有丝分裂期DNA合成(MiDAS)及其介导的端粒复制

DNA复制压力(replication stress,RS)是一个广泛定义DNA复制障碍的术语,通常是指那些能够扰乱复制进程,造成复制叉减慢或停滞的情况。复制压力的过度累积是肿瘤发生和基因组不稳定的主要驱动因素。细胞染色体在复制过程中会不断地遭受来自外源性或内源性复制压力,而端粒及常见脆性位点(common fragile sites,CFSs)是一类对复制压力高度敏感的区域,在复制压力较高的情况下,这些区域往往难以被完全复制。近年的研究发现,有丝分裂期DNA合成(mitotic DNA repair synthesis,MiDAS)区别于S期的复制,可以帮助难以复制的区域在进入有丝分裂期后仍然能够保证复制的进行,因此,MiDAS也被称为“复制的挽救机制”。由于端粒的维持依赖于端粒酶活性及端粒替代性延长机制(alternative lengthening of telomeres,ALT),而具有更多端粒脆性的ALT细胞中端粒-MiDAS表现出高度的活性,因此本文就MiDAS的发生机制及在不同端粒维持机制下难以复制的端粒如何应对复制压力在有丝分裂期完成DNA的合成进行综述。

肺癌端粒酶活性、p53突变蛋白及细胞增殖DNA合成期比例相关研究

目的 探讨端粒酶、p5 3突变蛋白作为肺癌肿瘤标记物的可能性以及二者与细胞增殖DNA合成期比例(SPF值 )的关系。方法 采用改良银染 -端粒重复序列扩增法 (TRAP)检测 4 0例原发性支气管肺癌端粒酶活性 ,免疫组织化学方法检测其p5 3突变蛋白 ,流式细胞术检测其SPF值。结果 87.5 % (35 /40 )肺癌组织端粒酶活性阳性 ,92 .5 % (37/40 )p5 3突变蛋白阳性 ;SPF值在端粒酶活性阴性组、阳性组之间 ,p5 3突变蛋白阴性组、阳性组之间均有显著性差异。结论 端粒酶、p5 3突变蛋白可能是灵敏、特异的肺癌肿瘤标记物。端粒酶的异常活化、表达主要发生在细胞分裂周期的S期 ,p5

不同发育阶段小鼠胚胎S-期、M-期卵裂球的检测以及低温对胚胎细胞DNA合成的影响

利用放射自显影技术检测了小鼠着床前胚胎 ( 4-细胞、8-细胞、桑葚胚和囊胚 )不同发育阶段 (早、中、晚 ) S期和 M期卵裂球的比率 ,并研究了低温 ( 4℃ )对小鼠胚胎发育及 DNA合成的影响。结果显示 ,早期和中期 4 -细胞胚胎 S期卵裂球比率较高 ,分别是 75%、92 % ,没有 M期卵裂球 ,晚期 4 -细胞胚胎 S期卵裂球比率较低 ( 30 % ) ,M期卵裂球比率为 1 1 % ;早期和中期 8-细胞胚胎 S期卵裂球比率仍很高 ,分别是 73%、80 % ,M期卵裂球分别为 0、2 .5% ,晚期 8-细胞胚胎 S期卵裂球比率增至 6 4% ,M期卵裂球减少至 9% ;早、中、晚期桑葚胚的 S期卵裂球比率分别是 77%、72 %和 79% ,M期卵裂球的比率分别是 5%、3%和 3% ;早、中、晚期囊胚的 S期卵裂球比率分别是 78%、74 %和 77% ,M期卵裂球的比率分别是 4 %、3%和 4 %。 4℃的低温对小鼠早期胚胎的发育和 DNA合成都没有明显影响 ;4 -细胞、8-细胞胚胎和桑葚胚经低温处理及培养后其囊胚形成率和平均卵裂球数分别是 6 2 %和 ( 2 6± 6 )个、54%和 ( 2 5± 7)个、87%和 ( 34± 8)个 ;4 -细胞、8-细胞胚胎、桑葚胚和囊胚经低温处理后 S期卵裂球比率分别是 97%、77%、70 %和 74 %。

