普通小麦–大赖草易位系T7BS·7Lr#1S和T2AS·2AL-7Lr#1S的分子细胞遗传学鉴定

大赖草7Lr#1S染色体上携带赤霉病抗性基因,将其导入普通小麦有助于增加赤霉病抗源多样性和选育抗赤霉病品种。利用染色体C-分带、荧光原位杂交和分子标记技术从普通小麦–大赖草7Lr#1单体异附加系的花粉辐射后代中,选育出易位系T7BS·7Lr#1S(NAU639)和T2AS·2AL-7Lr#1S(NAU640)。经连续3年大田、温室赤霉病接种鉴定,这2个易位系的赤霉病抗性均显著高于感病亲本中国春、感病对照绵阳8545和石麦4185,为赤霉病抗病育种提供了新的种质资源。

普通小麦–大赖草易位系T5AS-7LrL·7LrS分子细胞遗传学鉴定

大赖草对赤霉病具有较好的抗性,将大赖草赤霉病抗性基因转入普通小麦,对拓宽小麦赤霉病抗性基础有重要意义。本研究在获得抗赤霉病普通小麦–大赖草异附加系基础上,采用^(60)Co-γ射线(1200Rad,剂量率100Rad min^(-1))处理小麦–大赖草二体附加系DA7Lr,并用处理后的花粉授给去雄的普通小麦中国春,对其M_1代种子根尖细胞有丝分裂中期染色体进行GISH分析,获得1株具有一条普通小麦–大赖草易位染色体的植株,对其自交后代中具有2条易位染色体植株的花粉母细胞减数分裂中期I观察发现,2条易位染色体形成了稳定的环状二价体,表明该植株为纯合体。利用顺序GISH–双色FISH分析,结合C-分带、小麦D组专化探针Oligo-pAs1-2和B组专化探针Oligo-pSc119.2-2,进一步鉴定出该易位系为T5AS-7LrL·7LrS,同时筛选出可追踪该易位系的3个EST-STS分子标记,即BE591127、BQ168298和BE591737。该易位系的育成也为小麦赤霉病遗改良提供了新种质。

一个普通小麦-大赖草易位系T01的选育与鉴定

将抗赤霉病的普通小麦 -大赖草 Lr.2染色体单体异附加系花粉经过 60 Co- γ射线处理 ,然后给感赤霉病的普通小麦品种“扬麦 5号”授粉 ,杂交后代连续 2年进行赤霉病抗性单株接种鉴定 ,从中选育出一个普通小麦 -大赖草异易位系。经过染色体荧光原位杂交和 Giemsa C-分带鉴定 ,易位发生在普通小麦 4 B染色体长臂和大赖草第 2条染色体 ( Lr.2 )的短臂之间 ,易位断点在 4 B染色体 C-带带型的 L 2 .2区 ,在 FL0 .4 2和 FL0 .61二条带纹之间 ,为 T4 BS.4 BL- L r.2 S易位染色体 ,含该易位染色体的个体称为 T0

普通小麦-大赖草易位系NAU601和NAU618的选育及双端二体测交分析

利用根尖体细胞有丝分裂中期染色体GiemsaC 分带和荧光原位杂交从普通小麦 大赖草Lr.2、Lr.7异附加系辐射后代中选育出 2个纯合易位系 :(1)易位系NAU6 18(MS14 2 3) ,2n =4 4 ,易位染色体由大赖草Lr.7染色体的大部分 (约 5 / 6 ,包括着丝粒 )及小麦染色体 1A短臂的一部分 (近端约 1/ 3)组成 ,外源染色体片段的长度约占易位染色体总长度的 4 / 5 ;(2 )易位系NAU6 0 1(MS10 1 4 ) ,2n =4 2 ,易位染色体由小麦染色体 4B的整个短臂和 4B长臂近着丝粒部分 (1/ 3)及大赖草Lr.2短臂的绝大部分组成 ,外源染色体片段占易位染色体长臂的 1/ 2。对易位系进行的双端二体测交分析证实易位所涉及的小麦染色体分别为 1A和 4B。连续 3年单花滴注法进行的田间赤霉病抗性接种鉴定结果表明 ,普通小麦 大赖草异源易位系NAU6 18(MS14 2 3)对赤霉病的抗性与抗病对照品种苏麦 3号相仿 ,易位系NAU6 0 1(MS10 1 4 )对赤霉病抗性低于苏麦 3号 。

