组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古霉素A对大鼠体外循环术后急性肺损伤的保护作用

目的探究曲古霉素A(TSA)对大鼠体外循环肺损伤的影响及作用机制。方法将30只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、CPB肺损伤组(I/R组)、CPB肺损伤+TSA给药50 ng/kg组(TSA1组)、CPB肺损伤+TSA给药100 ng/kg组(TSA2组)、CPB肺损伤+TSA给药150 ng/kg组(TSA3组),每组各6只。Sham组仅行血管穿刺置管,I/R组和TSA组构建CPB模型,TSA组还需术前使用曲古霉素A。体外循环前(T1)、开放肺门后10 min(T2)和实验结束时(T3)查血气,计算氧合指数(OI)、呼吸指数(RI)。取左肺组织HE染色后观察形态和病理损伤评分,ELISA法测肺组织匀浆和肺泡灌洗液中炎症因子含量,WB法测HDAC2、AC-H3及NF-kB P65表达。结果肺功能指标OI在T2、T3时刻表现为TSA组高于I/R组,TSA组中TSA3组最高,RI与之相反(P<0.05);病理损伤评分表现为TSA组低于I/R组、TSA组中TSA3组最低(P<0.05);肺组织匀浆中TNF-α、IL-1β含量以及BALF中TNF-α、总蛋白含量均表现为TSA组低于I/R组、TSA组中TSA3组最低(P<0.05);肺组织中HDAC2表达表现为TSA组低于I/R组、TSA组中TSA3组最低,AC-H3的表达与之相反(P<0.05);NF-κBp65在胞核内表现为TSA组低于I/R组、TSA组中TSA3组最低,胞质内与之相反(P<0.05)。结论TSA可减轻大鼠体外循环肺损伤,且存在浓度依赖性,其机制可能是增加了组蛋白乙酰化,降低NF-κBp65在细胞核内的表达,从而减轻肺部炎症反应。

曲古霉素A对肺腺癌细胞株NCI-H1299增殖的抑制作用及其机制

背景与目的:曲古霉素A(trichostatin A,TSA@是具有组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylases,HDAC@强效非竞争性抑制剂,对血液系统肿瘤和实质性肿瘤均有较强的生长抑制作用。本文观察HDACs抑制剂TSA对体外培养的肺腺癌NCI-H1299细胞株的增殖、凋亡和周期以及相关基因表达的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:MTT法检测不同浓度(0.1、0.2、0.4、2.0μmol/L@的TSA对人肺腺癌NCI-H1299细胞株体外增殖的影响,流式细胞术检测药物处理后细胞周期及凋亡率的变化;Western blot法检测细胞内组蛋白H4乙酰化水平的变化;Real-time PCR检测NCI-H1299细胞内p21、CyclinB1、Bcl-2和Bax的基因表达。结果:TSA能明显抑制NCI-H1299细胞的体外生长,其抑制作用呈明显的剂量和时间依赖性。TSA诱导后,流式细胞术检测结果显示细胞阻滞于G2/M期,细胞凋亡增加。TSA可明显提高NCI-H1299细胞内组蛋白H4的乙酰化水平,诱导p21和Bax的mRNA表达增加,同时抑制Bcl-2和CyclinB1表达。结论:TSA可通过诱导细胞凋亡及阻滞细胞周期而发挥体外抗肺腺癌细胞生长的作用,其机制可能与组蛋白乙酰化水平的提高以及调控相关基因p21、Bax、Bcl-2和CyclinB1的表达变化有关。

曲古霉素A增强抗肿瘤药物对膀胱癌T24细胞的杀伤作用

目的观察HDAC抑制剂曲古霉素A(TSA)和针对DNA的抗癌药物联用对膀胱癌T24细胞的杀伤作用。方法用MTT法测定TSA单用及分别与ADM、MMC和DDP联用对T24细胞的抑制率,用金氏公式法判断联合用药的效果。结果TSA分别与ADM、MMC、DDP联合用药对T24细胞的抑制率均随着浓度的增加而明显增加,TSA与MMC联用的协同作用最明显,而TSA与ADM和DDP在中低剂量下联用亦表现为协同作用。结论HDAC抑制剂TSA可明显增强针对DNA的抗癌药物对膀胱癌细胞的杀伤作用,有希望应用于晚期膀胱癌的化疗方案中。

