桂枝汤有效部位A对体温双向调节作用及其机理研究*——对下丘脑NE、DA、5-HT含量的影响

在酵母诱导的发热大鼠中，桂枝汤有效部位Ａ（Ｆｒ．Ａ）能降低下丘脑５－ＨＴ、ＮＥ、ＤＡ含量；在安痛定诱导的低体温大鼠中，能升高５－ＨＴ含量。结果提示，Ｆｒ．Ａ为桂枝汤体温双向调节作用的一种物质基础，影响中枢神经递质５－ＨＴ的水平是其机理之一；

桂枝汤有效部位A对IL-1刺激的大鼠脑微血管内皮细胞前列腺素E_2及其主要信号转导元件的影响

目的:探讨桂枝汤解热有效部位A(Fr.A)对IL-1刺激的大鼠脑微血管内皮细胞(rCMEC)PGE2信号转导通路主要元件的影响。方法:制备大鼠含药血清,通过放射免疫法测定PGE2含量,酶反应底物法测定PLA2活性,ELISA法测定COX活性,比色法测定NO含量。结果:Fr.A含药血清处理rCMEC后,在IL-1刺激下,孵育液中PGE2和NO含量、总COX和COX-2活性均显著减低,对升高的sPLA2活性无明显影响。结论:Fr.A可通过影响PGE2信号转导通路主要元件COX及NO,进而影响PGE2水平。

桂枝汤有效部位A对致热大鼠下丘脑蛋白质组双向电泳分析

目的 :观察桂枝汤有效部位A对酵母致热大鼠下丘脑组织蛋白质组的影响。方法 :采用双向凝胶电泳技术和计算机辅助的图像分析方法 ,对蛋白质进行分离 ,以模型组作为参考胶进行匹配。结果 :口服给予桂枝汤有效部位A后对发热大鼠有解热作用 ;双向电泳图像分析显示桂枝汤有效部位A与模型组匹配率为 85 % ,多个蛋白质点表达量有不同程度的改变。结论 :差异表达的蛋白质点可能与桂枝汤有效部位A解热作用有关。

桂枝汤有效部位A对下丘脑热休克蛋白含量的影响

目的 :研究桂枝汤有效部位A(Fr.A)在双向调节体温的同时对下丘脑热休克蛋白 (HSP)的影响。方法 :取高、低体温大鼠下丘脑组织 ,应用蛋白印迹法测定热休克蛋白含量。结果 :Fr.A在双向调节体温的同时 ,可明显拮抗安痛定性低体温大鼠下丘脑HSP70含量的降低 ,对酵母性高体温大鼠下丘脑HSP70含量具有一定的降低作用。结论 :Fr.A对高、低体温大鼠下丘脑HSP70含量的调节作用是其双向调节体温的机理之一。

毛头牛蒡子总木脂素有效部位的化学成分研究

研究毛头牛蒡子总木脂素有效部位中的化学成分,采用紫外分光光度法测定其中总木脂素含量,采用高效液相色谱法测定其中牛蒡苷和牛蒡苷元的含量,结果表明,毛头牛蒡子总木脂素有效部位中总木脂素含量为95.68%,牛蒡苷含量为55.71%,牛蒡苷元含量为2.99%。通过对毛头牛蒡子总木脂素有效部位中化学成分进行分析,为进一步研究其活性打下相关基础。

