关于中药有效部位活性筛选的新思路探讨——毛菊苣有效提取部位多靶点治疗的研究

我国中药的发展目前正处在加速现代化研究的进程中，但中药药效物质基础研究相对薄弱及中药治疗中复杂的多靶点问题依然是制约中药走向国际的因素，这不仅贯穿于中药现代化基础研究的全过程，更是中药实现现代化的关键问题。由于中药药效物质基础的研究难度大，如何通过科学量化的确定物质控制指标筛选有效部位，同时兼顾中医药理论多靶点，弱活性协同作用的整体性和特殊性，这是中药药效物质基础研究和筛选中的共性技术，这是限制了中药的发展的关键技术。因此要提高中药研究的现代化水平，必须探索新的研究思路和方法。

玳玳黄酮有效部位提取物降血脂作用的研究

目的:研究玳玳黄酮有效部位提取物对实验性高脂血症大鼠血脂水平的影响。方法:取大鼠60只,根据大鼠的总胆固醇水平随机分为6组,分别为正常对照组,高脂模型组,阳性对照组,玳玳果黄酮有效部位低、中、高剂量组,每组10只。采用高脂饲料致大鼠高脂血症模型,造模同时阳性对照组灌胃以山楂精降脂片,玳玳黄酮有效部位提取物低、中、高剂量组分别灌胃以不同浓度的玳玳果黄酮有效部位溶液。测定各组动物的血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL^C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量,并计算动脉粥样硬化指数;取肝脏做肝组织病理切片,光镜观察组织病理学变化。结果:与模型组比较,各给药组可以显著降低TC、TG、LDL的含量,显著升高HDL含量;各给药组的动脉粥样硬化指数均降低,且有极显著性差异;组织病理学观察表明高脂模型组大鼠肝脏存在严重脂肪变性,各给药组大鼠高血脂症状均有缓解。结论:玳玳黄酮有效部位提取物具有显著降低高脂血症大鼠血脂的作用,并表现出明显的剂量依赖性。

柴芩清肝方有效部位群提取物质量标准研究

目的:建立柴芩清肝方有效部位群提取物的质量标准。方法:采用薄层色谱法对黄芩、白芍、甘草和柴胡进行定性鉴别;采用紫外分光光度计法测定总黄酮和总皂苷含量。结果:定性鉴别特征斑点明显,专属性强;总皂苷在0.06～0.24mg内线性关系良好,平均回收率为95.92%,RSD值为0.37%(n=5),总黄酮在0.032～0.064mg内线性关系良好,平均回收率为100.04%,RSD值为0.18%(n=5)。结论:该方法简便可行,可用于柴芩清肝方有效部位群提取物的质量控制。

叶下珠有效部位总提取物致突变实验研究

目的评价叶下珠有效部位总提取物的致突变性。方法采用微核实验、Ames实验和体外染色体畸变实验对叶下珠有效部位总提取物进行了诱变性检测。结果小鼠体内骨髓细胞微核实验未发现骨髓细胞微核率增加,Ames实验中对TA97,TA98,TA100,TA102 4种菌株加与不加S9均未发现回变菌落数增加,体外染色体畸变实验加与不加S9均未发现染色体畸变率超过5%。3个实验结果均为阴性。结论在该实验条件下,未检出叶下珠有效部位总提取物的诱变性。

天山花楸不同提取部位止咳平喘作用的筛选

目的:研究天山花楸不同提取部位的止咳平喘活性,并进一步筛选其有效提取部位。方法:采用小鼠氨水引咳法、豚鼠引喘法和小鼠卵蛋白复制法筛选天山花楸止咳平喘的有效提取部位。结果:天山花楸乙酸乙酯提取物对小鼠氨水引咳具有明显的拮抗作用,对气雾吸入组胺和乙酰胆碱引起的豚鼠哮喘具有保护作用,能明显延长哮喘潜伏期,对卵蛋白引起的小鼠哮喘,能明显减少支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞(WBC)总数和嗜酸性粒细胞(Eos)数。结论:天山花楸止咳、平喘的有效提取部位主要为乙酸乙酯提取物。

