卡通形便利贴结合数字显示法在针刺患者中的应用及研究

目的探讨卡通形便利贴结合数字显示法在针刺患者中的应用效果。方法选择2021年7月至2022年7月住院的针刺患者120例作为对象,随机数字表法分为两组,各60例。对照组采用常规方法干预,观察组在对照组的基础上采用卡通形便利贴结合数字显示法干预,7 d护理后评估患者效果,比较两组自我效能、满意度、不良事件发生率。结果两组护理前自我效能无统计意义(P>0.05);两组护理7 d后自我效能得到明显提高;观察组护理7 d后自我技能、自护责任感、自我概念、健康知识评分高于对照组(P<0.05)。观察组护理7d后护理方法、护理效果、护理内容、服务态度及护患沟通满意度均高于对照组(P<0.05)。观察组护理期间藏针、漏针、遗针发生率均低于对照组(P<0.05)。结论卡通形便利贴结合数字显示法操作相对简单,随身携带,取材亦相对方便,便于医院推广应用,且颜色鲜艳,能获得良好的视觉效果;定位部位准确、进针数量明显,一目了然,能节约下一位患者的等待时间,提高工作效率,可增加医院病源,创造良好的经济效益。卡通形便利贴结合数字显示法用于住院针刺患者中,有助于提高患者自我效能,可获得较高的满意度,能降低遗针及漏针等不良事件发生率,值得推广应用。

应用荧光差异显示法对胃癌及癌前病变相关基因的研究

背景与目的:一般认为胃癌是由癌前病变(慢性萎缩性胃炎、肠化生和不典型增生)逐步发展形成的。mRNA差异显示法是筛选肿瘤发生、发展中差异表达基因的有用方法。在胃癌、癌前病变中寻找差异表达的基因将有助于确定胃癌发生前的胃粘膜组织的分子变化。方法:应用荧光mRNA差异显示技术分析胃癌(2例)、癌前病变(2例)和正常胃粘膜(2例)组织,鉴别并分离差异表达的基因片段,进行PCR再扩增。将扩增cDNA片段克隆后进行测序,测序结果提交GenBank,经BLAST软件检索以进行同源性分析。RT-PCR检测血影蛋白基因在胃癌(7例)、癌前病变(7例)和正常胃粘膜(7例)的表达。结果:发现4个差异表达的cDNA片段,其中3个cDNA片段在胃癌中高表达,1个cDNA片段在正常组织和癌前病变组织中高表达。1个在胃癌组织中高表达的cDNA片段与血影蛋白基因(SPTAN1)同源,RT-PCR检测也发现血影蛋白基因在胃癌组织中高表达。另外3个与GenBank中已知的基因序列同源,但其功能目前尚不清楚。结论:所发现的4个差异表达的基因有3个在胃癌组织中高表达,其中SPTAN1基因在胃癌组织的表达比正常胃粘膜及胃异型增生组织表达明显高。

银染mRNA差异显示法的建立及其应用

以银染 m RNA差异显示方法对原发及转移灶胃癌标本总 RNA为研究对象进行银染差示分析和回收差异条带 ,从中获得系列差异表达片段 .随机选取 5个从原发性胃癌样品回收的表达条带 ,以取自体外培养胃癌细胞株的 RNA进行点杂交验证 ,均被证实为真实带 .对 2个差异表达片段进行分析、测序和 Gen Bank同源比较结果表明 :MGD1片段与肿瘤转移相关基因 MTA1完全同源 ,属胃癌转移相关基因 ;PGD2与胃癌转移抑制相关 ,并与细胞周期抑制蛋白 p2 7/ Kip1具 99%的同源性 .结果表明 ,银染差异显示法具有快速、直观、假阳性率低等优点 。

用荧光差异显示法分离新的肝细胞癌相关基因

目的 :寻找新的肝细胞癌 (hepatocellularcarcinoma ,HCC)相关基因。方法 :应用荧光 差异显示 (fluorescentdifferentialdisplay)技术分析人HCC、配对非癌肝、胎肝、正常肝等组织之间的基因差异表达 ,差异表达cDNA片段 ,经测序后 ,再用RNA狭缝杂交对部分差异片段在上述 4种组织中的表达进行验证。结果 :共得到差异表达cDNA片段 110条。经狭缝杂交筛选 ,获得了 4条阳性片段 ,未知cDNA片段L2和与人醛缩酶B 99.5 %同源的cDNA片段L7在部分HCC中特异性低表达 ,未知cDNA片段LC2 7和与人Nip3基因 99.4%同源的cDNA片段LC2 0在部分HCC中特异性高表达。结论 :确认了 4条HCC相关基因。其中L2和人醛缩酶B基因可能为阻抑HCC发生、发展的基因 ,而人Nip3基因和LC2 7可能为促进HCC发生、发展的基因。L2和LC2 7为目前未知的新基因。

