晚期蛋白氧化产物通过氧化应激诱导肾小管上皮细胞转分化

目的探讨晚期蛋白氧化产物(AOPP)对人近端肾小管上皮细胞转分化(EMT)的影响及作用机制。方法实验共3部分:⑤分别用不同浓度AOPP及BSA刺激细胞24 h后检测α-SMA、E-Cadherin蛋白表达;⑤AOPP刺激细胞不同时间后检测α-SMA、E-Cadherin表达;⑤分别予BSA、AOPP以及用DPI、C-SOD预处理后再加入AOPP刺激细胞,检测α-SMA、E-Cadherin表达和不同时间的MDA含量及SOD、CAT、GSH-px活力。结果 AOPP以浓度和时间依赖方式诱导HK-2细胞α-SMA表达上调、ECadherin表达下调。AOPP引起细胞MDA含量上升,SOD、CAT和GSH-px活力下降。DPI、C-SOD预处理细胞可以部分抑制AOPP诱导的α-SMA表达上调和E-Cadherin表达下调;降低MDA含量,提高SOD、CAT和GSH-px活力。结论 AOPP通过氧化应激诱导肾小管上皮细胞EMT,抑制NADPH氧化酶活性及抗氧化治疗可以抑制肾小管上皮细胞EMT,延缓肾间质纤维化的进展。

2型糖尿病肾病患者血清晚期蛋白氧化产物的变化

目的:研究糖尿病肾病患者血清蛋白氧化指标晚期蛋白氧化产物(AOPP)的改变及其与超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)的关系。方法:2型糖尿病患者85例,分为无糖尿病肾病(DM)组(n=25)、早期糖尿病肾病(DN3)组(n=24)、临床糖尿病肾病(DN4)组(n=17)、终末期糖尿病肾病(DN5)组(n=19)。用改进后的Wikto-Sarsat方法分别测定各组的血清AOPP,黄嘌呤氧化酶法测定SOD,DTNB[5,5,-二硫代双(2-硝基苯甲酸)]显色法测定GPx。结果:DN5组患者的血清AOPP[(117.8±64.8)μmol/L]和DN4组的血清AOPP[(80.0±23.0)μmol/L]显著高于DM组[(58.2±17.7)μmol/L],P<0.01。DN3组血清AOPP[(72.7±17.2)μmol/L]与DM组间无显著差异。血清AOPP与肌酐水平呈显著正相关(r=0.277,P<0.05),与尿微量白蛋白无明显相关性(r=0.06,P>0.05)。血清AOPP与SOD及GPx呈显著负相关(r分别为-0.217和-0.374,P<0.05)。结论:糖尿病肾病患者的血清蛋白氧化较无糖尿病肾病患者显著增强。

血清晚期蛋白氧化产物联合转化生长因子β检测在高血压肾病中的诊断价值

目的:探讨血清晚期蛋白氧化产物(AOPPs)及转化生长因子β(TGF-β)在高血压肾病的含量以及诊断价值。方法:选择高血压病患者110例作为研究组,其中58例为高血压肾病组,52例为高血压组,另外选取55例健康体检者作为健康对照组。比较三组血清AOPPs及TGF-β的含量变化,并研究AOPPs及TGF-β在高血压肾病中的相关性及诊断价值。结果:与健康对照组相比,高血压组和高血压肾病组患者的血清TGF-β含量均升高,差异有统计学意义(P<0.01);与健康对照组相比,高血压组患者的血清AOPPs含量无统计学差异(P>0.05),高血压肾病组患者的血清AOPPs含量升高,差异有统计学意义(P<0.01);与高血压组相比,高血压肾病组患者的血清AOPPs含量升高,差异有统计学意义(P<0.01)。高血压肾病组患者血清TGF-β和AOPPs的含量呈显著正相关(r=0.5162,P<0.01)。结论:血清TGF-β联合AOPPs的检测对高血压肾病具有较高的诊断价值。

