应用4-甲基伞形酮-β-D-半乳糖苷快速检测食品中的大肠菌群

依据ISO 9308-1:2000有关大肠菌群具有产生β-半乳糖苷酶的特性,研制了4-甲基伞形酮-β-D半乳糖苷,并以此制成4-甲基伞形酮-β-D半乳糖苷肉汤(MUGal肉汤):将MUGal肉汤与SN0169指定的月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤对比检测13种标准菌株,所得结果完全一致;对比检验48份食物样品,本法检出大肠菌群的阳性率高出标准法47%。从上述标准法未检出而本法判定为阳性的样品培养液中,分离可疑菌,经乳糖发酵、氧化酶和硝酸盐还原试验以及API 20E鉴定,证明95．1%为大肠菌群。实验结果表明,用4-甲基伞形酮-β-D半乳糖苷肉汤检验食品中大肠菌群,快速、简便、准确、可靠,可作为一种任选的标准方法加以应用。

2010食品安全国家标准中大肠菌群计数方法的研究和探讨

目的:研究和探讨食品安全国家标准(GB4789-2010)中食品大肠菌群计数方法,对所用的培养基提出改进意见。方法:按GB4789.3-2010中大肠菌群MPN计数法进行检测。实验分两组:一组为常规月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LST),另一组在月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LST)中加入溴甲酚紫指示剂,其余实验条件均一样。比较两组实验结果。结果:两种培养基的食品大肠菌群计数结果无显著性差异。结论:在月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LST)中加入适量的溴甲酚紫指示剂,对实验结果无影响,但结果观察更直观,清楚。显示本实验的可行性。

大肠菌群特异性检测荧光底物MUGal的合成及应用

4-甲基伞形酮基-β-D-吡喃半乳糖苷(MUGal)是食品安全中重要指示菌大肠菌群的特异性快速检测荧光底物。本文采用相转移催化方法使4-甲基伞形酮(4-MU)和四乙酰基-α-D-吡喃溴代半乳糖缩合生成保护的糖苷,再在碳酸钠的水/甲醇溶液中去保护生成4-甲基伞形酮基-β-D-吡喃半乳糖苷。通过对温度、时间和催化剂用量对糖苷化一步产率的研究发现,当温度为30℃,反应时间为16 h时,产率最高可达73.12%。醇解反应一步以碳酸钠为碱产率可达91.01%。在对产物进行IR和1HNMR结构表征后,进一步将产物应用于大肠菌群显色培养基,并和进口底物比较,其产荧光管数经X2检验无显著性差异(P>0.05),在实际样品检测中,采用GB4789.3-2010(48 h)和MUGal方法(24 h)的阳性检出率均为80%,MUGal方法的检出时间明显缩短。因此,本研究制备的荧光底物能和进口产品相媲美,可以作为进口底物的替代品。