三种植物生长调节剂对月季离体再生的影响

为了提高月季遗传转化的体细胞胚胎的植株再生率,以月季B103 (Rosa spp.)无菌苗为材料,探究不同浓度的细胞分裂素6-BA、KT、TDZ对植株生长的影响,并以优化的培养基EB和ET对成熟的月季B103体胚进行再生诱导。结果表明:添加KT的培养基(RK)上的无菌苗全部死亡,添加6-BA (RB)和TDZ(RT)的两组生长正常,最佳培养基为MS+NAA 0.05 mg/L+GA33.0 mg/L+6-BA/TDZ 0.5 mg/L+3%蔗糖+0.7%琼脂pH=5.7。成熟月季体胚在培养基MS+NAA 0.05 mg/L+GA33.0 mg/L+TDZ 0.5 mg/L+3%蔗糖+0.7%琼脂p H=5.7上诱导分化,30 d内再生出数量最多的正常植株,再生率为20%。ET组分化出丛生状态的子叶,再生率高于20%。本研究表明ET2可诱导月季细胞分化出正常再生植株。

月季胚性愈伤的诱导及体细胞胚的发生

为完善月季再生体系,并建立月季优良的遗传转化受体系统,本研究以月季R-10(Rosa spp.)叶片、叶柄、茎段腋芽为外植体,探究了不同外植体体胚再生的差异和不同浓度2,4-D和Ag NO3对体胚再生的影响。试验结果表明:本次试验中在不同浓度的2,4-D下叶片和叶柄虽然能诱导出大量愈伤组织,但却无法诱导出胚性愈伤。而将芽增生培养基(MS+6-BA 2.0 mg/L+3%蔗糖+0.6%琼脂粉,pH=6.0)上暗培养2~4 d的茎段腋芽置于(SH+3.0-4.0 mg/L 2,4-D+10 mg/L Ag NO3,pH=5.7)胚分化培养基上暗培养,胚性愈伤组织诱导率较高,并进一步诱导出体细胞胚,最快在42 d能获得胚性愈伤。根据以上结果发现,由月季茎段腋芽建立的体胚再生体系可以用于遗传转化受体材料。