显微荧光光度术在烃源岩有机岩石学研究中的应用

在简要介绍显微荧光光度术的基础上，着重阐述其在烃源岩显微组分特征、有机质热演化、有机质类型、烃类生成与运移、以及富氢显微组分生烃机理等方面的研究进展，充分展现了其在烃源岩研究与评价中具有良好的应用价值。

全内反射荧光显微术

全内反射荧光显微技术是当今世界上最具前途的新型生物光学显微技术之一 ,可以用来实现对单个荧光分子的直接探测。它利用全内反射产生的隐失波照明样品 ,使照明区域限定在样品表面的一薄层范围内 ,因此具有其它光学成像技术无法比拟的高的信噪比和对比度。近年来 ,已被生物物理学家们广泛应用于单分子的荧光成像中。本文系统的介绍了全内反射荧光显微技术的原理、国内外的发展和现状及其在生物学上的应用 ,并对其未来做了展望。

荧光寿命成象显微技术及其应用

本文综述了荧光寿命成象显微技术的概念、原理及实现方法，介绍了荧光寿命成象显微技术在生物物理、生物化学及临床医学诊断等领域的最新研究成果和发展现状，并就其未来的发展及应用研究进行了讨论．

荧光显微术在鉴别拟南芥花粉壁发育相关基因功能中的应用

花粉在发育过程中,其壁中的不同成分具有自发荧光或诱发荧光的特性,荧光显微术利用此特性来鉴别花粉壁中的化学成分.拟南芥野生型花序的树脂半薄连续切片用苯胺蓝水溶液染色后,在紫外光激发下,胼胝质发出黄绿色荧光,孢粉素发出黄色或黄棕色荧光,纤维素发出蓝色荧光.利用荧光的方法快速简便,分辨率高,适用于大规模筛选花粉壁发育相关基因时对不同基因的功能进行快速鉴别和分类.用该方法鉴别出了几个与胼胝质合成、胼胝质降解、孢粉素沉积模式以及花粉内壁纤维素合成相关的遗传位点.

荧光显微术在TCK、TCT鉴别中的应用

TCK和 TCT在自发荧光特性上存有明显差异 :TCK的桔黄色网状壁层荧光率在 90 %以上 ,而TCT的桔黄色网状壁层荧光率通常都低于 1 0 %。在进行 TCK鉴定检测时 ,需设立相应的对照组和待测样品一起进行荧光观察 ,并严格选择封载剂 ,以保证准确的鉴定结果。

荧光共振能量转移显微术及其新进展

本文叙述荧光共振能量转移显微术及荧光寿命成像显微术的原理、方法及特点。同时介绍利用荧光共振能量转移显微术研究信号分子Rac蛋白在3T3成纤维细胞内的定位及活化过程,以及利用荧光共振能量转移—荧光寿命成像显微术研究转录因子CAATT/增强子结合蛋白α在小鼠垂体细胞内的二聚化现象。

全内反射荧光显微术原理及其应用

全内反射荧光显微术,利用全内反射时产生的隐失波照明样本,仅激发样本表面薄层范围内的荧光基团,与传统的荧光显微镜相比,使显微成像在Z轴上的空间分辨率得到了显著改善,大大提高了图像的信噪比和对比度。近年来,该技术已被生物学家们广泛地应用于单分子荧光成像中。本文介绍了全内反射荧光显微术的原理及其在生物学研究中的应用,并对其未来发展前景作了展望。

“荧光显微术原理及应用”的教学与思考

"荧光显微术原理及应用"是基于北京农学院现有研究生课程的基础上面拟向农业生产类、生物专业、动物专业以及园林专业的硕士研究生设置的选修课,其目的在于为研究生进行正式学术研究打下一定的实验技术基础。主要讲述体式荧光显微镜、荧光显微镜和激光扫描共聚焦显微镜的原理及应用。根据学校新修改的研究生课程设置的精神,进行精讲多练。总27学时,其中7学时理论,20学时实验。通过本课程的开设,使得研究生能够掌握体式荧光显微镜、荧光显微镜以及激光扫描共聚焦显微镜的原理和使用,为科研工作的顺利进行打下坚实的基础。