狼疮肾炎患者血清晚期蛋白氧化产物水平与疾病活动的相关性

目的探讨氧化应激标志物晚期蛋白氧化产物(AOPP)在狼疮肾炎(LN)患者血清水平变化及其与LN疾病活动的相关性。方法 LN患者29例,根据肾小球滤过率(eGFR)水平分为eGFR≥60 m L/(min·1.73m2)组16例、eGFR<60 m L/(min·1.73 m2)组13例。同期选择性别、年龄、体重匹配的健康对照者21例(对照组),测定各组血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、血白蛋白(ALB)、血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)、补体C3、C4以及24h尿蛋白定量(24h UPQ)、eGFR;ELISA法测定各组患者的AOPP、丙二醛(MDA)、抗ds DNA抗体;运用系统性红斑狼疮(SLE)疾病活动指数(SLEDAI)积分表对LN患者的疾病活动性进行评分。结果 LN组患者CRP、ESR、24h UPQ、抗ds DNA抗体、AOPP、MDA均较对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),C3、C4、eGFR较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05);LN患者eGFR<60组ESR、MDA较eGFR≥60组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);而CRP、AOPP、抗ds DNA抗体、SLEDAI积分、24h UPQ均较eGFR≥60组升高,但差异无统计学意义(P>0.05);血清AOPP与MDA呈显著正相关(r=0.942,P<0.05),与抗ds DNA抗体呈显著正相关(r=0.982,P<0.05),与SLEDAI积分呈正相关(r=0.653,P<0.05),与eGFR呈负相关(r=-0.298,P<0.05)。结论 LN患者血清AOPP水平明显升高,且随着肾功能损害而进一步升高,可作为一种评估LN氧化应激状态的指标。AOPP与LN疾病活动性密切相关。

血清乙二醛酶I在2型糖尿病眼肌麻痹中的意义及与晚期蛋白氧化产物及氧化应激的相关性

目的:探讨血清乙二醛酶I在2型糖尿病眼肌麻痹(DOMP)中的意义及其与晚期蛋白氧化产物(AOPP)及氧化应激的相关性。方法:分析58例DOMP、50例单纯T2DM及30例正常受试者的临床资料,测定受试者血脂、空腹血糖、糖化血红蛋白、胰岛素、乙二醛酶I、AOPP及氧化应激指标包括丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化力(T-AOC),采用稳态模型计算胰岛素抵抗指数。结果:高密度脂蛋白、SOD、T-AOC与乙二醛酶I呈正相关而与AOPP呈负相关,甘油三酯、低密度脂蛋白、空腹血糖、糖化血红蛋白、胰岛素抵抗指数、MDA与乙二醛酶I呈负相关而与AOPP呈正相关。AOPP与乙二醛酶I高度负相关(r=-0.823,P<0.001)。多元线性回归分析提示课题分组是乙二醛酶、AOPP的重要影响因素,即按DOMP、单纯T2DM及正常受试者的分组顺序乙二醛酶逐级升高(Sβ=0.554)而AOPP逐级下降(Sβ=-0.469)。结论 :DOMP血清乙二醛酶I显著降低,并与AOPP及氧化应激密切相关,提示乙二醛酶I可能在抑制DOMP发生发展中有重要作用。

2型糖尿病患者尿蛋白水平与血清白细胞介素1β和晚期蛋白氧化产物的关系

目的观察不同尿白蛋白排泄率（UAER）的2型糖尿病患者血清白细胞介素18（IL-1β）和晚期蛋白氧化产物（AOPP）水平，探讨其在糖尿病蛋白尿发生和发展中的作用。方法选择2008年11月至2010年2月在我院住院的2型糖尿病患者62例，按照UAER水平分组：间断白蛋白尿组（n=20），UAER〈20μg／min；微量白蛋白尿组（n=22），UAER20-200μg／min；临床白蛋白尿组（n=20），UAER〉200μg／min。选择同期健康体检者20例作为对照组。比较各组血清IL-1μ和AOPP水平。结果3组糖尿病患者血清IL-1β和AOPP水平均高于对照组（P〈0．05），微量白蛋白尿组IL-1β和AOPP水平均高于正常白蛋白尿组（P〈0．05），显性白蛋白尿组IL-1β和AOPP水平均高于微量白蛋白尿组和正常白蛋白尿组（P〈0．01）。血清IL-1β与AOPP呈正相关（r=0．760，P〈0．01），血清IL-1β和AOPP与UAER呈正相关（r分别为0．809和0．813，P〈0．01）。结论IL-1β和AOPP可作为糖尿病肾脏微血管病变的早期预测因子，对预防糖尿病肾脏微血管病变有重要意义。