N^(7+)重离子注入和贯穿后小麦种胚的期外DNA合成效应

用3H－TdR掺入法研究了经N7＋重离子往入和贯穿处理的82579小麦和8812小麦种胚的DNA合成动态。结果发现，未经N7＋重离子任何处理的两个小麦品种的对照种胚，在萌发早期（20h内）仅存在一个DNA合成峰（于萌发的第14h），而经过N7＋重离子注入和贯穿处理的小麦种胚则存在两个DNA合成峰（分别于萌发的8－10h和14－16h），该种子经DNA修复合成的抑制剂咖啡因处理后，第一个DNA合成峰（8－10h）消失。表明经N7＋重离子注入和贯穿处理的小麦种胚内存在着DNA修复合成，即期外DNA合成。N7＋重离子注入处理的期外DNA合成效应低于贯穿处理，本文对其产生的可能原因进行了讨论。

急性白血病DNA倍体、合成期细胞百分比及增殖指数的研究

目的观察急性白血病患者骨髓或外周血DNA倍体的变化规律。方法采用流式细胞仪和DNA检测试剂盒检测急性白血病患者DNA倍体、合成期细胞百分比(SPF)、增殖指数(PI)并与DNA倍体分析对照组进行比较。结果52例急性白血病(AL)中,28例为二倍体,22例为异倍体,2例为可疑异倍体,异倍体检出率为42.3%,22例异倍体(1例近二倍体,5例四倍体,4例多异倍体和12例非整倍体)中,8例为急性淋巴细胞白血病(ALL),11例为急性髓系白血病(AML),3例混合细胞性白血病。ALL与AML异倍体检出率分别为42.1%(8/19)和36.7%(11/30)。异倍体组与二倍体组及与对照组两两比较,P<0.05或<0.01,差异具有统计学意义。结论DNA倍体分析可为急性白血病的临床诊断提供客观的实验室依据。

一种简捷人胚纤维母细胞非S期DNA合成检测系统的建立

本研究将简单的盖玻片法和人胚纤维母细胞(HEF)结合起来,建立一种简敏感快捷的UQS方法。也即利用HEF在盖玻片上贴壁生长至细胞触合,经含0.5％小牛血清培养基同步培养24h和10mM羟基脲预处理1h后,以每片盖玻片为单位进行药物处理,加入3~H-TdR培养4h后,盖玻片经8％三氯醋酸和甲醇各处理15分钟完成细胞收获,以每片盖玻片为单位作液闪放射活度计数。本系统利用盖玻片法大大简化了药物处理和细胞收获步骤,使一次完成多样本处理成为可能。

CHO M期同步细胞的研究

引言 1953年,Howard和Pelc以蚕豆根端细胞为材料,用同位素示踪方法摻入32P到蚕豆根细胞DNA中,发现只有在DNA合成时才有32P的掺入,而在DNA合成后到有丝分裂期之间有一间隙（gap）存在,此时32P不能掺入,因此,首先提出细胞周期的概念。1959年Oastler和Sherman利用3H-Td标记小鼠肠腺窝上皮细胞的有丝分裂象的方法测定细胞周期各时相的时间,为细胞动力学的研究提供了重要手段。

敬钊缨毛蛛蛛毒对人肝癌细胞BEL-7402细胞增殖、细胞周期和C-myc蛋白的影响

通过MTT方法可知敬钊缨毛蛛蛛毒对BEL 7402细胞增殖有较强的抑制作用(p<0.05),时效和量效关系良好.IC50为18mg/L.敬钊缨毛蛛蛛毒可以抑制BEL 7402细胞DNA的合成.流式细胞仪检测发现经过蛛毒作用的BEL 7402细胞凋亡率增加,细胞周期阻滞在G0/G1期.WesternBlot方法进一步检测到蛛毒作用BEL 7402细胞72h后,C myc蛋白表达减弱.实验结果表明,敬钊缨毛蛛蛛毒可以抑制人肝癌细胞BEL 7402的增殖和DNA的合成,其药理作用机理可能除了诱导凋亡外主要是使BEL 7402细胞周期相关蛋白C myc表达减弱,导致细胞周期的变化.

