黑曲霉孢子灭活前后红外消光特性

黑曲霉孢子是生物气溶胶的重要组成部分，质量消光系数是研究黑曲霉孢子电磁衰减特性的重要参数。采用压片法测量了灭活前后黑曲霉孢子2.5-15μm波段的反射光谱，并利用Krames-Kronig（K- K）关系计算了黑曲霉孢子红外波段的复折射率。基于Mie散射理论求出了灭活前后黑曲霉孢子红外波段的质量消光系数，并对结果进行了分析和讨论。分析结果表明：3-5μm波段，灭活后平均质量消光系数降低了4.6%，8-14μm波段，灭活后平均质量消光系数降低了89.5%，由此可知，保持活性对于提高黑曲霉孢子的电磁衰减能力具有重要的意义。

乳杆菌抑制黄曲霉孢子萌发的研究

为探讨乳杆菌抑制黄曲霉孢子萌发的可能机制 ,在乳杆菌培养液、乳杆菌培养液的上清液和乳杆菌的细胞悬浮液中接种一定量的黄曲霉孢子 ,每隔 4h分别取少量液体在PDA平板上进行霉菌计数 ,直到 30h。 2 8℃培养 72h后计数萌发的霉菌孢子。结果表明 :只有乳杆菌培养液组对黄曲霉孢子萌发有显著的抑制作用 ,说明乳杆菌抑制黄曲霉孢子萌发的可能机制是低pH值 ,乳杆菌的代谢产物与微生物间竞争多因素协同作用的结果。

黑曲霉孢子红外波段消光性能研究

采用压片法对黑曲霉孢子2.5-15μm波段的反射光谱进行了测量。针对采集的光谱数据，利用Krames-Kronig（K-K）关系对黑曲霉孢子2.5-15μm波段的复折射率进行了计算。然后,根据Mie散射理论求出了2.5-15μm波段黑曲霉孢子质量消光系数，并对结果进行了分析和讨论。分析结果表明，在粒径r=1.2μm时，黑曲霉孢子在2.5-15μm波段的平均质量消光系数为0.68 m2/g，随着粒径的增大，平均质量消光系数单调减小；与常见无机物相比，黑曲霉孢子在2.5-15μm波段具有较好的消光性能，而且在保证一定消光性能的情况下，黑曲霉孢子的粒径尺寸要求相对较宽。

柠檬醛致黄曲霉孢子丧失萌发力的机制

通过由倒置显微镜、衍射光栅和线阵光电偶合器件CCD(chargecoupleddevice)等构成的显微多道分光光度系统及由计算机DEPHI编程工具编制的单细胞凝胶电泳SCGE(single cellgelelectro phoresis)图像分析系统 ,摄取荧光显微镜所呈图像 ,再由图像捕捉卡将CCD产生的图像信号送入计算机 ,将柠檬醛对黄曲霉质膜和核DNA损伤的图像进行显示存储和分析处理 ,测定彗星长度、荧光强度、矩类及头尾DNA含量比等彗星参数指标 .结果发现Olive尾矩、尾长、尾分布矩等彗星尾参数指标与柠檬醛致黄曲霉损伤浓度呈正相关性 ,当致损浓度达到 1 5mg L以上时 ,DNA损伤为致死性损伤 ,不能被细胞内修复系统所修复 .揭示柠檬醛通过损伤质膜而进入细胞 ,对DNA产生不可逆损伤 ,使孢子失去萌发力的机制 .实现将DNA损伤的生化定性检测推进到数值化研究范围 ,为柠檬醛的开发应用提供了重要理论依据 .与国内外同类技术相比 ,本检测观察系统还具有高灵敏度、快速、无扰、多光谱显微测定之特点 .

黑曲霉孢子和菌丝吸附^(241)Am的研究

作者研究了黑曲霉孢子和菌丝吸附2 4 1Am的可行性及各种反应条件对吸附的影响 .结果表明 :用黑曲霉孢子和菌丝处理2 4 1Am ,在起始浓度C0 为 5 .6～ 111MBq/L的范围内 ,吸附量W分别为 7.2～ 142 .4MBq/ g和 5 .2～ 10 6 .4MBq/ g(均为干重 ) ,两者的平均吸附率均高达96 % ,说明用黑曲霉孢子和菌丝处理2 4 1Am是可行的 .吸附反应在 1h左右达到平衡 ,反应温度15～ 4 5℃ ,最适吸附酸度分别为 pH 1～ 3和 pH 2～ 3,2 4 1Am浓度与吸附量均呈指数关系 ,符合Freundlich经验公式 .在高于2 4 1Am 2 0 0 0多倍的金、银存在下 ,对黑曲霉孢子和菌丝吸附2 4 1Am无明显影响 .黑曲霉孢子和菌丝对2 4