血清晚期氧化蛋白产物与单核细胞趋化蛋白-1水平对妊娠糖尿病孕妇子痫前期发生的诊断价值

目的探究血清晚期氧化蛋白产物(AOPP)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)水平与妊娠期糖尿病(GDM)孕妇子痫前期(PE)发生的相关性。方法选取2021年10月至2023年9月广西医科大学附属民族医院产科收治的70例GDM并发PE孕妇作为合并组,另选取同期来广西医科大学附属民族医院孕检的单纯GDM孕妇70例作为非合并组,统计分析两组研究对象的临床资料及实验室指标,采用多因素logistic分析血清AOPP、MCP-1与GDM并发PE的相关性。选用ROC曲线分析血清AOPP、MCP-1联合检测GDM并发PE的诊断价值。结果单因素分析结果显示,两组患者在年龄、孕前体重指数(BMI)、血清AOPP以及MCP-1表达水平上的比较,差异均具有统计学意义(P<0.05);多因素logistic回归显示,年龄、孕前BMI、血清AOPP以及MCP-1均为GDM并发PE的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线显示,血清AOPP、MCP-1及二者联合检测曲线下面积为0.867、0.916、0.942。结论AOPP、MCP-1与GDM并发PE发病风险密切相关,对病情诊断具有较高应用价值。

糖尿病肾病患者血清晚期蛋白氧化产物水平及其临床意义的研究

目的通过检测不同时期糖尿病肾病(DN)患者血清晚期蛋白氧化产物(AOPP)水平,分析其与超氧化物歧化酶(SOD)及单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的相关性,研究蛋白氧化与DN的关系及临床意义。方法 66例2型糖尿病(T2DM)患者根据尿白蛋白排泄率(UAER)将患者分为以下3组:正常白蛋白尿(N-UAlb)组20例(UAER<30 mg/24h)、微量白蛋白尿(M-UAlb)组24例(UAER 30～300mg/24h)和大量白蛋白尿(L-UAlb)组22例(UAER>300 mg/24h),并与20名正常对照(NC)组比较。用Wikto-sarsat介绍的方法改进后测定各组的血清AOPP水平,黄嘌呤氧化酶法测定SOD水平,ELISA法测定血清MCP-1水平。结果随着UAER的增加,血清中AOPP水平逐渐增高,各组间比较均有统计学意义(P<0.05);血清中SOD水平逐渐降低,除N-UAlb组与NC组间相比外,其余各组间比较均有统计学意义(P<0.05);血清MCP-1水平逐渐增加,除L-UAlb组与M-UAlb组间相比外,其余各组间比较均有统计学意义(P<0.05)。相关分析表明血清AOPP与SOD呈显著负相关,与BUN、Cr、TG、UAER呈显著正相关,与MCP-1、HDL-C、LDL-C、TC、HbA1c、BMI无相关性。血清SOD与BUN、Cr、UAER、MCP-1呈显著负相关,与TG、TC、LDL-C、HDL-C、HbA1 c、BMI无相关性。多重线性回归分析结果显示Cr、TG、UAER对AOPP有显著影响;Cr、UAER、MCP-1对SOD有显著影响。结论增加的蛋白氧化损伤及氧化应激状态可能在DN的发生发展中起重要作用,增加的蛋白氧化应激可能与DN的氧化应激状态和慢性炎症相关。