皖产桐桔梗祛痰、平喘、止咳、抗炎有效部位筛选

目的:揭示皖产桐桔梗发挥祛痰、平喘、止咳、抗炎活性的有效部位。方法:采用回流提取法和大孔吸附树脂技术制备桐桔梗不同提取分离部位;采用小鼠酚红祛痰模型筛选桐桔梗祛痰有效部位;采用磷酸组胺联合氯化乙酰胆碱致小鼠哮喘模型筛选桐桔梗平喘有效部位;采用浓氨水喷雾致小鼠咳嗽模型筛选桐桔梗止咳有效部位;采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀炎性反应模型筛选桐桔梗抗炎有效部位。结果:桐桔梗乙醇提取物、20%乙醇洗脱部位、70%乙醇洗脱部位均显示出不同程度的祛痰、平喘、止咳、抗炎作用,其中桐桔梗70%乙醇洗脱部位的活性最强,且呈量效关系。桐桔梗70%乙醇洗脱部位可显著增加小鼠气管酚红排泄量(P<0.001),显著延长磷酸组胺联合氯化乙酰胆碱致哮喘小鼠的引喘潜伏期并减少小鼠抽搐跌倒只数(P<0.001),明显延长浓氨水引咳小鼠的咳嗽潜伏期(P<0.001)并改善其肺部组织损伤,显著降低浓氨水引咳小鼠的咳嗽次数及其血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6的水平(P<0.001),显著降低二甲苯致耳廓肿胀小鼠的耳廓肿胀度及其血清中TNF-α、IL-1β、IL-6的水平(P<0.01,P<0.001)。结论:70%乙醇洗脱部位是桐桔梗发挥祛痰、平喘、止咳、抗炎作用的主要活性部位,为阐明桐桔梗药效物质基础及作用机制提供数据支撑。

野菊花有效部位对两种高尿酸血症动物的作用研究及安全性评价

[目的]探讨野菊花有效部位(effective parts of wild chrysanthemum,CYM.E)对氧嗪酸钾复合次黄嘌呤致高尿酸血症模型小鼠和高嘌呤饮食致高尿酸血症模型大鼠的作用,并对CYM.E的安全性进行评价。[方法](1)药物安全性实验:将小鼠分为对照组,别嘌醇组(15 mg/kg),苯溴马隆组(7.5 mg/kg),CYM.E低、中、高剂量组(30、60、90 mg/kg),灌胃给药2周,评价CYM.E给药的安全性。(2)氧嗪酸钾复合次黄嘌呤致高尿酸血症小鼠实验:将小鼠分为对照组,模型组,别嘌醇组(15 mg/kg),苯溴马隆组(7.5 mg/kg),CYM.E低、中、高剂量组(30、60、90 mg/kg),灌胃给药1周,检测各组小鼠血清中尿酸(uric acid,UA)、肌酐(creatinine,CR)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)和天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)水平。(3)高嘌呤饮食致高尿酸血症大鼠实验:将大鼠分为对照组,模型组,别嘌醇组(10 mg/kg),苯溴马隆组(5 mg/kg),CYM.E低、中、高剂量组(15、30、60 mg/kg),灌胃给药5周,检测各组大鼠血清中UA、CR、BUN、ALT和AST水平。[结果]药物安全性实验证实,CYM.E不影响正常小鼠血清中UA与肝肾功能指标水平。氧嗪酸钾复合次黄嘌呤致高尿酸血症小鼠实验提示,CYM.E中、高剂量能够显著降低高尿酸血症小鼠血清UA水平(P<0.05,P<0.01)。高嘌呤饮食致高尿酸血症大鼠实验发现,给药3周后,高剂量CYM.E能够显著降低大鼠血清UA水平(P<0.01);给药5周后,中、高剂量CYM.E能够显著降低大鼠血清UA水平(P<0.05,P<0.01),高剂量能够显著降低大鼠血清CR、BUN水平(P<0.01,P<0.05),中剂量能够显著降低大鼠血清AST水平(P<0.05)。[结论]CYM.E不影响正常小鼠的UA水平,未见相关肝肾损伤,达到一定剂量后,对两种高尿酸血症动物模型均能够较好地降低UA水平,且具有一定的肝肾功能保护作用。