光敏化作用对曲霉孢子失活的影响

通过曲霉孢子与光敏剂的孵育、光照、平板菌落计数、计算孢子失活率实验,结合荧光显微镜观察孢子产生的荧光,探讨光敏化作用对曲霉孢子的影响。结果表明,孵育时间对孢子失活率影响不大,光敏剂浓度>100μg/mL且光照时间为60min时孢子失活率能达到80%以上,并且黑曲霉孢子对光敏化作用比黄曲霉孢子更敏感,无光照时2种曲霉孢子对此方法都不敏感。因此,光敏化作用对2种曲霉孢子有明显的抑制作用。

高温高压条件下黑曲霉孢子的失活参数计算

高温高压灭菌是黑曲霉孢子灭活的主要方式。通过研究黑曲霉孢子在高温高压过程中的死亡率,计算黑曲霉孢子的比热死速率常数和活化能。结果表明,黑曲霉孢子在97、115、121℃时的比热死速率常数分别为0.02839、0.04159、0.06592/min,热死的活化能为38324.4794J/mol。为利用高温高压灭活大量曲霉孢子提供了理论基础。

黑曲霉孢子对水中铅吸附的响应面优化及机制

采用Box-Behnken响应面优化黑曲霉孢子对水中Pb2+的吸附工艺,获得最佳吸附条件.试验结果表明:黑曲霉孢子吸附重金属Pb2+的最佳条件为pH 6.0,吸附温度38.28℃,反应时间104.79 min,孢子投加量1.55 g/L,Pb2+的去除率为99.41%;探讨黑曲霉孢子的吸附机理、吸附等温式,提出黑曲霉孢子可以作为一种极具潜力的绿色廉价吸附剂,用于修复水中的Pb2+污染.

酿造工业中黑曲霉孢子检测方法的改良

根据黑曲霉孢子菌的特征 ,对其检测技术进行探讨。筛选出检测无菌液 ,找出适于此类菌系检测方法的关键技术。研究结果表明 ,以0.15 %琼脂无菌液代替无菌水对样品进行稀释 ,每个稀释液制成后 ,用磁力搅拌器搅拌 ,可使样品达到均匀分散程度 ,不再产生上浮、聚集的不均匀现象 ,再经接种、培养 ,即可获得准确结果 ,从根本上解决了用原稀释平板法检测孢子菌类数值重现性差、难以确定实值的问题。

3种不同植物与黑曲霉孢子联合去除水中U(Ⅵ)的研究

为探索降低铀(U)污染的新途径、新方法,选用白鹤芋、观音竹、碎米莎草进行水培实验。对3种不同植物联合黑曲霉孢子去除U(Ⅵ)以及外加碳源、氮源的影响因素进行了研究。结果表明,在12 d的培养期内,白鹤芋挂膜黑曲霉孢子对U的去除能力比其他2种植物要强,去除率高达98.13%。外加碳源、氮源的最佳组合为葡萄糖4 g、硫酸铵0.4 g。同时证明,微生物通过挂膜,联合植物协同修复U污染水体有可操作性。

酿造工业中黑曲霉孢子检测方法的改良

根据黑曲霉孢子菌的特征 ,对其检测技术进行探讨。筛选出检测无菌液 ,找出适于此类菌系检测方法关键技术。研究结果表明 ,以 0 15 %琼脂无菌液代替无菌水对样品进行稀释 ,每个稀释液制成后 ,用磁力搅拌器搅拌 ,可使样品达到均匀分散 ,不再产生上浮、聚集的不均匀现象 ,再经接种、培养、即可获得准确结果 ,从根本上解决了用原稀释平板法检测孢子菌类数值重现性差、难以确定真值的问题。

酿造工业中黑曲霉孢子检测方法的改良

根据黑曲霉孢子菌的特征，对其检测技术进行探讨。筛选出检测无菌液，找出适于此类菌系检测方法关键技术。研究结果表明，以０．１５％琼脂无菌液代替无菌水对样品进行稀释，每个稀释液制成后，用磁力搅拌器搅拌，可使样品达到均匀分散程度，不再产生上浮、聚集的不均匀现象，再经接种、培养，即可获得准确结果，从根本上解决了原稀释平板法检测孢子菌类数值重现性差、难以确定真值的问题。

