一株普鲁兰酶产生菌的分离鉴定及发酵条件的优化

普鲁兰酶是一类淀粉分支酶,在淀粉加工等行业有着广泛的应用。利用平板涂布法从淀粉加工厂附近土壤中分离到一株产普鲁兰酶的细菌H4,通过形态学、生理生化试验及16S rDNA分类鉴定,确定该细菌为一株微小杆菌(Exiguobacterium sp.H4)。对该菌株培养基成分及产酶条件进行了优化,即2%土豆淀粉,1%蛋白胨,0.5%牛肉膏,0.1%KH2PO4,0.05%MgSO4.7H2O和0.0001%FeSO4,初始pH 7.0,发酵温度37℃,摇床转数200 r/min,发酵72 h后胞外产生普鲁兰酶的活力可达6.35 U/mL,比复筛的产量3.02 U/mL提高了110.2%。

统计学分析方法在普鲁兰发酵培养基优化中的应用

为了得到普鲁兰发酵的最佳培养基,在单因子实验的基础上,应用Plackett-Burman设计法对影响普鲁兰发酵的基本培养基组分中的关键因子进行了优选,并进一步采用响应面分析法(Response Surface Methodology,RSM)对影响普鲁兰产量的关键因素最佳水平范围作了深入的研究。实验结果表明:影响普鲁兰产量的关键因素为:葡萄糖、酵母粉和NaCl的浓度。通过RSM模型的拟合和推算得到在葡萄糖、酵母粉和NaCl质量浓度分别5.675、0.405、0.0815 g/dL时,此时模型预测发酵最佳的产量为32.071 44 g/L,验证值为32.16 g/L,预测值与验证值之间吻合较好,比原始培养基提高了约5倍。

普鲁兰酶产生茵的筛选、鉴定及发酵条件研究

从土壤中分离出一株产普鲁兰酶活性较高的菌株,初步鉴定为盐球菌(Halococcus sp.)。研究了其产酶条件:最适碳源为糯米淀粉,最适氮源为酵母膏和蛋白胨;最佳培养条件为:发酵初始pH 6.0,每100 mL培养基接种量为14 mL,500 mL摇瓶装液量150 mL。转速180 r/ min,温度30℃,发酵时间52 h。在优化条件下产酶量可达5.06 U/mL。