放射化学分析中的最低检测限

放射化学分析中的最低检测限杜秀珍杜宝彪（内蒙放射卫生防护所，呼和浩特０１００３１）放化分析对探索环境中放射性核素的行为，研究它们在各种介质中的迁移和浓缩规律，掌握环境放射性污染及评价辐射对人体健康的影响具有十分重要的意义。本文主要对环境样品放化分析...

国产新型冠状病毒(2019-nCoV)抗原检测试剂盒的性能比较

目的探讨不同国产新型冠状病毒(2019-nCoV)抗原检测试剂盒的阳性符合率、阴性符合率及最低检测限的差异。方法为准确衡量产品的性能,选择具有代表性的16个国产新型冠状病毒(2019-nCoV)抗原检测试剂盒,分别检测国家参考品中的阳性参考品、阴性参考品和最低检测限参考品,得出阳性符合率、阴性符合率和最低检测限并分析结果。结果16个新冠抗原检测试剂盒的阳性符合率和阴性符合率均为100%;16个新冠抗原检测试剂盒的最低检测限结果呈梯度分布。结论新型冠状病毒(2019-nCoV)抗原检测试剂盒的检测方法学及原材料不同影响试剂盒最低检测限检测结果。

植物酯酶法检测有机磷农药的敏感性和检测限的研究

采用本室自制的植物酯酶,对19种有机磷农药进行了敏感性试验,并测定了该酶对这19种有机磷农药的最低检测限(LOD)。研究表明,所制备植物酯酶对受试的18种有机磷农药均有良好的敏感性,且最低检测限远低于国家规定的最大残留限量(MRL),因此,该酶可作为有机磷农药残留检测用酶。

农残检测用木本植物酯酶的筛选研究

基于酶抑制原理,针对木本植物种子,利用总酯酶活力及比活力进行比较,筛选农药残留检测适宜的植物酯酶,扩大了植物用酯酶的选材范围,并测定了对6种有机磷及氨基甲酸酯类农药的最低检测限(LOD)。试验显示,刺槐总酯酶活力及比活力高于传统酶源小麦及其他树种,最低检测限低于国际规定的最大残留限量(MRL),因此,该酶可作为新的有机磷残留检测用酶。

SF_6局部放电分解产生SOF_2特征组分的光声光谱检测

为了预防SF6气体绝缘设备早期绝缘缺陷,可通过检测SF6局部放电过程中产生的特征组分氟化亚硫酰(SOF2)体积分数大小和变化规律进行判断。针对SOF2传统检测法存在的不足,引入具有检测灵敏度高、不消耗被测气体、特别适用于在线监测等优点的光声光谱检测技术。利用宽频红外光源构建了一台用于检测SOF2的光声检测实验装置。并分析了其特性参数,获得了光声信号强度与SOF2体积分数之间的关系,得到了SOF2的最低检测限为4.6×10-6。与气象色谱仪的对比检测表明:光声检测法与气相色谱法的平均检测误差为5.9%。结果说明,所提光声检测装置能有效检测SOF2,并为最终研制SOF2光声光谱在线监测系统提供关键技术支撑。

光声光谱技术应用于SF_6局部放电分解组分检测

针对SF6局部放电下分解组分传统检测方法存在的消耗被测气体多、检测时间长、不适用于在线监测等不足,利用光声光谱技术具有检测气体灵敏度高、不消耗被测气体等特点,研究了用于SF6局部放电分解组分检测技术,给出了局部放电下SF6分解特征组分SO2、CO2、CF4的特征频谱,利用研制的光声光谱实验平台获得了气体的光声信号与气体体积分数关系,得到了SO2、CO2、CF4的最低检测限分别为3.8×10-6、3.1×10-6、4.7×10-6,建立了用于降低SO2、CO2、CF4混合气体的光声信号交叉响应的RBF神经网络算法,使3种气体平均检测误差分别降为5.6%、1.6%、3.3%,提高了检测准确度,并用气相色谱法和检测管法的对比测量验证了其可信性,为解决交叉响应的影响问题提供了一种技术手段。