晚期蛋白氧化产物对人牙龈成纤维细胞增殖、凋亡及合成基质金属蛋白酶1的影响

目的探讨晚期蛋白氧化产物（advanced oxidative protein products，AOPP）对人牙龈成纤维细胞（humangin gival fibroblasts，HGF）增殖、凋亡及合成基质金属蛋白酶1（matrixmatelloproteinast-1，MMP-1）的影响，探讨AOPP在糖尿病患者牙周病加重中的作用及其介导氧化应激的可能机制。方法采用酶消化．组织块培养法获得HGF，在对照组中加入不含AOPP-人血清白蛋白（human serum albumin，HSA）的培养基，在实验组中分别加入含有5、50、100mg／LAOPP—HSA的培养基，甲基噻唑基四唑（Mrrr）比色法检测在不同时间段下HGF增殖水平的变化；ELISA法测定HGF合成MMP-1的水平；与含50mg／LAOPP—HSA培养基共培养72h，经膜联蛋白V／PI双染后，流式细胞仪检测HGF的凋亡状况。结果5、50、100mg／LAOPP—HSA组对HGF增殖抑制率与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．05），并在共培养的48h达到峰值[分别为（19．01±6．28）％、（30．48±5．75）％、（39．75±4．60）％]，呈浓度依赖关系；各实验组HGF的凋亡率与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）；共培养72h后，0．5、5、50、100mg／LAOPP—HAS组中MMP-1合成量[分别为（55．61±1．06）、（65．78±4．04）、（79．24±3．09）、（89．764-28．88）mg／L]均高于对照组[（34．90±3．15）mg／L，P〈0．05]，MMP-1水平与AOPP—HSA呈浓度依赖关系。结论AOPP能抑制成纤维细胞增值，该抑制作用不是通过诱导细胞凋亡来实现；AOPP可增加MMP-1的合成，促进胶原溶解，加速牙周病进程。

晚期蛋白氧化产物对大鼠胰岛微血管内皮细胞体外增殖、迁移及再血管化功能的影响及机制研究

目的探讨晚期蛋白氧化产物(AOPPs)对大鼠胰岛微血管内皮细胞(IMECs)体外增殖、迁移及再血管化功能的影响及可能机制。方法分为空白对照(NC)组、鼠血清白蛋白(RSA)组、不同浓度AOPP组(100、200、300μg/ml)及AOPPs 200μg/ml+NADPH氧化酶抑制剂(Apocynin)组。CCK8试剂盒检测IMECs增殖活性;Transwell小室、Matrigal胶及显微镜下细胞计数法检测AOPPs对IMECs体外迁移及再血管化的影响;化学发光法检测还原型辅酶-Ⅱ(NADPH)氧化酶活性;免疫印迹检测磷酸化丝-苏氨酸激酶(p-Akt)、磷酸化内皮型一氧化氮合酶(p-eNOS)蛋白的表达及ELISA检测一氧化氮(NO)水平。结果 AOPPs可呈剂量、时间依赖性降低IMECs体外增殖能力、迁移能力及再血管化能力,增强细胞内NADPH氧化酶的活性,降低细胞内p-Akt、p-eNOS的表达水平以及细胞内NO的水平(P<0.05)。结论 AOPPs可导致胰岛微血管内皮细胞增殖、迁移及再血管化功能受损,可能与下调p-Akt及p-eNOS的表达水平以及加强NADPH氧化酶介导的eNOS脱偶联有关。

晚期氧化蛋白产物导致血管内皮细胞氧化应激损伤

目的 研究慢性肾功能衰竭病人循环晚期氧化蛋白产物 (AOPP)对人血管内皮细胞活性的影响及机制。方法 用次氯酸(HOCl)氧化牛血清白蛋白 (BSA)体外制备AOPP BSA ,将人血管内皮细胞株ECV30 4与不同浓度、不同氧化修饰程度的AOPP BSA共同培养 ,用MTT法测定细胞活性 ,用VICTORWallac 14 2 0多标记分析系统动态检测细胞内活性氧的产生量。结果 AOPP BSA使血管内皮细胞活性降低 ,其对内皮细胞活性的影响与BSA氧化程度及AOPP BSA的浓度有关 ;AOPP BSA刺激内皮细胞生成活性氧 ,细胞内活性氧的生成量随BSA氧化程度和AOPP BSA浓度增加而升高。用硒谷胱甘肽过氧化物酶小分子模拟物ebselen预处理细胞 ,可使AOPP BSA诱导产生的活性氧减少 5 3% ,并可保护细胞免受AOPP BSA造成的细胞损伤。结论 晚期氧化蛋白产物能通过氧化应激引起血管内皮细胞损伤。