几种雄性不育玉米小孢子发育的显微荧光观察

采用高灵敏度的显微荧光术研究同一背景材料的细胞质不育和细胞核不育小孢子发育过程，目的在于比较同核异质及同质近等基因系的小孢子发育过程，从中找出规律性的现象。结果表明，几种不育类型小孢子均表现核物质的降解，只是降解的时期不同。由此认为，雄性不育的细胞学实质就是细胞的自我降解。

结合虚拟单像素成像解卷积的双边照明光片荧光显微技术

光片荧光显微术(light-sheet fluorescence microscopy,LSFM)采用薄片光束从侧面激发样品,在垂直于光片方向上进行成像,具有成像速度快、光学层析能力强以及光漂白和光毒性低等优点,适用于对较大活体生物样品进行高质量、长时间三维动态观测.然而,传统高斯光束LSFM存在分辨率低和成像视场小的问题.本文在双边照明LSFM的基础上,结合虚拟单像素成像解卷积技术,提出了一种大视场高分辨双边照明LSFM,实现了视场和分辨率的同时提升.设计和搭建了双边照明LSFM,开展了荧光珠和转基因斑马鱼样品的三维光切片显微成像实验,实验结果证明了系统的三维高分辨成像能力,对于大视场、高分辨LSFM的发展和应用具有重要意义.

渐逝场荧光显微术的原理及应用

渐逝场荧光显微术是新发展起来的一种显微镜技术。该技术利用入射光在不同折射率的两种介质表面所产生的穿透极浅的渐逝波来激发并观察邻近界面的荧光团。渐逝场荧光显微术已在生命科学领域的研究中得到了广泛应用,比如观察出胞作用和入胞作用,对活细胞实时动态观测和对单个分子成像。

荧光显微镜和荧光显微摄影技术

荧光显微镜是在普通光学显微镜的基础上发展起来的。1904年德国科学家柯勒(A·Koehler)发现,标本在紫外线照射下,大多数生物体都有荧光发生。1908年他第一次在实验室演示了紫外荧光显微技术,当时用的是高压火花放电光源,观察生物体内的自发荧光结构,但由于光源强度不足,不能对标本内的微细结构进行系统的研究。荧光色素和超高压汞灯的运用,使荧光显微术的实用性大为提高。继而发现,大多数荧光染料不用紫外光,而只用可见光的短波部分(紫光、蓝光)即能被激发产生荧光。

应用DNA-DAPI荧光显微术观察高等植物生殖细胞的有丝分裂

生殖细胞是雄配子(精子)的前身。

使用一维机械模板的高分辨阿达玛变换显微图像探测技术研究

A novel Hadamard transform(HT) microscopic image detection system which can generate 511× 512 pixel format images of fluorescence or absorptive light for small samples has been developed, when spatial multiplexing is performed with a 511 slit one dimensional Hadamard mask and a highly sensitive linear CCD. The weak native fluorescence imaging for Zephyranthes candida (Lindl.) Herb. Pollen cells can be realized within 1 min. The spatial resolution of 0 6 μm per pixel has been achieved with a 40× objective. The imaging speed, sensitivity and spatial resolution are satisfactory, hence the system has a good application prospect in cell biology and medicine. Some factors that influence imaging speed and quality have been discussed preliminarily.