曲古霉素A预处理的hUC-MSCs移植对小鼠脑损伤的神经修复作用

目的:探讨30 nmol/L曲古霉素A(TSA)预处理的人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)移植对脑损伤(TBI)小鼠的神经修复和促进作用。方法:利用颅脑打击器和立体定位仪制作中度脑损伤小鼠模型,并将造模成功的27只小鼠随机分为Veh组、MSCs组和TSA+MSCs组;术后3天,PI染色评估各组小鼠脑损伤周围的细胞坏死情况,术后第1、2、3、7、14、21和28天,采用神经功能缺损程度评分(NDS评分)和糖水偏好实验评估小鼠神经运动感觉和抑郁情况;术后第28天采用qRT-PCR检测组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)和神经元特异性相关基因(DCX、MAP2)的表达。结果:与Veh组相比,MSCs组和TSA+MSCs组小鼠脑损伤周围的坏死细胞数明显减少,其中TSA+MSCs组降低更为明显(P<0.001)。术后第1天,各组小鼠的NDS评分差异无统计学意义;从术后第3天开始,TSA+MSCs组小鼠NDS评分低于MSCs组和Veh组(P<0.001);术后第28天,与其他两组相比,TSA+MSCs组小鼠蔗糖偏嗜度增强、HDAC1表达量降低,MAP2、DCX的表达量增加(P<0.001)。结论:TSA预处理能够有效促进h UC-MSCs移植对TBI小鼠的神经修复。

曲古霉素A体外诱导膀胱癌细胞凋亡及细胞周期阻滞的机制探讨

目的:观察组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂曲古霉素A(TSA)对体外培养膀胱癌细胞生长情况及相关基因表达的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:MTT法检测不同浓度(0.05、0.1、0.2、0.4、0.8μmol/L)的TSA对人膀胱癌T24细胞生长的影响。透射电镜观察TSA(0.4μmol/L)诱导后膀胱癌细胞的形态学变化;流式细胞术检测处理后膀胱癌细胞周期分布及凋亡率的变化;Western印迹法检测处理后膀胱癌细胞组蛋白乙酰化水平的变化;FQ-PCR检测处理后膀胱癌细胞p21CIP1/WAF1c、yclin A和cyclin E mRNA的表达。结果:TSA体外能明显抑制T24细胞生长,且抑制作用呈明显的剂量、时间依赖性。TSA(0.4μmol/L)诱导后,透射电镜下可见大量具有凋亡形态特征的T24细胞;流式细胞术检测示细胞阻滞于G0/G1期,并且出现典型的亚二倍体(Sub-G1)峰;TSA可明显提高组蛋白乙酰化水平,并诱导p21CIP1/WAF1的mRNA表达和抑制cy-clin A的mRNA表达,而对cyclin E无明显作用。结论:TSA可通过诱导细胞凋亡及细胞周期阻滞而发挥体外抗膀胱癌作用,其作用机制可能涉及组蛋白乙酰化水平以及相关基因(p21CIP1/WAF1、cyclin A)表达的调控。

曲古霉素A促进ICR小鼠骨髓间充质干细胞体外分化为肝细胞

目的探讨曲古霉素A(trichostatin A,TSA)在ICR(Institute of Cancer Research,ICR)小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BM-MSCs)向肝细胞体外分化中的作用。方法分离培养正常小鼠mBMMSCs,流式细胞仪检测mBM-MSCs表面抗原,实时荧光定量PCR检测肝细胞特异性基因甲胎蛋白(!-fetoprotein,AFP)和白蛋白(albumin,ALB),生化分析仪测定尿素分泌量,高碘酸-希夫反应测定肝细胞合成与储存糖原能力;检测TSA处理前后mBM-MSCs增殖、细胞周期和染色质结构的变化,Western blot测定mBM-MSCs组蛋白3(Histone 3,H3)和组蛋白4(Histone 4,H4)乙酰化程度改变。结果分离所得mBM-MSCs细胞表面CD44、CD73、SCA-1呈阳性反应,部分细胞CD90、CD105、STRO-1呈阳性反应,CD11b和CD45呈阴性反应;与未添加TSA组比较,诱导7d后,TSA处理组中AFP明显增高(P<0.05),ALB和尿素分泌量开始增多,继续诱导14和21d后,TSA处理组中ALB分别为(0.52±0.08)和(0.92±0.08),呈明显升高(均P<0.05),尿素分泌量分别为(0.23±0.02)mmol/L和(0.36±0.03)mmol/L,也呈明显升高(均P<0.05),且细胞储存的糖原更加丰富,而AFP水平逐渐下降;经TSA处理后,TSA浓度越大对mBM-MSCs增殖的抑制效应越强,细胞处于G0/G1期的比例明显增加,细胞核中异染色质的状态由浓缩、密集变为散状、疏松;Western blot结果显示2.0mmol/L TSA处理后mBM-MSCs组蛋白H3和H4的乙酰化水平显著增加(均P<0.05)。结论 TSA能够阻断mBM-MSCs组蛋白H3和H4的去乙酰化,打破组蛋白乙酰化的平衡状态,解除转录抑制,从而促进转录,提高其向肝细胞分化的效率。