中药有效成分及有效部位通过调节巨噬细胞防治骨关节炎的研究进展

骨关节炎是严重影响全球中老年人生活质量的常见疾病之一。骨关节炎的发病机制复杂多样,但随着研究的深入,巨噬细胞在骨关节组织损伤和修复中扮演重要的角色,调节巨噬细胞是骨关节炎治疗的一个重要方向。目前,关于中药调节巨噬细胞维护免疫微环境稳态和防治骨关节炎的研究较多。中药有效成分可抑制巨噬细胞释放炎性因子,调节巨噬细胞极化态,减少巨噬细胞粘附,通过巨噬细胞减少血管新生,抑制破骨细胞形成来治疗骨关节炎。但现有研究较少,所用中药有效成分较少,而中药种类繁多,有效成分多种多样,潜在挖掘价值大,临床应用广,巨噬细胞的分子调节机制研究也在不断深入。本文对中药调节巨噬细胞防治骨关节炎的现有有关文献进行综述,以期为其进一步研究提供参考。

高效液相色谱法同时测定维药香青兰有效部位中10个化学成分的含量

目的建立高效液相色谱(HPLC)法同时测定维药香青兰有效部位中10个成分含量。方法采用Shim-pack ODS(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈(A)-0.5%甲酸溶液(B),梯度洗脱(0—30 min,17%A;30—60 min,17%→28%A;60—78 min,28%A),流速为1.0 mL·min-1;检测波长为330 nm,柱温为35℃。结果咖啡酸、4-香豆酸、木犀草苷、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷、迷迭香酸、香叶木素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、丹酚酸A、田蓟苷、香叶木素在该色谱条件下分离度良好,在考察的浓度范围内线性关系良好(r>0.9992)。加样回收率和相对标准偏差(RSD)分别为91.83%~106.43%和0.38%~2.22%内。结论建立的含量测定方法准确性高、重复性好,适用于香青兰有效部位的分析与质量控制研究。

爵床总黄酮有效部位对抗小鼠实验性骨质疏松的作用研究

文章探究了爵床总黄酮有效部位在对抗醋酸泼尼松致小鼠实验性骨质疏松方面的作用及机制。实验对象为50只小鼠,随机分为正常对照组、爵床总黄酮有效部位高、中、低剂量组,以及模型组。通过给小鼠灌胃醋酸泼尼松,诱导小鼠发生实验性骨质疏松症。每组小鼠分别灌胃相应药物,每日一次,连续4周后取血清检测生化指标,并对小鼠股骨进行骨物理和骨生化指标检测。结果显示,醋酸泼尼松模型组小鼠的股骨中骨羟脯氨酸、骨钙、骨磷含量明显降低(P<0.01),血清中血钙、血磷、碱性磷酸酶含量明显升高(P<0.01);而爵床总黄酮有效部位剂量组相对模型组,小鼠股骨骨重和骨质含量明显提高(P<0.01),且血清中碱性磷酸酶含量显著增加(P<0.05)。该结果验证了爵床总黄酮有效部位能对抗小鼠实验性骨质疏松的作用机制。

民族药水河剑水提和醇提取物急性毒性试验及抗炎镇痛有效部位筛选

对水河剑(Diplazium lanceum)药材水提物及醇提物的急性毒性进行初步研究,并筛选水河剑药材具有抗炎镇痛效果的极性部位。使用最大给药量测定方法对小鼠灌胃给药,得到水河剑水提物及醇提物的最大耐受量(MTD),考察水河剑用药的安全性;采用小鼠醋酸扭体及热板法考察水河剑不同极性部位的镇痛效果;采用小鼠耳肿胀法考察水河剑药材不同极性部位的抗炎效果;用ELISA法,测乙酸乙酯提取物(高、中、低)对小鼠耳部二甲苯致炎血清中炎症因子含量的影响。结果表明,水河剑水提物及醇提物急性毒性试验中均未能得到半数致死量(LD_(50)),水河剑药材水提物和醇提取物最大耐受量分别为238.0、165.2 g/kg;水河剑药材不同极性部位提取物对小鼠的舔足时间都有所延长;水河剑药材不同极性部位均对小鼠扭体有抑制效果,各组镇痛率为11.14%~40.36%,其中镇痛效果最好的为乙酸乙酯部位,其次为石油醚部位;水河剑药材不同部位均对小鼠耳肿胀有抑制效果,各组耳肿胀抑制率为24.71%~48.47%,乙酸乙酯及石油醚部位抗炎效果最好;乙酸乙酯高、中、低剂量组小鼠血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、前列腺素E_(2)(PGE_(2))炎症因子含量与模型对照组相比均有所下降,乙酸乙酯低、中剂量组的IL-1β、PGE_(2)含量及乙酸乙酯低剂量组的TNF-α含量与模型对照组相比具有显著差异。

