显色基质鲎试剂法在人血白蛋白热原检测中的应用

为了对显色基质法测定人血白蛋白中的内毒素含量方法进行探讨。以内毒素,鲎试剂及显色基质,在一定的条件下反应释放出对硝基苯胺(PNA),溶液呈现黄色,于波长545nm处比色读数,其产色深浅与内毒素浓度呈线性关系,从而定量测定出检品中内毒素含量。结果表明标准曲线的线性相关系数r≥0.98,人血白蛋白经3.3倍稀释后无干扰作用。显色基质法与家兔法比较,有灵敏、快速、能定量、重复性好的特点,可用于人血白蛋白内毒素含量的测定。

显色基质鲎试剂(终点法)测定细菌内毒素检查用水及有色药品中微量细菌内毒素

目的探讨细菌内毒素检查用水(BET水)及有色药品中微量细菌内毒素的测定方法。方法采用显色基质鲎试剂(终点法)检测经多次高压灭菌的BET水中微量细菌内毒素,并进行血卟啉注射液中细菌内毒素回收试验。结果检测最低浓度可达0．001 5 Eu／mL,细菌内毒素回收率分别为115．75％和115．00％。结论用显色基质鲎试剂定量测定有色药品中细菌内毒素含量是可行的。

显色基质鲎试剂(MT-1型试剂盒)对动物血液3种前处理方法回收比较试验的研究

目的通过对动物血液外加细菌内毒素用3种前处理方法进行处理,比较3种血液前处理方法的回收率,同时考核本公司生产的显色基质鲎试剂(MT-1型试剂盒)质量。方法应用显色基质鲎试剂(MT-1型试剂金)对高氯酸(PCA)法、新高氯酸(NewPCA)法、碱试剂(TPP-BEC)法3种前处理方法进行动物血液外加内毒素回收实验。结果用显色基质鲎试剂(MT-1型试剂盒)对动物血液外加内毒素回收实验,TPP-BEC法的回收率最高。结论动物血液前处理,TPP-BEC法有简便、快速、样品用量少等优点;本公司生产的MT-1型试剂盒与国外同类产品质量相同。

显色基质法检测乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液细菌内毒素含量

目的:建立快速的乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液细菌內毒素定量检查法。方法:使用显色基质鲎试剂对不同批号的乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液分别进行干扰试验,考察确立乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液內毒素定量检查法。结果:表明标准曲线的线性相关系数r≥0.98,乳酸左氧氟沙星在2mg·ml^(-1)浓度无干扰作用。结论:显色基质法与凝胶法比较,有灵敏、快速、能定量、重复性好的特点,可用于乳酸左氧氟沙星内毒素含量的测定。

显色基质法定量测定质粒DNA中的细菌内毒素

探讨使用显色基质法定量测定质粒DNA中细菌内毒素含量的可行性。结果表明,质粒DNA溶液经2倍稀释,对内毒素检测不存在干扰作用,用显色基质法可以定量测定质粒DNA中内毒素含量。显色基质法与家兔热源法比较,有敏捷、快速、定量、稳定可行的优点,其测定结果同家兔热源法结果一致。

乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液细菌内毒素检测中显色基质法的研究

目的:建立一种快速检测乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液内细菌内毒素的方法。方法:使用显色基质鲎试剂对不同批号的乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液分别进行干扰试验,考察确立乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液内毒素定量检查法。结果:表明标准曲线的线性相关系数r≥0.98,乳酸左氧氟沙星在2mg/ml浓度无干扰作用。结论:显色基质法具有灵敏、快速、能定量、重复性好的特点,可用于乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液细菌内毒素含量的检测。

显色基质法在盐酸左氧氟沙星注射液热原检测中的应用

目的建立快速的盐酸左氧氟沙星注射液细菌内毒素定量检查法,替代凝胶法。方法使用显色基质鲎试剂对不同批号的盐酸左氧氟沙星注射液分别进行干扰试验,考察确立盐酸左氧氟沙星注射液内毒素定量检查法。结果表明标准曲线的线性相关系数r≥0.98,盐酸左氧氟沙星注射液在1∶32稀释级别无干扰作用。结论显色基质法与凝胶法比较,有灵敏、快速、能定量、重复性好的特点,可用于盐酸左氧氟沙星内毒素含量的测定。

显色基质法检测乳酸环丙沙星氯化钠注射液的细菌内毒素

目的比较显色基质法与凝胶法检测乳酸环丙沙星氯化钠注射液的细菌内毒素的效果。方法采用样品稀释法研究显色基质鲎试剂对不同批号乳酸环丙沙星氯化钠注射液的干扰,并与凝胶法鲎试剂对样品的干扰试验比较。结果显色基质法标准曲线的线性相关系数≥0.98,乳酸环丙沙星氯化钠注射液在0.5 mg/mL浓度时无干扰作用,明显高于凝胶法无干扰浓度(0.125 mg/mL)。结论与凝胶法比较,显色基质法有灵敏、快速、能定量、重复性好的特点,可用于乳酸环丙沙星氯化钠注射液内毒素含量的测定。

超滤技术去除重组MUC1-MBP融合蛋白中内毒素的效果评价

目的:评价超滤技术去除纯化后重组MUC1-MBP融合蛋白(MUC1-MBP)溶液中内毒素的效果,阐明超滤技术对去除内毒素的作用。方法:选取表达MUC1-MBP大肠杆菌基因工程菌,分别通过CM Sepharose FF离子交换层析(CM)(CM组)、CM联合Phenyl Sepharose 6FF疏水层析(C6)(CM+C6组)、CM加超滤(CM+超滤组)以及CM联合C6加超滤(CM+C6组+超滤)进行纯化,并去除内毒素;采用SDS-PAGE分析蛋白纯度;鲎试剂显色基质法检测内毒素表达水平。结果:SDS-PAGE分析,在预期相对分子质量62 000处呈现单一条带,Quantity One分析纯度>96%;CM组与CM+C6组内毒素表达水平均较高,但2组比较差异无统计学意义(P>0.05);与CM组比较,CM+超滤组内毒素表达水平明显降低(P<0.01);与CM+C6组比较,CM+C6超滤组内毒素表达水平明显降低(P<0.01);CM+超滤组与CM+C6+超滤组内毒素表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:CM或CM联合C6均不能有效去除内毒素,其中C6对去除内毒素几乎无作用;CM加超滤可有效去除内毒素,超滤技术在去除内毒素中发挥重要作用。

慢性乙型肝炎患者血清内毒素、IL-4、IL-18水平的变化

目的:研究慢性乙型肝炎患者病程中血清内毒素(LPS)、IL-4和 IL-18水平的变化,探讨他们在发病中的作用.方法:采用鲎试剂基质显色法,检测血清 LPS;用 ELISA 法检测血清 IL-4、IL-18.同时检测 ALT 等生化指标和五型肝炎病原学指标.慢性乙型肝炎35例,健康对照30名.结果:血清 LPS、IL-4和 IL-18水平于慢性乙型肝炎活动期及缓解期均显著高于健康对照(t=2.656,P<0.01),活动期明显高于缓解期(t=2.650,P<0.01).活动期三项指标均呈正相关(t=2.672,P<0.01).结论:慢性乙型肝炎病程中内毒素、IL-4和 IL-18水平的变化及其相互调节,影响着慢性乙型肝炎发病和转归.