普通小麦大赖草易位系T3AS·3AL-7Lr#1S的分子细胞遗传学鉴定

大赖草对赤霉病具有较好的抗性,将大赖草赤霉病抗性基因转入普通小麦,对拓宽小麦赤霉病抗性基础有重要意义。本研究在获得抗赤霉病普通小麦-大赖草异附加系基础上,采用1 200 R ^(60)Co-γ射线处理小麦-大赖草二体附加系DA7Lr花粉,授予已去雄的普通小麦中国春,对其后代(M_1)种子根尖细胞有丝分裂中期染色体进行GISH分析,获得了1株具有1条普通小麦-大赖草易位染色体的植株,让其自交,对自交后代中具有2条易位染色体植株的花粉母细胞减数分裂中期Ⅰ进行观察,发现2条易位染色体形成了稳定的环状二价体,表明该植株为纯合体。利用顺序GISH-双色FISH分析,结合C-分带、小麦D基因组专化探针Oligo-pAs1-2和B基因组专化探针Oligo-pSc119.2-2,进一步鉴定出该普通小麦-大赖草易位系为T3AS·3AL-7Lr#1S,且筛选出了可追踪该易位系的3个EST-STS分子标记BE591127、BQ168298和BE591737。该易位系的育成为小麦赤霉病遗传改良提供了新种质。

普通小麦-大赖草-簇毛麦异附加、易位系的选育和鉴定

利用根尖细胞 (RTC)有丝分裂中期染色体和花粉母细胞减数分裂中期Ⅰ (PMCMⅠ )染色体C分带和以生物素标记的簇毛麦基因组DNA及以地高辛标记的大赖草基因组DNA为探针的双色荧光原位杂交 (bi_colorFISH) ,从DALr.7×T6VS/ 6AL (93G5 1_4×P6 4)F2 和F3 群体中筛选出 3株普通小麦 (TriticumaestivumL .)_大赖草 (Leymusracemosus (Lam .)Tzvel.)Lr .7二体附加、普通小麦_簇毛麦 (Haynaldiavillosa (L .)Schur) 6VS/ 6AL易位系 ;从DALr .14×T6VS/ 6AL (94G15×P6 4)F2 和F3 群体中选出 8株普通小麦_大赖草Lr.14二体附加、普通小麦_簇毛麦 6VS/ 6AL易位系。通过温室白粉病抗性鉴定和单花滴注赤霉病抗性鉴定 ,结果表明 :所选育的普通小麦_大赖草_簇毛麦异附加、易位系对白粉病表现免疫 ,对赤霉病有较高抗性。

普通小麦-大赖草T4BS.4BL-Lr.2S易位系的选育与鉴定

普通小麦－大赖草Ｔ４ＢＳ．４ＢＬＬｒ．２Ｓ易位系的选育与鉴定刘文轩①陈佩度刘大钧（南京农业大学细胞遗传所，南京２１００９５）本研究以感赤霉病小麦品种“扬麦５号”和普通小麦－大赖草抗赤霉病Ｌｒ２异附加系“９２Ｇ１６９”为主要试验材料。取（扬麦５号×...

小麦-大赖草易位系的RFLP分析

利用辐射、花药培养及杀配子基因效应已创制出一系列小麦 -大赖草易位系。为在其中找出可能的纯合易位系、明确易位所涉及的相关染色体以及易位断裂点的确切位置 ,利用了已被定位于小麦 7个部分同源群染色体长、短两臂上的 67个探针进行了RFLP分析 ,结果鉴定出 3个纯合的易位系 :T1BL·7Lr#1S、T4BS·4BL - 7Lr#1S和T6AL·7Lr#1S。其中 ,易位系T1BL·7Lr #1S和T6AL·7Lr #1S中染色体 7Lr #1的断裂点位于标记MWG80 8和标记ABG476.1之间 ,而 1B和 6A染色体上的断裂点都在着丝粒附近。易位系T4BS·4BL - 7Lr#1S中染色体 7L #1的断裂点位于标记BCD349和标记CDO5 95之间 ,4B染色体断裂点则位于标记CDO5 4 1和标记PSR1 64之间的长臂上。

小麦-大赖草易位系对赤霉病抗性的聚合

利用C-分带、FISH、SSR技术，从小麦-大赖草易位系T01～T14中筛选出8个纯合易位系。将不同易位系相互进行杂交，配制了11个杂交组合，并对各易位系及其杂种后代进行赤霉病抗性鉴定。结果表明，大赖草各易位系对赤霉病的抗性接近于苏麦3号，但不同地点及年份间差异较大。涉及不同大赖草染色体的易位系间的杂种F1与其抗性较高的易位系亲本相比抗性有所提高，但涉及大赖草Lr．7或5Lr#1同一条染色体的不同易住系间杂种F1的抗性仅位于两亲本之间。这表明位于不同大赖草染色体上的抗赤霉病基因具有累加效应，通过不同大赖草染色体易位系的聚合，可提高赤霉病的抗性。