曲古霉素A对人胃癌细胞的抑制作用及其机制探讨

组蛋白去乙酰基酶抑制剂(HDACi)是一类新型抗肿瘤药物。曲古霉素A(TSA)是目前研究最为广泛的HDACi之一,已发现其对多种肿瘤细胞具有明显抑制作用,但关于TSA对胃癌作用的研究尚少。目的:观察TSA对人胃癌细胞增殖、凋亡、细胞周期以及相关基因表达的影响,探讨其抑制人胃癌细胞的可能作用机制。方法:以不同浓度TSA(0～1μmol/L)处理人胃癌细胞株AGS和HGC-27。CCK-8实验检测细胞增殖抑制情况,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,real time RT-PCR和蛋白质印迹法检测细胞凋亡、细胞周期相关基因mRNA和蛋白水平的表达。结果:TSA能剂量依赖性地抑制AGS、HGC-27细胞增殖(P=0.000),对两者的半数致死浓度分别约为0.25μmol/L和0.5μmol/L。TSA能诱导AGS、HGC-27细胞发生G0/G1期和G2/M期阻滞,以G0/G1期阻滞更为明显。TSA对AGS细胞的诱导凋亡作用强于HGC-27细胞(P<0.05)。TSA尚能上调p21、p53、Bax mRNA和蛋白表达,下调Bcl-2、CDK2、cyclin D1 mRNA和蛋白表达,作用均呈时间依赖性(P<0.05)。结论:TSA抑制人胃癌细胞增殖、诱导细胞凋亡的作用可能是通过调节细胞凋亡、细胞周期相关分子、激活多种肿瘤相关信号通路实现的。

曲古霉素A(TSA)对人宫颈癌细胞的杀伤作用

研究探讨了曲古霉素A(TSA)对人宫颈癌Hela细胞的杀伤作用。通过TSA处理Hela细胞,利用MTT法、乳酸脱氢酶(LDH)和活化氧(ROS)的检测法,以及荧光定量PCR方法等进行研究。结果表明:TSA抑制了细胞的增殖,增加了细胞内LDH和ROS的产生,促进了凋亡相关基因的表达,诱导细胞凋亡。

曲古霉素A对脂多糖诱导的肺泡巨噬细胞炎症反应的影响

目的:探讨曲古霉素A(TSA)对脂多糖(LPS)诱导肺泡巨噬细胞炎症反应的影响。方法:体外培养大鼠肺泡巨噬细胞株NR8383,分为4组:磷酸盐缓冲液(PBS)对照组、LPS(1μg/mL)处理组、TSA(1 ng/mL)预处理30 min+LPS(1μg/mL)处理组、TSA(10 ng/mL)预处理30 min+LPS(1μg/mL)处理组。各组细胞处理后继续培养6 h,ELISA法检测细胞培养上清液肿瘤坏死因子α(TNF-α)蛋白水平,实时定量PCR法检测细胞TNF-αmRNA表达。结果:与PBS对照组比较,LPS处理组细胞培养上清液TNF-α蛋白水平明显升高,细胞TNF-αmRNA的表达量升高(8.68±0.56)倍(均P<0.05)。与LPS处理组比较,TSA(1 ng/mL和10 ng/mL)处理组细胞培养上清液TNF-α蛋白水平和细胞TNF-αmRNA的表达量均明显降低(均P<0.05)。结论:TSA预处理可抑制LPS诱导的大鼠肺泡巨噬细胞炎症反应。