非荧光标记基因芯片法检测转基因成分的研究

开发了一种可同时检测四种转基因作物的高灵敏度非荧光标记(生物素标记)基因芯片方法。应用该方法检测了4种含一定浓度转基因产品(包括转基因大豆Roundup Ready、转基因玉米MON810、Bt11和转基因油菜RT73)的有证标准物质,并做了检测灵敏度试验。结果表明,该技术可同时有效检测这4种转基因产品中的11个目标基因,检测低限可达0.1%以下,在现有转基因产品检测方法(包括荧光标记基因芯片)中达到或超过最低水平,但其检测成本远低于荧光标记基因芯片法。

利用DNA分子指纹图谱技术检测小麦粉中害虫的研究

为开发快速检测我国成品粮中害虫的技术,研究了DNA分子指纹图谱技术检测小麦粉中主要害虫的碎片和虫卵的含量。结果表明,通过对害虫的延长因子EF1基因片段引物的筛选和PCR条件的选择,确定了有效地检测出来小麦粉中的赤拟谷盗、杂拟谷盗和锯谷盗的成虫碎片、幼虫和卵通用引物和PCR扩增条件。通过改良的PCR技术可在4 h内快速检测杂拟谷盗、锯谷盗的卵、幼虫和成虫碎片。最低检出限为可检测出小麦粉中0. 05%(m/m)卵和幼虫、1%成虫的碎片,灵敏度超过了国际标准。DNA指纹图谱中电泳条带亮度(Y)与被检测的不同害虫碎片含量(X)成正相关,回归方程为Y=858. 36X+74. 540相关系数R为0.961 9。利用该技术检测随机取样的小麦粉中成虫的碎片,检测的准确率最高可达80. 56%。结果说明了利用DNA分子指纹图谱技术可快速检测出小麦粉中害虫的碎片、幼虫和卵含量,并可预测小麦粉中害虫的感染程度。本研究为开发快速小麦粉中害虫的快速检测技术具有重要的参考意义。

部分商品化非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒的比对

为获得商品化非洲猪瘟病毒(ASFV)荧光PCR检测试剂盒的敏感性、特异性、一致性和最低检测限等试验数据,以世界动物卫生组织(OIE)推荐引物探针为金标准,以62份已灭活的ASFV阳性田间样品、32份阴性田间样品和P72基因核酸标准物质为检测对象,对农业农村部公布许可的其中17个厂家生产的商品化ASFV荧光PCR检测试剂盒开展了试验特性方面的比对研究。结果显示,17个厂家生产试剂盒的敏感性最低为77.4%,最高为96.8%,特异性最低为87.5%,最高为96.8%,均未达到100%,且有一定差别;12个厂家的试剂盒与OIE推荐引物探针检测结果一致性较好(Kappa值≥0.75),其余5个厂家的试剂盒与其一致性一般(0.4<Kappa值<0.75);17个厂家的试剂盒均可检测到的最低稀释度为5.9×10^(3)×2^(-3)拷贝/μL,但不同厂家试剂盒的最低检测限有所差别,其中5个试剂盒可检测到的最低稀释度为5.9×10^(3)×2^(-3)拷贝/μL,2个试剂盒为5.9×10^(3)×2^(-4)拷贝/μL,6个试剂盒为5.9×10^(3)×2^(-5)拷贝/μL,3个试剂盒为5.9×10^(3)×2^(-6)拷贝/μL,1个试剂盒至少为5.9×10^(3)×2^(-7),且大部分国产试剂盒的最低检测限比进口试剂盒低。本研究为ASFV荧光PCR检测试剂盒的筛选和比对提供了参考数据。

基于光声光谱技术的SF6/N2故障分解气体检测中SF6含量对检测灵敏度的影响

由于各方面性能均衡,SF6/N2混合气体是目前替代SF6气体的最佳选择之一,许多电力设备已经采用SF6/N2混合气体作为绝缘介质。电力公司的运检人员开始关注SF6/N2混合气体故障分解产物的检测问题,如采用现有的光声光谱仪器是否可以继续检测分解气体,检测灵敏度如何等。针对上述问题,该文首先从光声光谱基本原理出发,指出背景气体改变主要影响光声光谱系统的光声池常数,且随着混合气体中SF6比例降低,光声池常数增大,有利于分解气体的检测。混合气体中SF6比例从100%变为20%,光声池常数由168.7 Pa·cm/W增大至576.0 Pa·cm/W。然后搭建光声光谱实验平台,对比不同SF6混合比条件下,SO2、CO2、CO、CF4和SO2F2五种气体组分的最低检测限,实验结果与理论分析趋势一致,即SF6气体比例越小,最低检测限越低,越容易检测。SF6比例从100%变为30%,分解气体中CO2最低检测限可由0.629×10^-4%减小至0.226×10^-4%。