小麦与多枝赖草耐盐纯合易位系的培育及GISH鉴定

以小麦与多枝赖草属间杂种花药培养获得的纯合后代纯系为材料,经过细胞学观察、田间选拔、抗性鉴定、综合农艺性状调查以及小区产量对比试验,从中初步筛选鉴定出具有外源耐盐性状、且农艺性状好的材料,再经分子标记(GISH)鉴定纯合易位系。表明花药培养可有效克服小麦远缘杂交后代的疯狂分离,并可促进染色体的结构变异,在短时间内获得大量具有丰富变异且可稳定遗传的后代,大大缩短了小麦远缘杂交导入外源基因的年限。

利用花粉辐射诱发普通小麦与大赖草染色体易位的研究

将小麦－大赖草Ｌｒ．２和Ｌｒ．１４染色体二体异附加系 ９４Ｇ１５和 ９４Ｇ４５即将成熟花粉经(６０)Ｃｏ－γ射线辐射处理，然后分别给普通小麦品种扬麦 ５号和绵阳１１授粉。辐射 Ｍ１的 ＰＭＣ ＭＩ期染色体经 Ｃｈｅｍｓａ Ｃ－分带和基因组ＤＮＡ荧光原位杂交处理后进行染色体配对分析，从 １７株 ＭＩ单株中筛选到５株ＰＭＣ ＭＩ期大赖草染色体与小麦配对的个体。根据这５株单株自交Ｍ１种子根尖细胞有丝分裂中期染色体Ｃ－分带和原位杂交检测，筛选并鉴定出了ＬＷ８（３）１和ＬＷ１１（３）１２个涉及大赖草Ｌｒ．１４染色体的小麦－大赖草易位系。还就花粉辐射在诱发小麦－亲缘物种染色体易位的可行性及有效性，以及所获２个易位系的利用价值进行了讨论。

利用减数分裂期成株电离辐射选育小麦-大赖草易位系的研究

采用６００１１２５Ｒ剂量的６０Ｃｏγ射线对小麦（ＴｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｖｕｍＬ．）大赖草（Ｌｅｙｍｕｓｒａｃｅｍｏｓｕｓ（Ｌａｍ．）Ｔｚｖｅｌ．）Ｌｒ．７单体异附加系在减数分裂期进行成株辐射处理，经过Ｍ１代根尖细胞有丝分裂中期（ＲＴＣ，Ｍ期）染色体ＧｉｅｍｓａＣ分带粗筛，Ｍ２代ＲＴＣＭ期染色体Ｃ分带和荧光原位杂交鉴定，选育出２个小麦大赖草Ｌｒ．７异易位系。其中Ｔ０２易位系是由Ｌｒ．７染色体绝大部分与一小片段小麦染色体接在一起组成的易位类型（ＴＬｒ．７·Ｌｒ．７Ｗ）；Ｔ０８的易位染色体由小麦４ＡＬ和大赖草Ｌｒ．７某臂组成。

将大赖草种质转移给普通小麦的研究──Ⅲ．抗赤霉病异附加系选育

大赖草比抗病品种“苏麦３号”更抗小麦赤霉病。经离体和活体赤霉病抗性单花滴注鉴定和有丝分裂中期及减数分裂中期Ⅰ的Ｃ－分带分析，选育出添加了１对第２染色体的抗赤霉病异附加系，其４４条染色体在ＭＩ配成０．１２—０．４０ⅠＩ＋２１．７０—２１．９３Ⅱ＋０．０１—０．０４Ⅳ。经Ｃ－分带和生物素标记的染色体组ＤＮＡ作探针的分子原位杂交分析证实添加的１对外源染色体在ＭＩ配成二价体，在细胞学上已基本稳定。

利用SSR鉴定普通小麦-多枝赖草二体异附加系Line24中外源染色体同源群的归属

用227对小麦微卫星引物进行PCR扩增,76对可在多枝赖草和耐黄矮病的普通小麦-多枝赖草二体异附加系Line24的小麦亲本中国春、丰抗13间检测到多态性。在这76对引物中,发现有4对引物能从Line24中扩增出和多枝赖草相同而与Line24其他小麦亲本不同的扩增带。进一步用Line24和普通小麦杂交得到的7个不同的单体异附加系进行验证,也得到同样的结果,说明这4对微卫星引物扩增出的特异带可以作为Line24中多枝赖草染色体的分子标记。根据这4对引物各自对应的微卫星标记位点在小麦染色体上的位置,说明Line24中附加的一对多枝赖草染色体是第3,5,6和7部分同源群多枝赖草染色体相互易位形成的。

辐照花粉促进普通小麦与窄颖赖草属间杂交的研究

通过研究小麦基因型、γ射线辐照剂量、授粉时期等对普通小麦与窄颖赖草（ Ｌｅｙｍ ｕｓ ａｎｇｕｓｔｕｓ） 杂交结实率的影响和不同幼胚抢救方法，首次较为完善地建立了运用核辐射促进普通小麦与窄颖赖草属间杂交的配套方法程序，即选用适宜小麦基因型Ｊ１１ 作母本，用适宜剂量（５ ～９ Ｇｙ） 的γ射线辐照窄颖赖草花粉，在适宜授粉时期（ 去雄后１ｄ 、散粉前２ ～３ｄ） 授粉；采用胚愈伤组织二步成苗法进行幼胚抢救。

