牵张应变诱导人牙周膜细胞晚期凋亡的实验研究

目的 :研究机械牵张应变对人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,HPDLCs)晚期凋亡的影响。方法 :体外培养HPDLCs,利用动态机械应变细胞加载装置对HPDLCs加载1%、10%和20%的动态牵张应变6、12、24和48 h,通过流式细胞仪和激光扫描共聚焦显微镜对经过TUNEL染色的细胞进行晚期凋亡检测。采用SPSS 11.0软件包对数据进行统计学分析。结果:HPDLCs加载后,呈现栅栏状相互平行排列趋势,排列方向垂直于牵张力方向。各应变组细胞的晚期凋亡率在加载24 h时达到该应变组的峰值,且具有一定时间和应变依赖性。结论:通过动态机械应变细胞加载装置对人牙周膜细胞的牵张加载,发现牵张应变可以诱导细胞发生晚期凋亡,具有时间和应变值依赖性,24 h时晚期凋亡率达到峰值。

梗死相关血管晚期再灌注对实验性心肌梗死心肌细胞凋亡的影响

目的探讨犬急性心肌梗死后梗死相关血管晚期再灌注对梗死周边缺血区心肌细胞凋亡以及凋亡相关基因bcl-2、bax及其相关蛋白表达的影响。方法健康成年杂交犬28只,全身麻醉下常规开胸暴露冠状动脉后随机分为三组:假手术组(n=8)、急性心肌梗死组(n=10)和晚期再灌注组(n=10)。假手术组仅行左冠状动脉前降支下穿过丝线而不结扎冠状动脉,急性心肌梗死组行左冠状动脉前降支高位永久结扎,晚期再灌注组在高位结扎左冠状动脉前降支6 h后松解结扎线予以6 h的再灌注处理。共有23只犬模型制作成功。各组犬均于术后12 h处死,采集心肌标本。使用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的原位缺口末端标记法检测心肌细胞凋亡,逆转录聚合酶链反应法检测心肌细胞bcl-2和bax mRNA表达水平,免疫组织化学染色和蛋白印迹法分析bcl-2、bax在心肌细胞中的表达情况。结果晚期再灌注组心肌细胞凋亡指数较急性心肌梗死组明显减少(P<0.05),且两组心肌细胞凋亡指数均高于假手术组(P<0.01)。急性心肌梗死组和晚期再灌注组bcl-2和bax mRNA的表达均明显高于假手术组(P<0.01),且晚期再灌注组bax mRNA的表达明显低于急性心肌梗死组(P<0.05),而bcl-2 mRNA两组间差异无显著性。与假手术组相比,急性心肌梗死组和晚期再灌注组bcl-2蛋白的表达均明显升高(P<0.01),其中在晚期再灌注组的表达略高于急性心肌梗死组,但差异无显著性;晚期再灌注组bax蛋白的表达明显高于假手术组(P<0.01),但明显低于急性心肌梗死组(P<0.05)。结论急性心肌梗死后晚期再灌注可以减少梗死周边缺血区心肌细胞凋亡,其机制可能与心肌细胞bax基因及其相应的蛋白表达减少有关。

“细胞凋亡信号传导途径及其检测方法”教学探讨

《细胞凋亡信号传导途径及其检测方法》课程主要是针对生物医学研究生开设的一门课程,其最终目的是协助他们完成细胞凋亡方面的科研工作。通过对《细胞凋亡信号传导途径及其检测方法》课程教学进行探讨,针对课程教学中存在的问题,提出相应的教学建议和改进措施,其目的是确保教学质量,提高教学效果。

交通相关的细颗粒物(PM_(2.5))对6T-CEM细胞凋亡的影响

目的探讨交通相关的细颗粒物PM2.5对6T-CEM(人T淋巴细胞白血病细胞株)增殖抑制以及诱导凋亡的情况。方法采用四甲基偶氮唑兰(MTT)比色法测定不同浓度PM2.5对细胞24和48 h增殖功能的影响;FITC-AnnexinV/PI染色流式细胞仪测定交通相关细颗粒物染毒6T-CEM细胞的早期凋亡和坏死;罗丹明123法检测PM2.5对线粒体膜电位的影响。结果 160、320和800μg/ml PM2.5染毒细胞24 h与320和800μg/ml PM2.5染毒细胞48 h可抑制细胞增殖功能,与对照组比较有统计学意义(P<0.05);经FITC-Annexin V/PI染色流式细胞仪测定,320μg/mlPM2.5染毒细胞24 h后,细胞早期凋亡比生理盐水组升高,20、80和320μg/ml PM2.5染毒细胞48 h,细胞早期凋亡比生理盐水组升高,320μg/ml PM2.5染毒细胞24和48 h,细胞坏死比生理盐水组升高,差异有统计学意义(P<0.05);160和320μg/ml PM2.5染毒细胞24 h与80、160和320μg/ml PM2.5染毒细胞48 h线粒体膜电位与对照组比较有统计学差异(P<0.05)。结论交通相关的细颗粒物PM2.5对6T-CEM增殖功能有抑制作用,对细胞凋亡有一定的诱导作用,线粒体途径参与凋亡。