曲古霉素A对SGC7901/ADR细胞周期的调控作用

目的观察组蛋白去乙酰酶抑制剂曲古霉素A(TSA)对胃癌耐药细胞生长及相关基因表达的影响,并对其作用机制进行探讨。方法 MTT法检测不同浓度的TSA对胃癌耐药细胞SGC7901/ADR生长的影响。普通显微镜下观察TSA作用后细胞的形态学变化;流式细胞仪检测TSA作用后细胞周期的变化;RT-PCR法检测TSA作用后P21表达的变化。结果 TSA能明显抑制胃癌耐药细胞SGC7901/ADR的生长,且抑制作用呈明显的剂量依赖关系,显微镜下可观察到TSA作用后细胞生长受到明显抑制,流式细胞仪检测到胃癌耐药细胞周期停滞于G0/G1期,RT-PCR法检测到TSA作用后P21表达明显增加,考虑与细胞周期阻滞有关。结论 TSA可以通过上调P21基因的表达来实现对SGC7901/ADR细胞的生长抑制作用。

曲古霉素A对人宫颈癌Hela细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨组蛋白乙酰化酶抑制剂曲古霉素A(TSA)对人宫颈癌Hela细胞增殖和调亡的作用及其机制。方法:不同浓度的TSA处理Hela细胞,应用Western blot法检测细胞内组蛋白H4(Ac-H4)乙酰化水平,荧光定量PCR方法检测p21mRNA表达,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:随着TSA浓度增加,人宫颈癌Hela细胞内Ac-H4乙酰化水平增加(P<0.05),p21mRNA表达增加(P<0.05),细胞增值率减少(P<0.05),细胞凋亡率增加(P<0.05)。结论:TSA通过提高组蛋白乙酰化水平,增加p21基因表达,抑制人宫颈癌Hela细胞的增殖和诱导细胞凋亡,且呈浓度依赖性。

曲古霉素A对小鼠骨髓源性树突状细胞表型和功能的影响

目的未成熟树突状细胞(immature dendritic cells,imDCs)诱导免疫耐受的作用受到越来越多的重视,如何保持其未成熟状态成为研究热点。文中旨在研究曲古霉素A(Trichostatin A,TSA)对小鼠骨髓源性树突状细胞(dendritic cells,DCs)表型和功能的影响。方法取小鼠骨髓单核细胞,在含重组小鼠粒/巨细胞刺激因子(recombinant mouse granulocytemacrophage colony-stimulating factor,rmGM-CSF)和重组小鼠白介素-4(recombinant mouse interleukin 4,rmIL-4)完全培养基中诱导其向DCs分化,并与第6天收集疏松贴壁细胞分为空白组(不另外添加任何药物)和TAS组(加入100ng/ml)组,分别继续培养48 h。流式细胞仪测定各组DCs表面共刺激因子的表达,ELISA试剂盒检测IL-12p40细胞因子分泌的变化,混合淋巴细胞增殖实验检测不同组DCs对T淋巴细胞增殖能力的影响。结果与空白组比较,TSA显著下调DCs表面共刺激因子的表达和减少细胞因子IL-12p40的分泌,且其诱导的DCs显著降低同种异基因T淋巴细胞增殖能力。结论 TSA能够抑制DCs的成熟和诱导imDCs的产生。

曲古霉素A对胶质瘤细胞系U251增殖与侵袭的调节作用

目的:探讨曲古霉素A(Trichostatin A,TSA)处理对胶质瘤细胞系U251增殖和侵袭的调节作用。方法:分别将浓度为200ng/ml、400ng/ml和800ng/ml的TSA加入胶质瘤细胞系U251中。Western blot法检测乙酰化组蛋白H3和H4表达。MTT法检测不同浓度处理组中细胞的增殖能力。Transwell细胞侵袭实验检测不同浓度处理组和对照组中细胞侵袭能力。结果:TSA处理后的U251细胞中乙酰化组蛋白H3和H4表达明显上调(P<0.01)。MTT结果显示U251细胞经TSA处理后的增殖能力明显减弱(P<0.01),且具有剂量依赖性。Transwell细胞侵袭实验显示TSA处理后,U251细胞的侵袭细胞数明显减少(P<0.01),也具有剂量依赖性。结论:TSA可以比较有效地抑制胶质瘤细胞系U251的增殖和侵袭能力,为临床治疗胶质瘤提供了新思路。