基于FFT滤波高精度光声二次谐波检测技术的研究

基于波长调制光谱(WMS)信号二次谐波分量检测的光声光谱(PAS)气体检测技术在电力、化工和医疗等行业得到了广泛应用。虽然采用二次谐波分量检测技术可以有效减小光声信号中的相关噪声,但检测信号中仍存在检测系统的非相关噪声,影响了光声检测系统对痕量气体的检测能力以及测试结果的准确度。为研究如何削弱光声光谱检测系统的非相关噪声对二次谐波信号的影响,改进检测系统的最低检测限,提高测量准确度,搭建了一套以可调谐分布反馈式(DFB)半导体激光器为激励光源的一阶纵向共振光声光谱气体检测系统,首次提出了使用快速傅里叶变换(FFT)对光声二次谐波信号进行滤波的新方法。首先根据气体光声光谱检测系统的噪声频谱对锯齿波扫描信号频率进行了优化选择,使检测系统背景噪声对光声检测信号的影响降至最小,然后使用FFT对与扫描锯齿波同频率的光声二次谐波信号的基波分量进行提取,虽然提取出的基波分量幅值小于光声信号二次谐波分量最大值,但由于光声检测系统背景噪声减小的更多,实现了改进光声检测系统最低检测限的目的。通过对102,75.1,50,30.3,15.3,7.7,1,0.79,0.57,0.35和0.17μL·L^-1的C 2H 2/N 2混合气体测试结果进行分析和对比,使用FFT对光声二次谐波信号进行滤波处理后,测试结果读数非常稳定,当信噪比为3时,系统的最低检测限从0.43μL·L^-1降低为30.6 nL·L^-1,说明FFT滤波对于消除波长调制光谱信号二次谐波分量中的非相关噪声非常有效,可以提高测量准确度和改进光声光谱检测系统最低检测限。研究成果可为使用波长调制光谱信号二次谐波分量检测技术的应用提供一定参考。

猪圆环病毒2型数字微滴PCR检测技术的建立及应用

为建立猪圆环病毒2型(PCV2)的微滴式数字聚合酶链式反应(ddPCR)检测方法,本研究针对PCV2ORF1基因设计引物和探针,经各反应条件的优化,确定反应体系中引物和探针终浓度分别为0.7μmol/L和0.25μmol/L,且退火温度为59℃时,ddPCR方法具有最佳的扩增效率(96%)。特异性试验结果显示,该ddPCR方法除了对PCV2检测结果为阳性外,对PCV1、PCV3和其它常见猪病病原的检测均未见阳性微滴,特异性较强。以10倍倍比稀释的重组质粒标准品pUC57-NA-ORF1为模板,利用建立的PCV2 ddPCR检测技术进行敏感性试验,结果显示,ddPCR的最低检测限达2.93拷贝/μL,比荧光定量PCR(qPCR)高10倍以上,敏感性较高。批内和批间重复性试验结果显示,其变异系数均小于10%,重复性较好。利用建立的PCV2 ddPCR对24份猪组织样品和70份宠物饲料样品进行检测,结果显示,该ddPCR方法对猪淋巴结、脾、肺和肾脏等组织样品的检测结果与qPCR的检测结果一致,均检出10份阳性样品。但ddPCR对饲料样品的检测更为灵敏,共检出PCV2阳性样品14份,其中有5份样品的qPCR检测结果为阴性,表明本研究建立的ddPCR方法敏感性、抗干扰性和可靠性更高。本研究首次建立了PCV2 ddPCR检测方法,为饲料等复杂基质样品中PCV2的检测提供了有力技术手段。

微珠芯片免疫法对肉制品中莱克多巴胺残留的检测

构建了一个基于功能化微珠表面竞争性免疫反应的流控芯片体系,在环氧化微珠表面固定小分子莱克多巴胺的蛋白全抗原,然后依次与一抗和携带荧光的二抗反应,最后输出荧光信号。在检测中,采用内标-标准曲线法,先利用标准品制作竞争性免疫反应的标准曲线,然后进行实际样本检测。该系统检测的莱克多巴胺的最低检测限达到0.03μg/L,检测时间不超过45 min。

