度达到25℃时,1∶80倍稀释的复方戊二醛溶液1 min即可杀灭鹅星状病毒;1:160倍稀释的复方戊二醛溶液则需要10 min才能完全杀灭鹅星状病毒。继续升高温度至37℃,1∶80和1∶160倍稀释的复方戊二醛溶液与鹅星状病毒作用1 min即可起到有效杀灭效果。综上所述,采用1∶80倍稀释的复方戊二醛杀灭鹅星状病毒(104.0 EID50),在10℃、25℃和37℃作用的最短时间分别是10 min、1 min和1 min。该研究明确了三种不同消毒剂首次用于消毒,在不同温度和作用时间下对鹅星状病毒的杀灭效果,为鹅星状病毒的生物安全防控提供参考。

致雏鹅痛风新型鹅星状病毒研究进展

鹅星状病毒(Gooseastrovirus,GAstV)是我国近年来新发现的一种星状病毒属成员,主要危害3周龄以下雏鹅。雏鹅感染后以内脏器官表面和关节腔中显著的尿酸盐沉积为特征;其感染率高达80%,死亡率可达50%;未死亡雏鹅则出现生长抑制和免疫水平降低等现象,更易受到其他病原的侵害。GAstV既够能通过粪口途径水平传播,也可垂直传播,同时还具备跨宿主传播的能力。目前该病毒致病机制的研究进展较为缓慢且尚无针对该病的商品化生物制品,使得在制定该病的科学防控措施时仍缺乏充分的理论依据和健全的药物配套,导致该疾病的防控形势依然严峻,给我国养鹅业造成了巨大的经济损失。该文围绕GAstV的病原学、流行情况、致病性、免疫应答及其致病机制等方面进行了简要综述,以期为GAstV的深入研究和防控措施的初步制定提供参考。

鹅星状病毒研究进展

鹅星状病毒是引起雏鹅痛风的主要原因,该病毒可以导致4~16日龄雏鹅发病和死亡,发病率和死亡率均达到50%以上。本文主要从鹅星状病毒的分子生物学特征、发病机理、流行病学、病毒分离和鉴定、治疗、预防和控制等方面进行了综述,希望对该病毒今后的研究、防控提供参考依据。

鹅星状病毒基因Ⅰ型和Ⅱ型双重荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用

鹅星状病毒(goose astroviruses,GAstV)作为一种雏鹅新发病原,对养鹅业造成巨大经济损失,在尚无有效治疗手段情况下,加强疫病及时检测和防控十分重要。为建立快速、特异且灵敏的鉴别GAstVⅠ型和GAstVⅡ型的病毒检测方法,本研究根据GAstVⅠ和GAstVⅡ的保守区域RdRp基因序列,设计合成2对特异性引物和2种不同荧光基团标记的TaqMan探针,建立了一种双重荧光定量PCR检测方法,以达到在同一反应体系中同时定量检测GAstVⅠ和GAstVⅡ的目的。结果显示,GAstVⅠ和GAstVⅡ的最小检出量分别为43.3、6.49 copies·μL^(-1);重复试验的变异系数不超过0.5%;该方法对DPV、GPV、GTMUV、GRV、AIV(H9N2)等病毒核酸无交叉反应。综上表明,本研究建立的可鉴别GAstVⅠ和GAstVⅡ的双重荧光定量PCR方法灵敏度高、特异性强、重复性好。可用于临床GAstVⅠ和GAstVⅡ的快速鉴别诊断,也可用于两种基因型GAstV的定量分析。