mRNA差异显示法比较独角莲作用肝癌细胞SMMC-7721前后的基因表达

目的 :研究独角莲根茎水提取物 (AEoTGE)作用肝癌细胞SMMC 772 1后引起的细胞基因表达变化。方法 :利用mRNA差异显示技术 ,以人肝癌细胞系SMMC 772 1细胞为研究对象 ,筛选AEoTGE作用后表达改变的基因片段。结果 :经测序和鉴定 ,发现 1个基因在加入AEoTGE后表达上升 ,1个基因表达下降。结论 :mRNA差异显示可以用于中草药对细胞的作用机制研究。

不同mRNA差异显示法筛选胃癌细胞耐药相关基因的研究

目的 比较银染和放射自显影mRNA差异展示方法在分离、克隆胃癌细胞耐药相关基因过程中的优缺点。方法 长春新硷诱导人胃癌SGC790 1细胞 ,建立稳定的耐药细胞亚系SGC790 1/VCR。同时应用银染和放射自显影的mRNA差异展示方法筛选胃癌SGC790 1细胞和耐药细胞亚系SGC790 1/VCR之间mRNA表达的差异。结果 显示银染法省时 ,花费少 ,操作方便 ;在获得差异条带方面放射自显影法明显优于银染法 ,且其能得到较多低丰度的差异表达基因 ;而两者在二次PCR扩增 ,克隆 ,测序 ,杂交鉴定及假阳性率方面无明显差异。结论 银染mRNA差异展示法适合于高丰度差异表达基因的快速筛选 。

改进油流显示法研究层流和湍流下绕椭球分离流

用改进的油流显示法研究和对比了层流和湍流状态下绕椭球流动的表面摩擦力线结构 .实验中观察到 ,椭球表面摩擦力线在层流和湍流状态下具有不同的拓扑结构。只看流动对称面一侧 ,在层流状态 ,Re=1 .4× 1 0 6,迎角为 3 0°和 2 0°时都有三条分离线 ;而湍流状态同样实验条件下只观察到两条 ,并且分离线的位置推向下游 ,二次分离线长度也大大缩短。实验还观察了物体表面颗粒状突起对表面摩擦力线的影响 .层流状态下 ,雷诺数为 1 .4× 1 0 6时 ,分离线附近的颗粒状突起会显著影响分离线的形状 ,当雷诺数减为 0 .9× 1 0 6时 ,颗粒对分离线只有微弱的影响 .实验观察到的颗粒影响局限在壁面附近。

离体猪肺的气管、支气管树遮盖表面显示法三维重建

目的 :探讨CT扫描层厚和间隔对三维重建的影响。材料和方法 :研究对象为10具离体新鲜猪肺标本。每一对象均接受层厚/间隔分别为3mm/3mm、3mm/1.5mm和1.5mm/1.5mm三种组合的EBCT扫描。扫描条件 :130kV/630mA ,扫描方式 :连续容积扫描(CVS)。其横断面图像转入Insight工作站(accuimagediagnosticcorporation,USA)进行三维重建 ,重建方式为遮盖表面显示法(SSD)。重建阈值为 -500Hu～ -300Hu。结果 :(1)新鲜离体猪肺标本气管和支气管的一、二级分支的三维测量与解剖测量相符合。(2)3mm/3mm、1.5mm/1.5mm和3mm/1.5mm三组扫描参数的猪肺气管、支气管一级分支的三维重建评分结果间无显著差异 ;对于二级支气管分支(3.67mm左右管径)的三维重建 ,3mm/1.5mm组的评分高于1.5mm/1.5mm组 ,有统计学意义 ;1.5mm/1.5mm组高于3mm/3mm组 ,也有统计学意义。结论 :降低层厚或重叠扫描进行的三维重建可更好地显示较细的支气管 。