妊娠合并阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者血清晚期氧化蛋白产物水平检测的临床价值

目的探讨妊娠合并阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)与血清晚期氧化蛋白产物(AOPP)的相关性以及其可能的发病机制。方法选择妊娠合并OSAHS患者56例和正常妊娠组24例行标准多导睡眠呼吸监测系统监测记录呼吸暂停低通气指数(AHI);采用分光光度法检测血清AOPP水平,同时测定平均动脉压(MAP)和24h尿蛋白。结果正常妊娠组与妊娠合并OSAHS组AOPP、AHI、MAP和24h尿蛋白比较有统计学差异(P均<0.01);其中,反映OSAHS病情的指标AHI值与MAP、24h尿蛋白、AOPP呈正相关(r分别为:0.745、0.765、0.798,P均<0.01);反映氧化应激指标的AOPP值与MAP、24h尿蛋白呈正相关(r分别为:0.626、0.619,P均<0.01)。结论妊娠合并OSAHS患者病情与AOPP水平密切相关;妊娠合并OSAHS部分参与了妊娠期高血压疾病(HDCP)的病理过程,并有可能是HDCP中的一个重要的致病因素。

牛蒡子苷对晚期氧化蛋白产物诱导小鼠足细胞转分化的影响

目的探讨牛蒡子苷对晚期氧化蛋白产物(AOPP)诱导小鼠足细胞转分化的影响。方法用200μg/ml AOPP刺激小鼠足细胞24 h,同时加入牛蒡子苷(浓度分别为50、100、200、400μmol/L)进行干预,采用Western blotting检测内质网应激标志性蛋白Grp78、CHOP及平滑肌激动蛋白(α-SMA)表达水平。结果牛蒡子苷干预后可抑制小鼠足细胞Grp78、CHOP、α-SMA蛋白表达水平,且在一定范围内呈剂量依赖性。结论 AOPP可通过引起小鼠足细胞内质网应激(ERS)从而导致上皮-间充质转分化(EMT),而牛蒡子苷则可通过减轻ERS从而逆转EMT,为治疗肾脏纤维化提供新的研究方向。

晚期氧化蛋白产物通过活性氧诱导单核细胞分泌肿瘤坏死因子

目的探讨晚期氧化蛋白产物(AOPP)对单核细胞分泌肿瘤坏死因子(TNFα)的影响及可能机制。方法以THP-1和人外周血单核细胞为单核细胞模型,与用次氯酸氧化牛血清白蛋白(BSA)制备的AOPP-BSA共同培养,用ELISA法检测培养上清TNFα的释放量,用VICTORWallac1420多标记分析系统检测细胞氧化2,7-二氢二氯荧光素产生的荧光量反映活性氧的产生量;用抗氧化剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC),NADPH氧化酶抑制剂apocynin和P38磷酸化抑制剂SB203580预处理细胞,探讨AOPP诱导单核细胞分泌TNFα的可能机制。结果AOPP-BSA能诱导单核细胞TNFα的分泌和细胞内活性氧(ROS)的产生。用PDTC预处理细胞,可以清除AOPP-BSA诱导产生的ROS,同时抑制TNFα的分泌。用apocynin抑制NADPH氧化酶及用SB203580抑制P38磷酸化均能有效地抑制AOPP-BSA诱导的TNFα分泌。结论AOPP可能通过激活单核细胞NADPH氧化酶,释放ROS,使P38磷酸化,导致TNFα的分泌。