几种虫生真菌附着胞的荧光显微及扫描电镜观察

本研究通过对细脚拟青霉、蝉拟青霉、玫烟色拟青霉、金龟子绿僵菌和莱氏野村菌在疏水表面产生附着胞的荧光显微镜观察和扫描电镜观察，明确五种虫生真菌均可产生附着胞，细脚拟青霉和金龟子绿僵菌产生单附着胞和复合附着胞两种形态，均呈椭圆至长椭圆形，如遇到不适合浸染的部位，则重新产生芽管向前延伸直至找到适合入侵的部位。蝉拟青霉分生孢子多在顶端发芽成人字形，末端形成椭圆形附着胞，该拟青霉再生附着胞能力强。金龟子绿僵菌和莱氏野村菌附着胞表面有较厚的粘液层，而三种拟青霉附着胞表面均未见有粘液层。

浅谈全内反射荧光显微术在DNA复制研究中的应用

传统生物学方法的研究结果来自于集群平均,但生物化学反应是一个动态的过程,因此反应过程中很多瞬时的中间过程往往被传统的生物学研究方法所忽略。单分子技术在生物学中的应用,使得对反应过程进行实时观测成为了可能。本文以全内反射荧光显微术在DNA复制研究中的应用为例,来探讨单分子技术在生物学研究中的重要作用。

高分辨阿达玛变换显微荧光图像分析(Ⅲ)——系统分辨率和图像恢复过程对单细胞分析结果的影响

提出了一种改进的阿达玛变换 (HT)显微荧光图像分析系统 ,以单细胞试样分析为基础 ,分别对系统的分辨率和解码后的图像恢复过程进行了讨论 .结果表明 ,该系统可应用于单细胞形态分析和定量分析 .图像在 x和 y方向的像素分辨率相同 ,并达到了同一成像物镜下的空间分辨率水平 ,因此在获取微米级单细胞试样的微弱荧光信号的二维图像时 ,系统的成像能力较好 ,可用于单细胞形态分析 .对花粉细胞的荧光衰退过程的定量分析结果表明 ,对不同 HT图像提供的同一系列试样的定量数据进行比较时 ,必须对所有该系列试样的图像恢复过程进行归一化处理 .

近场光学显微技术的进展及其应用

近场光学显微技术突破传统光学衍射极限获得了纳米尺度的空间分辨率,并在近场光存储、半导体材料、生命科学等交叉学科领域发挥了巨大的作用。本文综述了近场光学显微技术的发展现状,讨论了基于近场光学原理的超分辨近场结构在现代光刻技术上的应用、表面等离激元的共振增强作用和束流作用在近场光学领域的进展以及表面增强拉曼散射机理的研究,并介绍了近场光学显微技术在单分子检测和细胞探测等其它生命科学领域的一些发展。

混浊介质荧光显微成像的层析能力研究

采用蒙特卡罗方法给出了混浊介质显微成像中 ,共焦荧光、双光子激发荧光的空间分布。该分布表明双光子激发荧光显微成像具有内在的轴向层析能力 ,而共焦荧光成像的轴向层析能力依赖于共焦针孔的采用。

一种用于宽场荧光显微镜下成像的皮肤厚片免疫荧光染色方法

目的通过改良免疫荧光染色方案,使皮肤厚切片能在宽场荧光显微镜下荧光成像。方法选择成年雄性SD大鼠5只,经Zamboni固定液灌注固定后取后肢足底皮肤,冷冻切片,片厚40μm,行神经纤维标志物PGP9.5免疫荧光染色。首先比较染色后用梯度甘油溶液透明与不经甘油透明对皮肤厚片成像深度的影响;继之在染色后甘油透明的基础上,检测染色前二甲基亚砜(DMSO)处理不同时间(10min、15min和30min)对皮肤背景信号的影响。此外,采用体视显微镜检测梯度甘油透明对切片形态的影响。最后,用上述DMSO-甘油改良染色法进一步对神经纤维其他标志物NF 200和外周蛋白分别进行染色。结果经染色后甘油透明的切片其成像深度显著大于常规染色的切片(P<0.01);在甘油透明的基础上,先用DMSO处理能有效降低皮肤背景着色,时间以15min为佳;梯度甘油处理并不会造成皮肤厚片的形态改变;DMSO-甘油改良染色法也能有效显示皮肤NF200和外周蛋白免疫反应阳性的神经纤维。结论经本改良方法染色的皮肤厚片能在宽场荧光显微镜下良好成像。