景芪愈溃胶囊对大鼠胃溃疡愈合质量及PGE_2、EGF的影响

目的:探讨景芪愈溃胶囊对胃溃疡愈合质量的影响及作用机制。方法:乙酸诱导制备胃溃疡模型制备成功后,分为空白组、模型组、雷尼替丁组及景芪愈溃胶囊高、中、低剂量组。给予灌胃治疗10d后,杀检全部试验大鼠,肉眼及镜下观察溃疡愈合情况、测量胃溃疡面积、采用ELISA法检测PGE2及EGF的含量。结果:①镜下观察景芪愈溃胶囊治疗组大鼠胃溃疡愈合情况良好,其中中剂量组效果最好。②各治疗组大鼠胃溃疡面积均较模型组明显缩小(P<0.01),以中、高剂量组最明显。③雷尼替丁组及中、高剂量组PGE2及EGF的含量均高于模型组(P<0.05),中剂量组最明显(P<0.01)。结论:景芪愈溃胶囊可提高胃溃疡愈合质量,其作用机制与增加胃内PGE2及血中EGF作为保护性因子有关。可用于治疗阳虚、气虚为主的胃溃疡。

景芪愈溃胶囊对脾胃虚寒型胃溃疡大鼠的作用及其机制

目的:研究景芪愈溃胶囊对脾胃虚寒型胃溃疡大鼠的影响并探讨其机制。方法:将70只SPF级Wistar大鼠按完全随机设计分为空白组和造模组,造模组采用大黄苦寒泻下法+饥饱失常喂养法+改良Okabe法综合因素构建脾胃虚寒型胃溃疡大鼠模型,造模成功后按随机数字表法分为模型组,景芪愈溃胶囊高、中、低剂量组,中药阳性对照(安胃疡胶囊)组,以及西药阳性对照(雷贝拉唑钠肠溶胶囊)组。空白组和模型组给予2 mL/d蒸馏水灌胃,其余各药物干预组分别给予对应剂量的胶囊内容物混悬液2 mL/d灌胃,持续干预14 d。使用游标卡尺测量胃溃疡最大长径并计算溃疡指数(UI);采用HE染色观察大鼠胃组织形态学变化;采用ELISA法检测大鼠胃组织中白细胞介素1(IL-1)、IL-4、IL-6和IL-13的含量;采用RT-qPCR法检测大鼠胃组织中血管细胞黏附因子1(VCAM-1)和细胞间黏附分子1(ICAM-1)的mRNA表达水平,并采用Western blot法检测大鼠胃组织中上述指标的蛋白相对表达水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠胃黏膜可见明显溃疡面,光镜下观察可见黏膜组织缺失和坏死,胃组织IL-1和IL-6含量明显升高,IL-4和IL-13含量明显降低,VCAM-1和ICAM-1的mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,景芪愈溃胶囊高剂量组大鼠的UI显著降低,光镜下观察胃溃疡的恢复情况最接近空白组,胃组织IL-1和IL-6含量显著降低,IL-4和IL-13含量显著升高,VCAM-1和ICAM-1的mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。结论:景芪愈溃胶囊可有效促进胃溃疡的愈合,其机制可能与抑制细胞黏附分子VCAM-1和ICAM-1表达进而减少促炎因子IL-1和IL-6含量,增加抗炎因子IL-4和IL-13含量,从而调节促炎因子与抗炎因子的平衡有关。

基于网络药理学及动物实验探讨景芪愈溃胶囊提高胃溃疡黏膜愈合质量的作用及机制

该研究通过网络药理学预测景芪愈溃胶囊治疗胃溃疡的活性成分及作用机制并采用动物实验进一步验证部分关键靶点及信号通路,探讨景芪愈溃胶囊对胃溃疡的治疗效果及机制。首先通过BATMAN-TCM(Bioinformatics Analysis Tool for Molecular Mechanism of Traditional Chinese Medicine)、TCMSP(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform)下载得到景芪愈溃胶囊活性成分及作用靶点,通过GeneCards和OMIM(Online Mendelian Inheritance in Man)以“gastric ulcer”为关键词检索获取疾病靶点,将成分靶点和疾病靶点取交集,获得景芪愈溃胶囊治疗胃溃疡的潜在靶点。随后利用STRING在线数据库及Cytoscape 3.7.2软件构建靶点的PPI(protein-protein interaction)网络图并分析,利用Matescape数据库进行KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)信号通路富集分析并利用Omicshare在线分析平台进行富集通路可视化处理。最后采用改良Okabe法构建胃溃疡大鼠模型,分别使用高、中、低剂量的景芪愈溃胶囊,安胃疡胶囊以及雷贝拉唑钠肠溶胶囊进行干预,肉眼观察溃疡情况,采用HE染色观察大鼠胃组织形态学变化,采用考马斯亮蓝法检测大鼠胃组织iNOS的含量,综合评价大鼠胃溃疡的溃疡愈合质量;采用RT-qPCR及Western blot检测大鼠胃组织中部分蛋白的基因及蛋白的表达水平,进一步验证部分关键靶点及信号通路。经数据库分析获得景芪愈溃胶囊活性成分206个,作用靶点535个,胃溃疡的作用靶点1 305个,药物和疾病交集靶点166个。PPI网络分析以及KEGG通路富集分析显示,多个关键靶蛋白IL6、TNF、MAPK1、MAPK3、MAPK14等,以及前20条关键信号通路中的NF-κB signaling pathway、IL-17 signaling pathway、leukocyte transendothelial migration与炎症关系密切;动物实验选取关键蛋白p38 MAPK以及经典的炎症信号通路NF-κB signaling pathway进行进一步动物实验验证,景芪愈溃胶囊高剂量组大鼠胃溃疡的恢复情况最接近空白组,胃组织iNOS含量显著降低,p38 MAPK基因和磷酸化、NF-κB p65基因和蛋白表达水平显著降低。提示景芪愈溃胶囊可抑制关键蛋白p38 MAPK的磷酸化和NF-κB信号通路中NF-κB p65的表达以发挥抗炎的作用,并可有效提高胃溃疡大鼠的溃疡愈合质量,验证了网络药理学的部分预测结果。