胰岛素样生长因子-1、晚期蛋白氧化产物、单核细胞趋化蛋白-1、超氧化物歧化酶水平联合预测妊娠糖尿病孕妇妊娠结局的价值

目的分析胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、晚期蛋白氧化产物(AOPP)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、超氧化物歧化酶(SOD)水平联合预测妊娠糖尿病(GDM)孕妇结局的价值。方法选取2019年1月至2020年1月焦作市人民医院产科收治的89例GDM孕妇,将其纳入GDM组,年龄(33.98±2.53)岁,年龄范围为22~47岁。另选取同期在焦作市人民医院进行健康体检的89名孕妇,将其纳入健康组,年龄(33.91±2.54)岁,年龄范围为23~44岁。监测两组纳入者的IGF-1、AOPP、MCP-1、SOD水平,并比较两组的妊娠结局。结果GDM组的IGF-1[(107.47±10.81)μg/ml]、SOD[(55.67±7.19)U/ml]水平低于健康组[(129.01±10.87)μg/ml、(93.68±7.15)U/ml],而AOPP[(79.68±3.06)μmol/L]、MCP-1[(854.29±10.63)pg/ml]水平高于健康组[(29.57±3.03)μmol/L、(451.74±10.69)pg/ml],差异均有统计学意义(P<0.05)。GDM组不良妊娠结局发生率[39.3%(35/89)]高于健康组[5.6%(5/89)],差异有统计学意义(P<0.05)。GDM组中不良妊娠结局孕妇的IGF-1[(84.87±3.09)μg/ml]、SOD[(43.32±7.63)U/ml]水平低于正常妊娠结局孕妇[(114.29±3.06)μg/ml、(73.87±7.69)U/ml],而AOPP[(86.29±3.19)μmol/L]、MCP-1[(869.29±7.12)pg/ml]水平高于正常妊娠结局孕妇[(60.39±3.14)μmol/L、(523.16±7.15)pg/ml],差异有统计学意义(P<0.05)。IGF-1、AOPP、MCP-1、SOD水平联合预测GDM孕妇妊娠结局的价值最高。结论监测IGF-1、AOPP、MCP-1、SOD水平对GDM病情的观察有一定的指导意义,联合检测能提升预测GDM孕妇妊娠结局的价值。

晚期氧化蛋白产物与大鼠椎间盘增龄性改变的关系

目的研究大鼠在自然老化过程中椎间盘和血清中晚期氧化蛋白产物(AOPP)的变化。方法 60只SD大鼠分为青年组(3月龄)、成年组(9月龄)和老年组(22月龄),每组20只,通过番红O/固绿染色观察大鼠椎间盘的组织学变化情况。测定血清及椎间盘组织匀浆中AOPP的含量。结果各组椎间盘组织学均可见存在退变。3组60只大鼠椎间盘组织匀浆中AOPP的含量明显高于血清(t=6.66,P<0.01),两者具有相关性(r=0.66,P<0.01),血清及椎间盘组织中AOPP的含量随着年龄的增长而增加(F=19.65,P<0.01;F=42.04,P<0.01),血清中AOPP含量老年组和成年组均明显高于青年组(均P<0.01),椎间盘组织均浆中AOPP含量老年组和成年组均明显高于青年组(均P<0.01)。结论随着年龄的增长,椎间盘在老化的同时,AOPP的含量增加。AOPP与增龄性椎间盘变化存在重要关系。

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者晚期氧化蛋白产物测定的临床意义

目的研究阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者蛋白氧化损伤指标晚期氧化蛋白产物(AOPP)的水平变化,探讨AOPP在OSAHS病情变化中的意义。方法检测47例OSAHS患者和48例健康对照组血浆中AOPP、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的水平。结果 (1)与健康对照组相比,OSAHS患者血浆AOPP、MDA水平明显升高(P<0.01),血浆SOD、GSH-PX水平显著降低(P<0.01)。OSAHS患者按病情轻重分为轻度OSAHS组、中度OSAHS组和重度OSAHS组,各组间血浆AOPP、MDA、SOD和GSH-PX水平的差异均有统计学意义(P均<0.01),其中AOPP和MDA随着病情的加重明显升高,SOD和GSH-PX水平随病情的加重显著降低。(2)AOPP水平与MDA水平呈正相关,与SOD和GSH-PX水平呈负相关;AOPP和MDA水平与呼吸暂停低通气指数(AHI)、夜间最低血氧饱和度(LSaO2)呈正相关;SOD、GSH-PX水平与AHI、LSaO2呈负相关。结论 OSAHS患者随着病情的加重其体内氧化应激程度加重、蛋白氧化损伤程度增强,AOPP是反映OSAHS蛋白氧化损伤的早期敏感指标。