Ku70乙酰化修饰介导曲古霉素A(TSA)促结肠癌细胞凋亡的作用机制研究

目的:探讨Ku70乙酰化修饰介导曲古霉素A(TSA)促结肠癌细胞凋亡的作用和机制。方法:选取结肠癌HCT116细胞和SW620细胞,体外培养并采用浓度梯度TSA处理。MTT法观察TSA对细胞的IC 50和活力的影响;Western blot和免疫荧光染色观察TSA对结肠癌HCT116细胞和SW620细胞中Ku70、acetyl-Ku70蛋白水平及胞内分布的影响;流式细胞术检测TSA对结肠癌HCT116细胞和SW620细胞凋亡的影响;Western blot检测TSA对结肠癌HCT116细胞和SW620细胞中凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax和Bcl-2表达的影响。结果:MTT结果显示TSA可浓度依赖性抑制结肠癌HCT116细胞和SW620细胞活力且其IC 50值分别为1.023μmol/L和1.076μmol/L(P<0.05);Western blot和免疫荧光染色结果显示TSA可显著上调结肠癌HCT116细胞和SW620细胞中acetyl-Ku70的蛋白水平并促进其核转入(P<0.05);流式细胞术结果表明TSA可促进结肠癌HCT116细胞和SW620细胞凋亡(P<0.05);此外,Western blot结果显示TSA可明显上调结肠癌HCT116细胞和SW620细胞中凋亡蛋白Caspase-3和Bax的表达,下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达(P<0.05)。结论:结肠癌HCT116细胞和SW620细胞中,TSA可能通过增强Ku70乙酰化并促进其核转入,发挥促凋亡作用,为以Ku70翻译后修饰调控为靶点的肿瘤治疗提供新策略和理论依据。

曲古霉素A对肺腺癌细胞NCI-H1299增殖抑制作用及机制

目的观察组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase)抑制剂曲古霉素A(trichostatin A,TSA)对体外培养肺腺癌NCI-H1299细胞生长情况及相关基因表达的影响,并探讨其可能的作用机制。方法MTT法检测不同浓度(0.1、0.2、0.4、2.0μmol/L)的TSA对人肺腺癌NCI-H1299生长的影响,流式细胞术检测处理后NCI-H1299细胞周期分布及凋亡率的变化;Western印迹法检测处理后人肺腺癌NCI-H1299组蛋白H4乙酰化水平的变化;Real-TimePCR检测处理后人肺腺癌NCI-H1299、p21、cyclin B1、Bcl-2和Bax的表达。结果TSA体外能明显抑制NCI-H1299细胞生长,且抑制作用呈明显的剂量、时间依赖性。0.4μmol/L TSA诱导后,流式细胞术检测示细胞阻滞于G2/M期;TSA可明显提高NCI-H1299组蛋白乙酰化水平,并诱导p21和Bax的mRNA表达和抑制Bcl-2和cyclin B1的mRNA表达。结论TSA可通过诱导细胞凋亡及细胞周期阻滞而发挥体外抗肺腺癌细胞株作用,其作用机制可能涉及组蛋白乙酰化水平以及诱导调控相关基因p21、Bax、Bcl-2和cyclin B1。

曲古霉素A对人肾细胞癌Caki-1细胞体外生长的影响

目的:观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古霉素A(trichostatin A,TSA)体外对人肾细胞癌Caki-1细胞生长情况、乙酰化组蛋白H3的水平以及基因P21cip1/waf1mRNA表达的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测TSA对Caki-1细胞生长的影响;蛋白质印迹法检测TSA处理后Caki-1细胞乙酰化组蛋白H3水平的变化;实时荧光定量PCR检测TSA处理后Caki-1细胞P21cip1/waf1mRNA表达水平的变化。结果:TSA对Caki-1细胞生长有显著的抑制作用,呈明显的剂量、时间依赖性。TSA能明显提高Caki-1细胞乙酰化组蛋白H3的水平,促进P21cip1/waf1mRNA表达。结论:TSA对人肾细胞癌Caki-1细胞生长有抑制作用,机制可能与其提高Caki-1细胞乙酰化组蛋白H3的水平,促进P21cip1/waf1的表达有关。