多交叉置换扩增技术在单增李斯特菌检测中的应用及评价

目的应用多交叉置换扩增(MCDA)技术建立单增李斯特菌的简单、快速、敏感且特异的诊断方法,并对该方法进行敏感度、特异性及实际应用评价。方法根据单增李斯特菌的种特异性基因lmo0733设计引物,采用荧光染料颜色变化、实时浊度检测及琼脂糖凝胶电泳三种方法确认MCDA产物,对MCDA引物进行最佳反应条件、敏感度、特异性评估,并对实际样本进行检测。结果单增李斯特菌MCDA检测方法的最佳反应温度为61℃。单增李斯特菌MCDA检测方法的敏感度为10fg/反应,分别是环介导等温扩增(LAMP)技术和交叉引物恒温扩增(CPA)技术的25倍和250倍。对153份鼠粪便标本2次增菌培养物的检测结果证实,本研究建立的单增李斯特菌MCDA检测方法的检测能力与分离培养方法(ISO 11290-1)相同,且优于LAMP、CPA和PCR方法。结论 MCDA方法作为一种快速、敏感和高效的检测方法可以应用于食品行业及临床标本中单增李斯特菌的检测。

六种国产粪便隐血检测试剂的诊断性能评价

目的综合评价六种国产粪便隐血试剂的诊断性能。方法采用高值人血红蛋白稀释法对六种粪便隐血试剂的最低检测限和高浓度人血红蛋白检测能力进行评价,采用动物血红蛋白、维生素C和辣根过氧化物酶对六种粪便隐血试剂的抗干扰性进行评价。检测120例消化内科就诊患者和80例健康体检者来源的新鲜粪便样本,比较六种粪便隐血试剂对临床标本的检测结果。结果六种国产粪便检测试剂(贝索、艾博、波生、新创、万华和万孚)的最低检测限分别为25,50,100,150,200和200ng/ml,检测人血红蛋白高值分别为7,10,10,7,3和3mg/ml。500μg/ml的动物血红蛋白和高于0.1mg/ml的维生素C对部分检测试剂有干扰。六种粪便检测试剂检测消化内科就诊患者来源的新鲜粪便的阳性率在23.3%～60.0%之间,六种粪便检测试剂的检出阳性率不同(P<0.05)。结论六种国产粪便隐血试剂最低检测限、高浓度血红蛋白检测能力、抗干扰性和临床样本的检出阳性率不全一致。在选用诊断试剂产品前应做好性能评价,了解试剂的真实诊断性能。

肽核酸荧光原位杂交技术检测生肉中沙门氏菌方法的建立及应用

本研究设计了一种基于沙门氏菌毒力基因侵袭蛋白A(invA)的特异性肽核酸(PNA)探针,在前期优化条件的基础上,建立并评估了沙门氏菌肽核酸荧光原位杂交(PNA-FISH)的检测方法。特异性试验结果显示,该方法的Sal-invA探针除对目标菌杂交呈阳性外,与12株常见的非目标菌杂交均为阴性,特异性强;灵敏度试验结果显示,该方法对沙门氏菌的检测限为105 cfu/mL,而荧光定量PCR方法和细菌分离培养法对沙门氏菌的最低检测限分别为102 cfu/mL和105 cfu/mL,PNA-FISH方法的灵敏度与分离培养方法相近。人工污染沙门氏菌的生肉制品,增菌培养后经上述3种方法检测的最低检测限均可达到100 cfu/mL。对83份生鲜肉经增菌培养后,用上述3种方法检测。结果显示,该方法与细菌分离培养方法和荧光定量PCR方法的符合率均达到98.8%。表明,增菌培养是提高该PNA-FISH检测方法灵敏性的重要步骤。本研究建立的检测沙门氏菌的PNA-FISH方法快速、准确、灵敏,适合用于临床肉制品的检测。