川芎嗪对过敏性紫癜小鼠血清IgA1异常糖基化与晚期氧化蛋白产物的影响

目的:探讨川芎嗪对过敏性紫癜小鼠血清IgA1异常糖基化与晚期氧化蛋白产物(AOPPs)水平的影响,阐明其治疗机理。方法:将50只KM小鼠分为正常组、模型组及川芎嗪低、中、高浓度组,每组10只。造模后,川芎嗪低、中、高浓度组腹腔注射盐酸川芎嗪剂量分别为10、20、40mg/(kg·d)。采用蚕豆凝集素亲和ELISA检测IgA1异常糖基化程度,紫外分光光度法检测血清丙二醛(MDA)含量及总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)及髓过氧化物酶(MPO)活力。采用分光光度法测定AOPPs含量。结果:与正常组比较,模型组小鼠IgA1异常糖基化程度、血清MDA、MPO与AOPPs含量水平显著升高,T-AOC与SOD表达水平显著下降;与模型组比较,川芎嗪低、中、高浓度组小鼠IgA1异常糖基化程度、血清MDA、MPO与AOPPs含量水平显著降低,T-AOC与SOD表达水平显著升高。IgA1异常糖基化程度与AOPPs含量水平呈正相关。结论:川芎嗪可通过降低AOPPs含量,缓解IgA1异常糖基化,抑制其氧化损伤,对过敏性紫癜起治疗作用。

血清晚期氧化蛋白产物、细胞间黏附分子1、白介素1β与糖尿病肾病的关系及辛伐他汀的干预研究

目的探讨血清晚期氧化蛋白产物(AOPP)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)、白介素1β(IL-1β)与糖尿病肾病(DN)的关系及辛伐他汀治疗DN的机制。方法 89例2型糖尿病患者依据尿微量清蛋白排泄率(UAER)分为正常清蛋白尿(UAER<20μg/min)31例(正常组)、微量清蛋白尿(20μg/min≤UAER<200μg/min)28例(微量组)、显性清蛋白尿(UAER≥200μg/min)30例(显性组)及健康体检正常者30例(对照组),用夹心法酶联免疫吸附实验法检测各组中AOPP、ICAM-1、IL-1β的水平,微量组及显性组用辛伐他汀治疗。结果(1)3组糖尿病患者AOPP、ICAM-1、IL-1β水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。其中显性组AOPP、ICAM-1、IL-1β水平高于微量组、正常组(P<0.01);微量组AOPP、ICAM-1、IL-1β水平高于正常组(P<0.05)。血清AOPP、ICAM-1、IL-1β两两之间均呈正相关(P<0.01),AOPP、ICAM-1、IL-1β水平与UAER均呈正相关(P<0.01)。(2)微量组及显性组患者经辛伐他汀治疗前后的UAER、血清AOPP、ICAM-1、IL-1β水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论血清AOPP、ICAM-1、IL-1β可成为糖尿病肾微血管病变的早期预测因子,与UAER联合检测有助于早期诊断DN,对其进行早期干预在预防糖尿病肾微血管病变中有重要意义。辛伐他汀可通过抗氧化作用和抑制炎症反应,直接或间接抑制肾系膜细胞增生和系膜细胞外基质沉积,延缓DN的进展。

针对晚期氧化蛋白产物的抗体制备与应用

目的:制备特异性识别晚期氧化蛋白产物(Advanced oxidation protein products,AOPP)的多克隆抗体,为研究AOPP的致病机理及与临床病情相关性提供有效工具。方法:用次氯酸氧化家兔血清白蛋白以获得AOPP-RSA,以此为免疫原免疫家兔,亲和层析纯化免疫血清,ELISA鉴定多克隆抗体的效价及特异性,Western blot检测慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)患者血浆中AOPP,免疫组织化学方法检测肾组织中AOPP分布与定位。结果:获得效价达10-6的抗AOPP免疫血清,纯化抗体可特异地与不同种属来源的氧化修饰白蛋白结合,而与正常白蛋白及糖基化蛋白终产物无交叉反应。该抗体可识别人血浆中的AOPP,可特异地与大鼠CKD模型及各种炎症性CKD患者肾组织成份反应。结论:成功制备了可与不同种属AOPP结合的特异性多克隆抗体,并首次用于检测存在于CKD患者血浆、肾组织及模型动物肾组织中的AOPP,为深入研究AOPP的病理作用及其在组织定位提供了有效工具。