叶下珠的有效部位和药理作用研究进展

叶下珠是临床常用治疗癌症的中药材,其发挥作用的有效部位包括水提物、醇提物、叶下珠生物碱、叶下珠多糖等。除显著的抗肝癌、肺癌、胃癌、乳腺癌等抗癌作用,叶下珠还具有抗病毒、抗氧化、抑菌、抗炎等药理作用。结合近5年的研究成果,文章对上述叶下珠有效部位和药理作用进行分析整理,同时提出今后关于叶下珠研究的建议,以此反映最新的叶下珠研究成果,为叶下珠临床应用提供理论依据,也为研究者下一步工作提供参考。

金樱子的抗菌活性及其有效部位研究

比较金樱子不同提取方法和不同溶媒萃取部位的体外抗菌效果,确定金樱子抗菌物质最有效的提取方式和有效部位。以金樱子果实为原料,采用甲醇冷浸法、乙醇热回流法提取,得到金樱子粗提物总浸膏,再依次用石油醚、乙酸乙酯和水对粗提物总浸膏依次萃取,得到不同溶媒的萃取部位,然后利用96微孔板稀释实验法进行体外抗菌实验。两种提取方法得到的粗提物对大多数细菌表现出一定的抗菌作用,甲醇冷浸法得到的粗提物的抑菌效果优于乙醇回流法。石油醚萃取部位和乙酸乙酯萃取部位呈现出良好的抗菌效果,水萃取部位抗菌效果较差。其中甲醇冷浸法获得的石油醚萃取部位对枯草芽孢杆菌CMCC 63501的抗菌活性最强,最低抑菌浓度达到0.1562 mg/mL。乙醇回流法所得的石油醚萃取部位对变异链球菌BNCC 336931的抑菌作用最强,其最低抑菌浓度达到0.3125 mg/mL。金樱子果具有广谱的抗菌活性,初步确定金樱子抗菌有效部位主要是甲醇冷浸提取法和乙醇热回流法所得的石油醚、乙酸乙酯萃取部位。

香青兰有效部位的成分鉴定、指纹图谱建立及含量测定

目的为香青兰有效部位(EPDM)的全面质量评价和控制提供依据。方法制备10批EPDM,利用高效液相色谱串联四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(HPLC-Q-Exactive-MS)联用技术采集EPDM化学信息,结合文献检索、数据库比对、人工解析等手段进行成分鉴定。根据《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)》建立10批EPDM的HPLC指纹图谱,进行相似度评价和共有峰指认,并采用HPLC法测定5个指标成分的含量。结果从EPDM中共鉴定出11个化合物。10批EPDM的指纹图谱相似度均在0.96以上。从11个共有峰中指认出了木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(LG)、芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷(APG)、迷迭香酸(RA)、香叶木素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(DG)、田蓟苷(TL)5个色谱峰。定量分析结果显示,上述5个成分在检测质量浓度范围内均线性良好(R2≥0.999),平均加样回收率为95.12%~98.37%;各成分含量分别为21.2683~29.2439 mg/g(LG)、6.3654~7.7717 mg/g(APG)、37.3274~45.6712 mg/g(RA)、17.1699~21.9859 mg/g(DG)、66.9404~91.2063 mg/g(TL)。结论所建立的成分鉴定、指纹图谱和含量测定方法稳定可行、结果可靠,适用于EPDM的综合质量评价和控制。