曲古霉素A对CD14^+单核细胞活化及TLR4信号通路的影响

目的:研究曲古霉素A(trichostatin A,TSA)对CD14^+单核细胞活化状态及Toll样受体4(TLR4)炎性信号通路的影响及其具体机制。方法:分离健康人外周血CD14^+单核细胞,用20nmol/L浓度TSA孵育24 h后收集细胞,RT-q PCR方法检测TLR4及下游炎症因子基因mRNA表达水平,以流式细胞分析检测细胞表面TLR4蛋白表达量,以Ch IP-q PCR方法检测TLR4基因启动子区组蛋白H3乙酰化水平变化,以Transwell法检测单核细胞趋化能力,以细胞黏附力实验检测单核细胞的黏附能力。结果:TSA刺激能够增加CD14^+单核细胞的趋化和黏附能力,上调CD14^+单核细胞中TLR4及下游炎症因子TNF-α、MCP-1和IL-6的表达,提高TLR4基因启动子区组蛋白H3乙酰化水平。结论:TSA能够诱导CD14^+单核细胞活化,提高TLR4启动子区组蛋白乙酰化修饰水平,促进TLR4信号通路基因过度表达。

曲古霉素A对脊髓损伤小鼠的神经保护作用

目的:探讨曲古霉素A(TSA)对脊髓损伤(SCI)小鼠的神经保护作用。方法:采用改良Allen's击打法制备SCI小鼠模型,随机分为TSA组和对照组(Vehicle组,Veh组)(n=18),分别给予1 mg/kg TSA或等量生理盐水。术后第1、3、7、14、21、28天,BMS评分检测小鼠后肢运动功能。术后第3天,采用PI染色检测损伤附近区域坏死细胞数量,HEt染色检测活性氧(ROS)的累积;心脏取血,采用ELISA法检测炎症因子TNF-α和IL-10的表达。术后第28天,qRT-PCR检测神经营养因子BDNF和NT3的表达量,免疫荧光染色检测MBP和Neu N的表达,记录白质损伤面积和进行神经元计数。结果:与Veh组相比,TSA组小鼠后肢运动功能恢复较好(P<0.05),小鼠损伤部位坏死细胞数减少,ROS含量减少,IL-10表达量升高而TNF-α表达量降低,BDNF和NT3表达量升高,损伤部位白质损伤面积显著降低,同时神经元数量增多(P均<0.05)。结论:TSA对SCI小鼠有神经保护的作用。

3-甲基腺嘌呤联合曲古霉素A抑制三阴性乳腺癌细胞生长

目的:探讨自噬特异性抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)联合组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古霉素A(TSA)对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231生长的影响及其可能的分子机制。方法:MTT法检测TSA对MDA-MB-231细胞活力的抑制作用;划痕实验检测细胞迁移能力的变化;Western blot检测细胞自噬相关蛋白的变化;MTT法检测3-MA联合TSA对细胞活力的影响。结果:TSA可有效抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的生长,并呈剂量和时间依赖性;TSA抑制MDA-MB-231细胞的迁移能力,并诱导细胞发生自噬;3-MA可有效抑制TSA诱导的乳腺癌细胞自噬,并进一步抑制细胞活力,差异有统计学意义。结论:3-MA可明显增加TSA对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231的生长抑制作用。

曲古霉素A和枸杞多糖联合应用对人食管癌Eca-109细胞凋亡的影响

目的探讨曲古霉素A(TSA)和枸杞多糖(LBP)联合应用对食管癌Eca-109细胞凋亡的影响。方法分别用二甲基亚砜(DMSO,对照组)、1.0μmol/L TSA、1.0μmol/L TSA+10 mg/L枸杞多糖处理Eca-109细胞48h,用Annexin V-FITC和PI双染色,流式细胞仪检测3组细胞的凋亡率,Western-Blot检测3组细胞中Bax以及Bcl-2表达的变化。结果对照组、1.0μmol/L TSA组、1.0μmol/L TSA+10 mg/L LBP组作用48h后,Eca-109细胞凋亡率分别为(2.16±0.27)%、(7.48±1.01)%、(16.34±1.18)%;Bax蛋白表达水平分别为(0.46±0.23)、(1.28±0.20)、(1.94±0.32);Bcl-2蛋白表达水平分别为(1.18±0.12)、(0.42±0.03)、(0.25±0.04)。3组间3个指标差异均有统计学意义(P<0.05)与对照组相比,TSA组和TSA+LBP组的细胞凋亡率和Bax表达增加,而Bcl-2表达下降。结论 LBP可以增强曲古霉素A对食管癌细胞的凋亡作用。