叶下珠有效部位抗鸭乙型肝炎病毒及体外抗HBV活性的研究

本文观察了叶下珠有效部位总提取物对鸭乙型肝炎病毒感染模型的影响,结果150 、300 、600 mg/kgig 2 周和1 个月均可使血清DHBVDNA 滴度总体水平明显降低,停药后回升不明显。用药1 个月还可使ALT 明显降低,肝组织病理改变减轻。体外试验70 、100μg/ml 能抑制2-2-15 细胞培养上清液中的HBeAg 。

仙鹤草不同提取部位的抗炎作用研究

目的考察仙鹤草不同提取部位的抗炎作用。方法采用醋酸扭体法、二甲苯致小鼠耳肿胀法、磷酸组胺致毛细血管通透性增加实验,探讨仙鹤草醇提取部位、仙鹤草正丁醇提取部位、仙鹤草乙酸乙酯提取部位的抗炎作用。结果与模型组比较,仙鹤草醇提取部位、正丁醇提取部位能减少醋酸所致小鼠扭体次数(P<0.05、P<0.05)、能抑制二甲苯致小鼠耳肿胀(P<0.05、P<0.05),能够降低磷酸组胺致小鼠毛细血管通透性增加(P<0.05、P<0.05)。结论仙鹤草具有明显的抗急性炎症的作用,其活性主要集中于正丁醇提取部位。

掌叶半夏提取物的有效部位对CaSki的促凋亡作用机制研究

目的:前期的研究已证实中药掌叶半夏提取物的有效部位(pinellia extract fraction,PE)对体外培养的宫颈癌细胞株CaSki和HeLa有促凋亡作用,通过本次研究进一步明确PE对CaSki的促凋亡作用机制。方法:采用RT-PCR方法检测0.15g/L的PE作用24h后CaSki细胞Bcl-2和Bax mRNA表达的变化,采用Western Blot检测0.15g/LPE作用24h后CaSki细胞Bcl-2、Bax蛋白表达的变化。结果:0.15g/L的PE作用24h后CaSki细胞Bcl-2 mRNA和蛋白的表达均明显下降,而Bax mRNA和蛋白的表达均明显上升。结论:PE对CaSki宫颈癌细胞株促凋亡作用之一是抑制Bcl-2基因的表达、促进Bax基因的表达。这为进一步研究PE的抗宫颈癌作用机制以及新药的研制开发奠定了一定的实验基础。

掌叶半夏提取物的有效部位对宫颈癌细胞株HPVE6和P53基因表达的影响

目的:观察中药掌叶半夏提取物的有效部位(PE)对CaSki和HeLa细胞人乳头瘤病毒(HPV)E6基因和P53基因表达的影响,进一步阐明PE的抑癌机制。方法:0.15mg/mL的PE作用于CaSki和HeLa细胞24h后,采用RT-PCR方法检测两种细胞HPVE6和P53 mRNA表达的变化,采用Western Blot检测CaSki和HeLa细胞HPVE6、P53蛋白表达的变化。结果:0.15mg/mL的PE作用24h后CaSki和HeLa细胞HPVE6 mRNA和蛋白的表达均明显下降,而P53mRNA和蛋白的表达均明显上升(P<0.05,P<0.01)。结论:PE可以明显抑制CaSki和HeLa宫颈癌细胞株HPVE6基因的表达、促进其P53基因的表达,这可能是PE抗宫颈癌作用的关键环节。