XT-4000i血细胞分析仪在临床体液细胞检测中的应用

目的分析XT-4000i血细胞分析仪在临床体液标本检测中的应用。方法采用传统镜检法与XT-4000i血细胞分析仪(仪器法)同时检测脑脊液、胸腔积液、腹腔积液各20份标本,分别检测红细胞计数、白细胞计数、单核细胞(MN)计数、多形核白细胞(PMN)计数,并对两种方法的检测结果进行相关性分析。结果两种方法检测脑脊液、胸腔积液、腹腔积液标本,其红细胞计数、白细胞计数、MN计数、PMN计数结果相关性好(r>0.93)。结论 XT-4000i血细胞分析仪能够满足临床体液常规检测的需要,可以在临床推广使用。

基于光声光谱技术的SF_6分解组分的检测装置研制

采用了光声光谱技术对SO2气体进行检测,该技术有高灵敏度并且不消耗被检测的气体的优点,特别适用于对SO2气体的检测;基于光声光谱技术设计了一台用于检测SO2气体的试验装置,并且针对圆柱形光声腔存在的缺陷而采用了球形的光声腔。所设计的试验检测装置能够有效检测SO2,并为日后研制SO2光声光谱在线监测系统提供重要的技术支撑。

基于不同型别腺病毒标准品的呼吸道病原体核酸试剂最低检测限性能评价

目的利用不同型别呼吸道腺病毒核酸标准品对呼吸道病原体核酸检测试剂进行最低检测限性能评价。方法选择已研制的1、2、3、4、5、7、55型呼吸道腺病毒核酸标准品,参照美国临床实验室标准化协会(CLSI)的EP17-A2文件,采用Probit回归方法对28种不同方法学原理的呼吸道病原体核酸检测试剂的最低检测限(Lod)进行评估,比较各试剂盒声称Lod和评估Lod之间以及对不同腺病毒型别检测Lod之间的差异。结果28种试剂盒中能够准确评估Lod的比例为50%(12/24)。12种试剂盒的评估Lod与声称Lod一致性较好;12种试剂盒一致性较差,其中4种试剂盒差异较小(measured Lod<5×claimed Lod),8种试剂盒差异较大(measured Lod>5×claimed Lod),最大者可达24000倍。不同试剂间评估的Lod浓度差异可达106数量级以上(最低和最高分别为20拷贝/ml和4.8×10^(7)拷贝/ml);同种试剂对不同型别腺病毒的检测Lod均不相同,其浓度差异最高可达104数量级(最低和最高分别为5.0×10^(3)拷贝/ml和4.8×10^(7)拷贝/ml)。结论部分呼吸道病原体核酸检测试剂检测腺病毒的最低检测限性能评估缺乏准确性,使用检测范围内的多种病原体型别或亚型进行性能评估尤为必要。

新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测试剂盒(荧光PCR法)最低检测限的确定

目的确定上海捷诺生物科技有限公司研制生产的新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测试剂盒(荧光PCR法)最低检测限,并验证其在最低检测限水平是否可有效检出新型冠状病毒。方法将20份不同临床阳性样本稀释至62500、12500、2500、500、100 copies/mL 5个浓度梯度,利用新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测试剂盒(荧光PCR法)进行3次重复检测,初步确定最低检测限范围,用3批生产的试剂盒对稀释至1500、700、500、300、150 copies/mL 5个浓度梯度的20份不同临床阳性样本进行20次重复检测,进一步确定最低检测限,另取25份不同临床阳性样本稀释至最低检测限水平,用连续3批生产的试剂盒进行20次重复检测,以验证其最低检测限。结果在62500、12500、2500、500 copies/mL 4个浓度水平上,样本阳性检出率均为100%,在100 copies/mL浓度水平上,样本阳性检出率≤55%,初步最低检测限在500~100 copies/mL之间,经20次重复测定,1500、700、500 copies/mL 3个浓度水平对样品的阳性检出率≥95%,300、150 copies/mL 2个浓度水平对样品的阳性检出率均<95%,确定最低检测限为500 copies/mL,25份稀释至最低检测限浓度水平的阳性样品,阳性检出率均达95%以上。结论上海捷诺生物科技有限公司研制生产的新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测试剂盒(荧光PCR法)的最低检测限确定为500 copies/mL,经验证,该试剂盒对最低检测限水平的病毒样本可有效检出病毒核酸,符合我国对检测试剂最低检测限的相关要求。