显色原位杂交技术在石蜡切片EBER检测中的应用

目的探讨显色原位杂交技术在石蜡切片中检测EBER的操作与常见问题分析。方法采用显色原位杂交技术,选取15例鼻咽黏膜慢性炎病理活检组织,25例鼻咽非角化鳞状细胞癌病理活检组织行EBER检测。结果 15例鼻咽黏膜慢性炎中有2例EBER呈点状阳性(阳性率13.3%),25例鼻咽非角化鳞状细胞癌全部阳性(阳性率100%)。结论采用显色原位杂交技术检测EBER,阳性信号定位准确,染色效果良好,无背景染色。杂交时间缩短,提高了检测效率,为EB病毒感染相关疾病的病理诊断及鉴别提供有效的依据。

EBER显色原位杂交技术在口腔颌面部淋巴上皮癌中的应用体会

目的探讨EBER显色原位杂交技术(CISH)在口腔颌面部淋巴上皮癌中特有的操作与改进方法。方法应用CISH技术,荧光素标记的寡核苷酸探针EBER原位杂交检测试剂盒对40例疑为口腔颌面部淋巴上皮癌的病例进行EBER检测。结果 EBER阳性率为95%;阳性信号主要定位在肿瘤上皮细胞巢的细胞核上,呈棕黄色,周围淋巴细胞及正常组织未见明显着色;信号定位准确,染色结果清晰易辨,无背景干扰。结论简化操作EBER原位杂交检测试剂盒能够节省时间、增强信号强度和提高工作效率等。

双探针显色原位杂交技术在乳腺癌HER2基因检测中的应用

目的:通过双探针显色原位杂交技术检测乳腺癌HER2基因的状态,评估双探针显色原位杂交技术的临床应用价值。方法:选取存档蜡块82例,分别用免疫组化及双探针显色原位杂交两种方法对Her-2基因及蛋白进行检测,并采用四格表卡方检验、配对卡方检验及Kappa检验作相关统计学分析。结果:两种方法检测结果不存在显著性差异(P>0.05);就两种方法检测结果的一致性分析而言,两种方法所得出的检测结果存在较好的一致性(P<0.05)。结论:双探针显色原位杂交技术检测乳腺癌HER2基因扩增结果与免疫组化检测HER2蛋白过表达结果高度相似,可作为检测HER2基因状态的有效方法。

乳腺癌HER2基因扩增检测方法——显色原位杂交法的应用及优化

目的：应用显色原位杂交技术（chromogenic in situ hybridization，CISH）检测乳腺癌组织人表皮生长因子受体2（hu—man epidermal growth factor receptor 2，HER2）基因扩增情况，并对操作方法进行优化。方法：选择免疫组织化学（IHC）En—Vision法检测结果2＋及以上的60例乳腺癌组织作为研究对象，应用CISH技术检测其HER2基因扩增情况，分析二者结果的相关性；总结CISH操作经验，优化操作方法。结果：44例标本IHC检测HER2蛋白表达为3＋，其中40例CISH检测呈现HER2基因高倍扩增，4例无扩增；基因扩增与蛋白表达的符合率为91％。16例IHC检测HER2表达为2＋标本基因扩增与蛋白表达的符合率为50％。IHC与CISH符合率为80％（48／60），二者明显相关（P〈0．01）。操作过程中应严格控制切片厚度，一般要求4～5μm；杂交变性一定要彻底，杂交后的洗涤温度和时间也很重要，最好控制在70～75℃；要严格控制苏木精衬染时间；每次实验最好有阳性对照片，可以有效进行质量控制。结论：CISH检测乳腺癌HER2基因扩增的结果与IHC检测的蛋白表达结果符合率较高，可作为乳腺癌HER2基因检测的一项新技术；但在具体操作时，应注意严格控制切片厚度、消化及杂交后洗涤温度与时间以及苏木精衬染时间等因素。

HER-2基因及蛋白的检测在乳腺癌临床诊断中的价值

目的探讨用免疫组化(immunohistochemistry,IHC)和显色原位杂交技术(chromogenic in situ hybridization,CISH)检测乳腺癌HER-2蛋白表达和基因扩增在临床病理诊断及分子靶向治疗中的应用及意义。方法用免疫组化(IHC)和显色原位杂交技术(CISH)检测60例乳腺癌石蜡包埋组织标本中HER-2蛋白的表达及基因扩增情况,比较两种方法的结果以及与临床病理的关系。结果 HER-2蛋白过表达与HER-2基因扩增之间密切相关。结论两者综合结果的判定对乳腺癌患者的临床治疗有明确的指导意义,可用于临床赫塞汀(Herceptin)分子靶向治疗病例的筛选。