将大赖草抗赤霉病基因导入普通小麦及抗赤霉病基因的染色体定位

将大赖草抗赤霉病基因导入普通小麦及抗赤霉病基因的染色体定位陈佩度孙文献刘文轩袁建华刘朝晖冯以高王苏玲周波刘大钧（南京农业大学作物细胞遗传农业部重点开放实验室，南京２１００９５）大赖草（ＬｅｙｍｕｓｒａｃｅｍｏｓｕｓＬａｍ．又名Ｅｌｙｍｕｓｇｉｇａｎｔ...

将大赖草种转移给普通小麦的研究Ⅵ.端体异附加系的选育与鉴定

利用根尖细胞有丝分裂中期染色体计数、花粉母细胞减数分裂中期Ｉ（ＰＭＣＭＩ）染色体构型分析以及Ｃ－分带，从普通小麦中国春与大赖草（ＬｅｙｍｕｓｒａｃｅｍｏｓｕｓＬａｍ．）杂种回交后代中，选育出两个端二体异附加系９５Ｇ０９．９５Ｇ１１和一个添加了一时大赖草第１４号染色体和另一对端体的双重异附加系９５Ｇ３０２（２ｎ＝４４＋２ｔ），它们的ＰＭＣＭＩ染色体配对构型分别为０．２１个单价体（其中０．１６个端体单价体）、１９．５７个环状二价体＋２．３２个棒状二价体（其中０．９２个由两端体配对构成），１．５２个单价体（１．４４个端体单价体）＋１８．０７个环状二价体＋３．１７个棒状二价体（０．２８个由两端体配对构成），１．０３个单价体（０．７２个端体单价体）＋１８．８９个环状二价体＋３．６１个棒状二价体（０．６４个由两端体配对构成）。运用单花滴注技术对这些材料在活体和离体条件下进行赤霉病人工接种鉴定，结果表明：９５Ｇ３０２的抗性与抗赤霉病对照品种苏麦３号相仿；９５Ｇ１１的抗性高于苏麦３号，明显高于亲本品种中国春。还对端体附加系的利用以及有效、快捷地转移赤霉病抗性基因进行了讨论。

新疆大赖草的性状鉴定及与普通小麦有性杂交

对普通小麦近缘野生种新疆大赖草 ( Leymus racemosus ( Lam.) Tzvel.)的农艺性状、品质性状和抗性进行的鉴定观察 ,以及与普通小麦 ( T.Aestivum L.)进行的杂交试验表明 ,新疆大赖草表现为茎粗抗倒 ,穗大 ,粒多 ,植株高大 ,叶片蜡质化 ;蛋白质含量为 1 8.3% ,1 7种氨基酸平均比普通小麦品种高出 2 8.96%。它对干旱、盐碱、寒冷、瘠薄等非生物胁迫具较高耐性 ,并对白粉病、锈病、根腐病、黄矮病、赤霉病等真菌、细菌和病毒病害抗性良好 ;

盐胁迫对普通小麦-大赖草异附加系种子萌发及幼苗生长的影响

以中国春和普通小麦-大赖草异附加系DA5Lr、DA7Lr、AddLr11″、AddLr2″DA7Lr#1S和DA5Lr#1L为试材,研究了NaCl对其种子萌发和幼苗生长的影响。结果表明,随着NaCl浓度的升高,它们的发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数、芽长、单株鲜、干重及胚芽鞘相对生长率均受到抑制,而DA7Lr材料受抑制程度明显低于其它材料。在100mmol/LNaCl胁迫下,DA7Lr的种子发芽率下降率、发芽势下降率、发芽指数下降率、活力指数下降率和芽长下降率分别为22.92%、16.28%、57.38%、69.39%和25.54%,分别低于中国春种子32.64%、49.78%、23.25%、4.31%和10.66%;100mmol/LNaCl胁迫48h,DA7Lr种子胚芽鞘相对生长率为0.267mm/h,比中国春提高117.1%;100mmol/LNaCl胁迫下,第9天调查结果,DA7Lr幼苗单株鲜、干重分别为76.4mg和10.6mg,分别比中国春增加7.1%和82.8%,表现出了较高的耐盐性。

将大赖草种质转移给普通小麦的研究Ⅳ.通过花药培养选育双重二体异附加系和代换-附加系

通过普通小麦“中国春”与抗赤霉病的亲缘物种大赖草杂种回交后代ＢＣ２Ｆ３和自交Ｆ４代的花药培养，获得了７２株花培植株，其中２８株结实。