酿造工业中黑曲霉孢子检测方法的改良

根据黑曲酶孢子菌的特征，对其检测技术进行探讨。筛选出检测无菌液，找出适于此类菌系检测方法关键技术。研究结果表明，以０．１５％琼脂无菌液代替无菌水对样品进行稀释，每个稀释液制成后，用磁力搅拌器搅拌，可使样品达到均匀分散程度，不再产生上浮、聚集的不均匀现象，再经接种、培养，即可获得准确结果，从根本上解决了用原稀释平板法检测孢子菌类数值重现性差、难以确定真值的问题。

酿造工业中黑曲霉孢子检测方法的改良

根据黑曲霉孢子菌的特征,对其检测技术进行探讨。筛选出检测无菌液,找出适于此类菌系检测方法关键技术。研究结果表明,以0.15%琼脂无菌液代替无菌水对样品进行稀释,每个稀释液制成后,用磁力搅拌器搅拌,可使样品达到均匀分散程度,不再产生上浮、聚集的不均匀现象,再经接种、培养,即可获得准确结果,从根本上解决了用原稀释平板法检测孢子菌类数值重现性差、难以确定真值的问题。

Box-Behnken模型响应面法优化以玉米芯为基质培养黑曲霉孢子的工艺

通过响应面法优化以玉米芯为基质培养黑曲霉孢子的工艺,为其进一步研究提供技术参考。以标准菌株和玉米芯为试验原料,在单因素试验的基础上,选取不同浓度的碳源、氮源为影响因素,以黑曲霉孢子的数目为响应值,根据Box-Behnken响应面设计模型,设计三因素三水平的响应面试验,建立数学模型,确定适合黑曲霉孢子生长的最佳培养基组成。选取考察因素中,碳源浓度和氮源浓度对黑曲霉孢子的产生有非常显著的影响,碳源种类及浓度与氮源浓度交互影响明显。通过软件拟合结合实际,确定最佳培养条件为:碳源种类为果糖,碳源浓度0.70%,氮源浓度0.30%。在此条件下进行验证试验,结果与模型预测值接近。采用响应面法优化以玉米芯为基质培养黑曲霉孢子的工艺切实可行,实际值与预测值吻合度高,可以得到较好的黑曲霉孢子培养结果,对黑曲霉孢子的进一步研究及利用奠定基础。

催化式红外对黄曲霉孢子抑制动力学研究

考察催化式红外对黄曲霉孢子的抑制效果;方法:选择催化式红外不同距离和不同温度对黄曲霉孢子平板进行杀菌,并采用平板计数方法观察杀菌效果,筛选合适的距离和温度参数进行抑制动力学测定;结果:距离对催化式红外抑制黄曲霉孢子萌发能力影响较弱,而温度影响较强,在9.5 cm和70 ℃条件下绘制得到抑制动力学曲线,为催化式红外杀菌研究提供数据;结论:催化式红外对黄曲霉孢子萌发有良好抑制效果。

地塞米松增强烟曲霉孢子侵袭力的研究

目的探讨地塞米松预处理A549细胞后对孢子侵袭力的影响;比较黏附和内化(细胞内)孢子之间的数量关系,为临床资料提供参考依据。方法选自2013年1月-6月由医院微生物室鉴定的19株临床菌株,在不同浓度地塞米松条件下建立烟曲霉菌孢子侵袭上皮细胞的体外模型,应用Graphpad Prsm对内化组与黏附组侵袭率进行χ2分析。结果不同浓度地塞米松预处理A549细胞4h后,各组烟曲霉孢子的侵袭力无明显差异,而预处理24h后,25mg/L地塞米松组孢子侵袭力(26.44±2.45)%高于5mg/L组(23.56±3.16)%、1mg/L组(19.81±3.63)%和0mg/L组(18.17±2.77)%,除0mg/L组和1mg/L组之间侵袭力无差异外,其余任意两组侵袭力差异均有统计学意义(P<0.05);27.2%黏附孔子进入细胞(P<0.05)。结论烟曲霉孢子的侵袭力与地塞米松作用的时间和浓度成正相关,侵袭性曲霉病主要由黏附孢子引起。

