RUNX3调控胃癌细胞对曲妥珠单抗耐药的机制:基于超效高液相色谱-四极杆/静电场轨道阱质谱的代谢组学分析

目的探讨Runt相关转录因子3(RUNX3)在胃癌曲妥珠耐药细胞中的代谢调控作用,阐释敲除RUNX3逆转耐药的代谢机制。方法基于超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱质谱联用技术,对曲妥珠耐药胃癌细胞(NCI N87R)及RUNX3敲除细胞(NCI N87R/RUNX3)进行代谢组分析;采用多变量结合单变量分析方法及二级质谱离子匹配打分筛选差异变量;使用MetaboAnalyst 5.0数据库进行通路富集分析;基于OmicsNet数据库构建差异代谢物-基因调控关系;通过试剂盒检测还原性/氧化性谷胱甘肽(GSH/GSSG)及还原性/氧化性辅酶II(NADPH/NADP)的比值。结果RUNX3敲除前后NCI N87R细胞的代谢特征显著改变,鉴定到81个对分类有显著贡献的差异代谢物,其中43个代谢物在NCI N87R/RUNX3细胞中增加,38个代谢物减少。RUNX3敲除导致耐药细胞8条通路显著改变(P<0.01),包括谷氨酰胺、糖酵解、甘油磷脂酸-烟酰胺及谷胱甘肽代谢等。试剂盒检测结果显示,NCI N87R/RUNX3胞内GSH/GSSG及NADPH/NADP降低(P<0.01);差异代谢物-基因网络揭示了代谢分子与基因之间的调控关系。结论RUNX3通过调控能量代谢及氧化-还原稳态逆转胃癌细胞对曲妥珠单抗耐药,提示RUNX3可能是胃癌曲妥珠单抗耐药的潜在治疗靶标。