mRNA差异显示法克隆小鼠精子发生相关基因-p38MAPK基因

目的 克隆 1、2、3、4周龄小鼠睾丸之间差异表达的基因。 方法 应用改良的mRNA差异显示技术 ,对 1、2、3、4周龄小鼠睾丸进行了基因表达的差异显示分析 ,并对其中 1个从 2周龄小鼠中高表达的cDNA片段进行了克隆和测序。 结果 所克隆的cDNA片段与小鼠大脑、造血干细胞p38MAPK(p38betamitogen activatedpro teinkinase ,p38MAPK β)基因的同源性分别为 91%和 85 %。Northerndotblot结果显示该基因在小鼠睾丸和脑组织中表达最高。

mRNA差异显示法筛选大肠癌相关基因

目的 分离并克隆大肠癌相关基因。方法分别提取大肠癌与正常大肠粘膜的组织总ＲＮＡ，用ｍＲＮＡ差异显示法 （Differential display polymerase chain reaction,ＤＤ－ＰＣＲ）筛选大肠癌特异性表达产物的ｃＤＮＡ片段，对其进行克隆、测 序、序列分析以及斑点杂交初步鉴定。结果获得了２个在大肠癌高表达而在正常大肠粘膜组织低表达的新基因片段。 结论这２条差异显示新基因片段很可能是与大肠癌相关的致癌基因。

银染mRNA差异显示法克隆肝癌相关基因

目的 建立银染 m RNA差异显示方法 ,筛选并克隆肝癌相关基因 .方法 以建系的人肝癌细胞 Hep G2和正常的肝细胞 L0 2的总 RNA为模板 ,用 5 - d T1 1 G锚定引物和 8条随机引物 (AP1～ AP8)组合进行 RT- PCR扩增 ,PCR产物经 6 0 g· L- 1 尿素变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后 ,凝胶银盐染色显示差异的 DNA片段 .结果 建立了快速敏感的银染m RNA差异显示方法 ,分离并克隆了一些肝癌相关基因 .结论 建立的银染 m RNA差异显示法简单、有效 。

mRNA差异显示法分离与水稻籼粳亚种间杂交稻低温敏感不育性相关的cDNA片段

采用mRNA差异显示法对籼粳亚种间杂交稻亚优2号幼穗发育基因在两种不同温度条件下的表达差异进行了研究。结果发现,对照(正常温度28～30℃)和低温处理(白天24℃、夜晚20℃)的幼穗发育基因在转录水平上存在差异。从获得的35条差异片段中随机选取6条进行克隆测序,结果发现其中有1条片段长为556bp,暂命名为DF9,该片段与水稻第一染色体上一段cDNA序列有99%的同源性;其他5条片段与水稻的EST存在一定的同源性。进一步研究发现,DF9可能编码的产物与一些参与信号传导或能量代谢过程的酶存在不同程度的相似性。推测其与水稻籼粳亚种间杂种低温敏感不育性有关。

差异显示法证实氧化型低密度脂蛋白刺激血管内皮细胞胸腺素β_4的高表达

克隆、分离在致动脉粥样硬化因素作用下血管内皮细胞基因的差异表达对了解动脉粥样硬化发生的分子机制至关重要 ,用改进的差异显示 -多聚酶链技术分离、克隆氧化型低密度脂蛋白刺激培养的内皮细胞有差异表达的基因 ,用Northern印迹法证实差异表达的基因。结果发现氧化型低密度脂蛋白诱导培养的人脐静脉内皮细胞中出现一个上调节的cDNA片段 ,长 2 83bp ,其序列与人胸腺素 β4基因有 10 0 %的同源性 ,具有完整的开放阅读框架。Northern印迹分析证实氧化型低密度脂蛋白诱导人脐静脉内皮细胞胸腺素β4升调了 3倍。从而提示氧化型低密度脂蛋白刺激血管内皮细胞胸腺素 β4的高表达 ,进而调节血管内皮细胞的增殖、分化。改进的差异显示 -多聚酶链技术具有便捷、特异性高。

用mRNA差异显示法分离大鼠吗啡依赖相关基因

目的：分离并克隆大鼠吗啡依赖相关基因。方法：ＳＤ大鼠用递增剂量的吗啡作皮下注射，形成吗啡依赖的动物模型。分离鼠脑的中脑导水管周围灰质、伏核、纹状体等核团，提取总ＲＮＡ，用ｍＲＮＡ差异显示（ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｌｄｉｓｐｌａｙＰＣＲ，ＤＤＰＣＲ）的方法，筛选吗啡依赖大鼠特异表达产物的ｃＤＮＡ片段。用３组锚定引物（Ｔ１２ＭＮ，Ｍ＝Ａ，Ｇ，Ｔ或Ｃ，Ｎ＝Ａ，Ｃ或Ｇ）和６组随机引物（ＡＰ１～ＡＰ６）作不同组合进行ＰＣＲ扩增。结果：获得了８０余个差异表达产物的ｃＤＮＡ片段，经斑点杂交初步筛选，克隆了１０个阳性片段，选取４个克隆进行序列分析，获得了４个ｃＤＮＡ片段。结论：通过ＢＬＡＳＴ数据库序列比较，现已确认获得了４个吗啡依赖表达的新基因片段。

