利用有序差异显示技术克隆受稻瘟病菌诱导表达的水稻cDNA的研究

利用有序差异显示技术 (ODD)分析受稻瘟病菌诱导表达的水稻基因 ,通过反式RNA印迹进行辅助筛选 ,获得了 37个在接种稻瘟病菌后表达量增强的水稻cDNA克隆 .采用RNA印迹对其中 5个克隆在接种稻瘟病菌后的表达分析表明 ,这些克隆在抗病以及感病的水稻株系中都具有诱导表达的特点 .根据序列同源性分析 ,与这些克隆序列相应的同源基因可能涉及抑制病原菌生长、清除真菌毒素、传递抗病信号以及调节宿主生理状态等几方面的功能 .

有序差异显示法研究大鼠脑特异基因

有序差异显示法(ordered differential display, ODD)是一种简便的系统研究基因表达谱差异的有效方法. 采用链霉亲和素和生物素的特异亲和性质分离目标cDNA片段, 从而排除非特异DNA片段的影响后, ODD法的重复性和可靠性得到了进一步的改进和完善; 随后利用ODD法对胚胎大鼠脑与身体的基因表达差异进行了初步研究, 得到几十条脑特异表达的EST(expressed sequence tag)片段; 再通过反向杂交、RT-PCR实验和EST结果分析, 验证了改进后的ODD方法的结果可靠, 假阳性率低, 重复性好, 同时, 还对克隆到的脑特异全长新基因rZIC的生理功能进行了初步研究. 将rZIC的反义核酸注射到小鼠侧脑室, 测定小鼠的行为变化. 通过分析实验结果发现, rZIC对维持成年小鼠的运动功能有一定的作用.