掌叶半夏提取物的有效部位不同给药途径对人宫颈癌细胞株CaSki裸小鼠移植瘤的抑制作用

目的:观察不同给药途径下掌叶半夏提取物的有效部位(PE)对Ca Ski裸小鼠皮下移植瘤的抑制作用,以探索PE的体内最佳给药途径。方法:建立Ca Ski裸小鼠皮下移植瘤模型,待移植瘤体积增至大约100mm3,将裸小鼠随机分为阴性对照组、灌胃组、腹腔注射组、皮下注射组、顺铂阳性对照组。测量肿瘤径线,计算肿瘤体积并描绘肿瘤生长曲线。药物处理21d,第22天颈椎脱臼处死裸小鼠,称取瘤重,计算抑瘤率。HE染色观察移植瘤组织形态,免疫组化检测移植瘤组织中Ki-67的表达情况。结果:灌胃组、腹腔注射组、顺铂阳性对照组裸小鼠移植瘤重量明显小于阴性对照组和皮下注射组(P<0.05),抑瘤率分别为38.71%,31.86%,45.92%。且灌胃组、腹腔注射组移植瘤组织Ki-67表达明显低于阴性对照组和皮下注射组(P<0.05)。结论:PE能够抑制Ca Ski裸小鼠皮下移植瘤的生长,其体内实验的最佳给药途径可以是灌胃或者腹腔注射,推荐实验中采取灌胃方式。抑制Ki-67的表达可能是PE体内抑瘤作用机制之一。

大鼠灌胃白花蛇舌草有效部位提取物血浆中代谢产物的液质分析

目的:分析大鼠灌胃白花蛇舌草有效部位提取物后血浆中对香豆酸、反式6-O-对香豆酰鸡屎藤苷甲酯及其代谢产物。方法:取健康雄性SD大鼠按0.4 g.kg-1的剂量经口给予白花蛇舌草有效部位提取物,1.0 h后采集眼眶静脉血液制备血浆,采用HPLC-Q-TOF-MS进行分析。结果:在大鼠血浆中只检测到1个代谢产物,并利用对照品鉴定了其结构为对香豆酸。结论:白花蛇舌草有效部位提取物中主要成分反式6-O-对香豆酰鸡屎藤苷甲酯在大鼠体内的代谢产物为对香豆酸,本实验为研究白花蛇舌草化学成分及药效作用提供了理论依据。

吴茱萸B对大鼠佐剂性关节炎的治疗作用

目的 :观察吴茱萸提取部位B对Wistar大鼠原发性AA的预防治疗作用。方法 :用Freund’s完全佐剂诱发大鼠产生关节炎 (adjurantarthritis,AA) ,以非造模侧继发性反应足跖的肿胀度 ,前肢、耳和尾部病变发生率以及免疫器官胸腺、脾脏指数为指标。结果 :吴茱萸提取部位B对原发性大鼠AA有明显的治疗作用。结论 :明显降低大鼠非造模侧后肢肿胀度 ,对AA大鼠免疫器官胸腺、脾脏指数有明显的改善作用。

基于FTIR的祖师麻有效部位化学成分整体分析与评价

采用傅里叶变换红外光谱、二阶导数光谱、共有峰率和变异峰率的双指标序列等方法,首次对祖师麻中3种已知含量及功效的标准物质、不同提取方法提取的有效部位及渗漉液的不同萃取部位进行了结构特征的分析和鉴别。结果表明,祖师麻甲素及7-OH香豆素在1700cm^(-1)附近内酯及芳环在1600cm^(-1)附近有强吸收,紫丁香苷芳环v_C=c1589、1509cm^(-1)骨架振动及羟基v_(O-H)3563cm^(-1)的吸收峰较强。加热回流提取的有效部位在3300cm^(-1)处有较强的羟基V_(O-H)伸缩振动或氨基酸等v_(N-H)伸缩振动的叠加,渗漉法提取的有效部位在此处也有较强吸收峰,且3518cm^(-1)处的V_(N-H)较为明显。另外,两法提取的有效部位红外图谱共有峰率仅为45%,且变异峰率高达83.8%。其不同萃取部位的红外一维图谱均较好的体现了C=O、C—H、O—H、N—H及甲基、亚甲基的伸缩振动;对比各萃取部位的二阶导数谱,发现石油醚部除745—715cm^(-1)附近外,其余位置峰数明显少于其他3个萃取部位,乙酸乙酯部的峰数较多且峰形较好,氯仿和正丁醇部峰数与之相差不多,但峰形较弱,通过双指标法得出氯仿部和石油醚部所含物质种类相差极大,而氯仿部和乙酸乙酯部较为相近。