TLR4基因的沉默下调了NOD1信号通路在RAW264．7细胞中抗烟曲霉孢子刺激作用

为研究单核巨噬细胞RAW264.7受烟曲霉孢子刺激时NOD1和TLR4信号通路在细胞处于正常状态和免疫抑制状态时发挥的作用,以及沉默TLR4基因后对NOD1信号通路的影响,通过建立细胞免疫抑制模型,利用RNAi技术将TLR4-siRNA转染细胞24h后给予烟曲霉孢子刺激12h,运用RT-PCR和Western blot法检测细胞受烟曲霉孢子刺激后NOD1,TLR4,RIP2,MyD88 mRNA及TNF-α蛋白表达变化.研究发现:(1)给予RAW264.7细胞含免疫抑制剂甲泼尼龙琥珀酸钠浓度为0.04mg/mL的RPMI1640培养液培养12h后,细胞抑制效果最佳,存活率约为90%.(2)正常RAW264.7细胞受烟曲霉孢子刺激时,NOD1和TLR4信号通路被激活,通过释放促炎细胞因子TNF-α发挥抗烟曲霉孢子刺激作用,当细胞处于免疫抑制状态时,NOD1和TLR4信号通路不能激发其有效的免疫应答.(3)TLR4-siRNA转染RAW264.7细胞,沉默效率达83%.(4)TLR4基因的沉默,使NOD1信号通路不能被很好地激活来抵抗烟曲霉孢子对细胞的刺激作用,表明沉默TLR4基因下调了NOD1信号通路在RAW264.7细胞中的抗烟曲霉孢子刺激作用.

TLR4基因沉默下调TLR2信号通路在RAW264．7细胞中的抗烟曲霉孢子刺激作用

目的研究单核巨噬细胞RAW264．7受烟曲霉孢子刺激时，TLR2和TLR4信号通路发挥的作用，以及沉默TLR4基因后，对TLR2信号通路的影响。方法利用RNAi技术将11LR4-siRNA转染RAW264．7细胞24h后给予烟曲霉孢子刺激12h，将细胞随机分为正常组（N组）、正常＋烟曲霉孢子刺激组（N＋Af组）、正常＋TLR4-siRNA组[TLR4（RNAi）组]、正常＋TLR4-siRNA＋烟曲霉孢子刺激组[TLR4（RNAi）＋Af组]，RT-PCR和Westernblot法检测细胞受烟曲霉孢子刺激后TLR2、TLR4、MyD88mRNA及TNF-α蛋白的表达变化。结果（1）TLR4基因沉默前：与N组比较，N＋Af组TLR2、TLR4、MyD88mRNA及TNF．Ot蛋白表达量均显著升高（P〈0．05）。（2）TLR4-siRNA（100nmol／L）转染RAW264．7细胞，沉默效率达83％。（3）TLR4基因沉默后：与N组比较，TLR4（RNAi）组TLR2、MyD88mRNA的表达量均显著降低（P〈0．05）；与N＋缈组比较，rrLR4（RNAi）＋4厂组的TLR2、MyD88mRNA和TNF-α蛋白的表达量均显著降低（P〈0．05）；与TLR4（RNAi）组比较，TLR4（RNAi）＋A厂组MyD88mRNA表达量显著升高（P〈0．05），而TLR2mRNA及TNF．仪蛋白表达量却无显著变化（P〉0．05）。结论RAW264．7细胞受烟曲霉孢子刺激时，TLR2和TLR4信号通路被激活，通过释放促炎细胞因子TNF-α发挥抗烟曲霉孢子刺激作用；当沉默TLR4基因后，TLR2信号通路不能被很好地激活来抵抗烟曲霉孢子对细胞的刺激作用，沉默TLR4基因下调了TLR2信号通路在RAW264．7细胞中的抗烟曲霉孢子刺激作用，可能TLR4较TLR2在抵抗烟曲霉孢子刺激时发挥更重要的作用。

吸入烟曲霉孢子对支气管哮喘大鼠气道黏蛋白MUC2表达的影响

气道黏液过度分泌是支气管哮喘（简称哮喘）加重和死亡的危险因素。MUC2是由杯状细胞分泌的不溶性黏蛋白，哮喘患者MUC2表达上调，呼吸道黏液黏稠度和黏滞性增加，更易导致气道阻塞。流行病学资料显示烟曲霉（Aspergillus fumigatus）暴露与哮喘病情加重密切相关。我们用卵清白蛋白（ovalbumin，OVA）致敏和激发的方法建立大鼠慢性哮喘模型，然后给予长期的烟曲霉孢子吸入，观察对黏蛋白MUC2表达的影响，探讨烟曲霉暴露加重哮喘的机制。