mRNA差异显示法筛选卵巢癌细胞株细胞耐药相关基因的初步研究

研究卵巢癌耐药细胞系OC3/Adr和卵巢癌敏感细胞系OC3在mRNA分子水平上的表达差异。方法 :用高浓度阿霉素间歇诱导法建立卵巢癌耐药细胞系 ;应用mRNA差异显示方法找出两株细胞间cDNA差异表达片段 ;RT PCR检测耐药细胞表达差异片段在卵巢癌细胞和组织中的表达。结果 :建立了稳定传代的卵巢癌耐药细胞系OC3/Adr,耐药指数为15 4;OC3/Adr对VP16,CDDP,5 FU的耐药指数分别11 6,10 5,8 8 ,与亲本细胞相比 ,OC3/Adr细胞形态和周期发生变化。筛选到差异表达片段数十条,对其中的四个片段进行了序列测定和同源性分析 ,S1与精子蛋白高度同源;S2与已定位人18号染色体一段序列高度同源 ,但功能未知 ;S3、S4为未知序列 ,S2在耐药细胞中特异表达 ;S3在卵巢癌与正常卵巢、卵巢良性肿瘤中表达有明显差异。结论 :阿霉素诱导的细胞耐药现象与多基因参与有关 。

mRNA差别显示法在农药抗性研究中的应用

ｍＲＮＡ差别显示法是近年来在分子生物领域中发展起来的一种寻找和克隆新基因的有效方法。本文就其原理、方法作了简介，并阐述了其在农药抗性研究中的应用前景。

用mRNA差异显示法比较SHR和WKY大鼠肾脏组织的基因表达

目的用ｍＲＮＡ差异显示技术观察ＳＨＲ与ＷＫＹ大鼠肾脏组织在ｍＲＮＡ表达水平上的差异。方法取１２周龄的ＳＨＲ及ＷＫＹ大鼠，提取肾脏总ＲＮＡ，用含１２个寡聚核苷酸的Ｔ１１Ａ或Ｔ１１Ｇ引物进行逆转录，用Ｔ１１Ａ、ＡＰ１～３，Ｔ１１Ｇ、ＡＰ６，Ｔ１１Ｇ、ＡＰ７～８引物对逆转录产物进行多聚酶链式反应，反应产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳及放射自显影。结果每一种引物组合在单一电泳泳道上可显示７０～１００条基因表达条带，其中绝大多数代表肾脏基因表达的条带是相同的，但其中显示的４条ＳＨＲ大鼠肾脏基因表达的条带与相对应的ＷＫＹ大鼠肾脏基因表达的条带出现了差异。讨论ｍＲＮＡ差异显示技术对于快速筛选ＳＨＲ及ＷＫＹ大鼠肾脏组织的差异表达基因是适用的。

用mRNA差异显示法寻找人绒毛膜上皮癌与孕早期绒毛组织间的差异基因

目的 寻找人绒毛膜上皮癌 (JAR)与孕早期绒毛组织间的差异基因。 方法 采用 m RNA差异显示法 (m RNA differential display PCR,DD- PCR) ,即分别提取正常孕早期绒毛及绒毛膜上皮癌的总 RNA ,在oligod T1 5 作用下分别合成相应的 c DNA ,并以其为模板利用试剂盒中的 2 0对引物组合和α- 32 Pd ATP,Taq酶等进行PCR,将两者的 PCR产物在 6 %变性聚丙烯酰胺凝胶 (PAG)上电泳 ,放射自显影后寻找两者间的差异片段 ,回收差异片段进行二次 PCR,对二次 PCR产物先采用反杂交法初步筛选后再用 Northern Blot鉴定。 结果 从 PAG上切下 32条差异条带 ,经反杂交初步筛选出 11个阳性片段 ,对 11个阳性片段分别做 Northern Blot鉴定 ,其中 1个片段(T2 6 )的基因长度约 1.2 kb,其在绒毛膜上皮癌中的表达远高于正常绒毛组织。 结论 T2