川木香有效部位质量标准研究

目的:分析市售川木香提取物质量评价情况,建立川木香总内酯有效部位的质量标准。方法:通过调查市售川木香提取物,分析总结质量标准现状。实验采用薄层色谱鉴别法(TLC)对川木香总内酯有效部位进行定性鉴别,采用2020年版《中国药典》(四部)的方法检查其干燥失重和总灰分,并利用高效液相色谱法(HPLC)对其有效成分(木香烃内酯、去氢木香内酯)进行含量测定。结果:市售川木香提取物存在含量标准不明确、质控项目较少的问题,亟待进一步完善质量标准。本实验所建立的川木香总内酯有效部位的薄层色谱专属性强、斑点清晰、分离度好;理化性质检查中干燥失重不超过0.50%,总灰分不超过0.20%;含量测定中,木香烃内酯(COS)和去氢木香内酯(DEH)的总量均值为72.01%,大于50%。结论:所建立的质量研究方法简便易行、结果可靠,重现性好,可用于川木香总内酯有效部位的质量控制与评价。

栀子及其有效部位的质量标准研究

目的对栀子及其有效部位的质量标准进行研究。方法采用薄层色谱法(TLC)对栀子及其有效部位进行定性鉴别;采用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)检查其重金属及有害元素;根据现行版《中国药典》中水分测定法对其进行水分检查;采用高效液相色谱法(HPLC)测定其中栀子苷的含量。结果TLC法能够对栀子及其有效部位进行鉴别。栀子及其有效部位的水分含量分别为8.4%、3.2%。同时测定栀子及其有效部位中5种元素的含量,砷、镉、铜、汞、铅分别在0~20、0~10、0~500、0~5、0~20 ng/ml范围内呈现良好的线性关系,各金属元素的方法检出限为3.3×10^(−5)~1.3×10^(−3)mg/kg,精密度的RSD值为0.32%~0.82%,该方法的重复性较好,砷、镉、铜、汞、铅的加样回收率分别为103%~112%、98%~99%、98%~99%、105%~106%、100%~103%(n=3),各测定元素在8 h内的稳定性良好,5种元素的含量均在现行版《中国药典》限量范围内。采用高效液相色谱法同时测定栀子及其有效部位中栀子苷的含量,栀子苷标准曲线方程为Y=15860X+22543,r=0.9999,表明栀子苷在20.16~322.6μg/ml范围内呈现良好的线性关系,精密度的RSD值为1.86%,两种供试品中栀子苷含量的RSD值分别为2.38%、2.60%,表明该测定方法的重复性良好,栀子药材的平均加样回收率为99.1%(n=6),两种供试品溶液在8 h内稳定性良好,栀子及其有效部位中栀子苷的含量分别为5.71%、34.2%。结论栀子有效部位的质量研究在栀子质量研究基础上开展,且结果符合要求,本实验所建立的方法能够实现同时对栀子及其有效部位的质量进行控制。

犁头草抗菌活性及其有效部位研究

本实验将犁头草全草作为研究对象,采用不同方法对犁头草全草的有效成分进行提取,评价并比较各提取物的抗菌活性。并将粗提物按照极性高低分布在石油醚、乙酸乙酯和水相中,评价不同萃取相的抗菌活性。结果显示,乙醇回流法和甲醇冷浸法获得的提取物抗菌活性明显,而水煎煮得到的提取物几乎未见抗菌活性。此外,乙酸乙酯萃取相的抗菌作用要优于石油醚相,而水萃取相抗菌活性最小。甲醇冷浸法和乙醇回流法获得的乙酸乙酯萃取组对金葡菌ATCC 33591和金葡菌ATCC 43300的抗菌活性最佳,最小抑菌浓度(MIC)值达到0.3125 mg/mL,对其他细菌的MIC值在0.3125~1.25 mg/mL之间;而其他萃取组分对金葡菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌以及耐药菌的MIC值大约在1.25~5 mg/mL之间。本研究确定了犁头草具有广谱的抗菌活性,尤其对耐甲氧西林金葡菌效果较好。研究发现乙醇回流与甲醇冷浸法可用于犁头草的抗菌物质提取,且它的抗菌有效部位为乙酸乙酯萃取相。