生物学中减数分裂的课堂教学

本文在上期发表的“生物学中有丝分裂的课堂教学”一文的基础上 ,继续针对细胞分裂在各遗传规律中的应用 ,较详细地阐明了减数分裂的过程和教学方法。

100例急性白血病患者骨髓DNA的倍体分析

目的观察急性白血病患者骨髓DNA倍体的变化规律。方法采用流式细胞仪和DNA检测试剂盒检测急性白血病患者骨髓DNA的倍体、合成期细胞的百分比(SPF)和增殖指数(PI),并与正常对照组进行比较。结果 100例急性白血病患者异倍体的发生率为43.00%。异倍体组白血病患者较二倍体组白血病患者及正常对照组其SPF、PI值均明显增高。二倍体组白血病患者较正常对照组其SPF、PI值明显增高。结论异倍体组白血病患者体内白血病细胞恶性程度较高,增殖速度较快。

细胞周期同步化知识概述

1细胞周期同步化的含义 在一般培养条件下,群体中的细胞处于不同的细胞周期时相之中。为了研究某一时相细胞的代谢、增殖、基因表达或凋亡,借助某种实验手段（自然的或经人为的）,使细胞群体中处于细胞周期不同时相的细胞停留在同一时相,这就是细胞同步化技术。

Rh和p21与细胞周期调控研究

细胞周期是细胞生命活动的基本过程，细胞在周期时相的变迁中进入增殖、分化、衰老和死亡等生理状态。细胞周期为10～48h，分为4期：G1期（DNA合成前期）、S期（DNA合成期）、G2期（DNA合成后期）和M期（有丝分裂期）。近年来对细胞周期的研究取得了许多突破性进展，

我国科学家揭示全新DNA复制起始位点调控机制

DNA复制是一个确保遗传信息精确传递的生命过程。细胞在DNA合成前期G1期时,复制起始识别复合物识别染色质上的复制位点,进一步招募DNA解旋酶MCM(Minichromosome maintenance)等,形成复制前体复合物,完成复制起始位点的认证。而当细胞进入复制期S期时,被认证的复制起始位点被选择性地激活使用。真核生物DNA复制起始位点的选择受DNA序列和表观遗传因素共同调控。目前,表观遗传因素对染色质上DNA复制起始位点的选择机制仍然不清楚。

以HPV 16/18型E6/E7蛋白为靶标的治疗性DNA合成疫苗：VGX-3100的Ⅱb期临床试验

虽然宫颈癌预防性疫苗越来越得以广泛应用,但宫颈上皮内瘤样病变（CIN）仍然很常见.目前对轻度 CIN 建议随访观察,而对 CIN2/3 的治疗主要是环形高频电刀切除术（LEEP）或锥切术等创伤性技术,有较高的妊娠并发症和复发风险.

稀土在医药领域的研究进展

十九世纪后期以来．国外广泛而深入地开展了稀土在医药方面的研究。1949年英国、澳大利亚、日本等国先后收载草酸铈进入药典．用于治疗晕动症和妊娠呕吐。六十年代后，陆续发现稀土化合物具有一系列特殊的药效．是钙离子拮抗剂．可广泛用于治疗烧伤、皮肤病、血栓病等。展现出广阔的应用前景。稀土化合物可以通过改变细胞膜的流动性、通透性、细胞膜表面ATP酶活性、细胞内外离子交换以及细胞有丝分裂、DNA合成等多种途径．对细胞生长产生不同影响。目前稀土化合物作为药物使用的临床实验和有关机制仍是国内外学者非常重视的研究领域．本文就稀土在医药领域中的应用研究状况进行简要综述。