葎草抗炎镇痛有效部位筛选及机制

目的筛选葎草镇痛抗炎的有效部位,初步探讨有效部位镇痛抗炎的作用机制。方法采用溶剂萃取法将葎草水提液分离为不同部位;采用小鼠热板和醋酸扭体疼痛模型,筛选葎草镇痛作用的有效部位;采用二甲苯小鼠耳肿胀、大鼠蛋清足跖肿胀2种急性炎症模型以及大鼠棉球肉芽肿慢性炎症模型,筛选葎草抗炎作用的有效部位;检测有效部位对醋酸所致疼痛模型小鼠血清前列腺素E2(PGE_(2))、环磷酸腺苷(cAMP)含量以及蛋清所致大鼠足跖炎症组织NO和PGE_(2)含量的影响。结果葎草石油醚萃取部位明显延长热板所致小鼠的痛阈值(P<0.05),明显减少醋酸所致小鼠扭体反应次数(P<0.05);葎草石油醚萃取部位明显抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀(P<0.05),明显抑制蛋清所致大鼠足跖肿胀和大鼠棉球肉芽肿(P<0.05)。葎草石油醚萃取部位明显降低醋酸所致疼痛小鼠血清PGE_(2)、cAMP的含量(P<0.05),明显降低蛋清所致大鼠足跖组织NO和PGE_(2)含量(P<0.05)。结论葎草的水提液的石油醚萃取部位是镇痛抗炎的有效部位,其镇痛作用机制可能与降低PGE_(2)、cAMP的含量有关,其抗炎作用机制可能与减少炎症组织NO和PGE_(2)含量有关。

鼠妇提取物及不同极性部位缓解神经病理性疼痛作用研究

目的:比较鼠妇水提物及不同极性部位缓解神经病理性疼痛的药效作用,为鼠妇临床应用和镇痛药效物质的深入研究奠定基础。方法:鼠妇经水提得到水提物(AVW)后,依次用石油醚、乙酸乙酯萃取得到石油醚部位(APF)、乙酸乙酯部位(AEF)和水部位(AWF)。此外将AVW经石油醚脱脂后通过硅胶柱层析分段,制备获得石油醚–乙酸乙酯(3:1)、石油醚–乙酸乙酯(1:1)、石油醚–乙酸乙酯(1:3)、乙酸乙酯、甲醇洗脱部位。建立大鼠坐骨神经慢性压迫损伤模型,灌胃(0.5 g/kg)或鞘内(0.2 mg/20μL)给予鼠妇提取物或不同部位样品,运用Von Frey及Hargreaves分别测定大鼠机械及热痛阈值,评价鼠妇水提物及不同极性部位的镇痛活性。结果:鼠妇水提物有效缓解神经病理性疼痛,且不同极性部位镇痛活性有差异。结论:石油醚–乙酸乙酯(1:1)洗脱部位和甲醇洗脱部位具有较强的镇痛活性,为主要镇痛活性部位。

丹参有效部位(丹参-9403)对骨折愈合影响的生物力学实验研究

目的：探讨丹参提取的有效部位（丹参－９４０３）对骨折愈合的影响。方法：用Ｗｉｓｔａｒ大白鼠进行标准骨折（桡骨中１／３）造模后，随机分为４组（即丹参－９４０３、金葡液、生理盐水及丹参注射液组），术后第２天开始分别灌胃各组药物，连续喂养２５、３９、５０天后处死，取完整桡骨，置于岛津Ａｕｔｏｇｒａｐｈ万能材料测试仪上测定３点抗折强度的载荷、应力。结果：丹参－９４０３组在３９天的载荷指标和２５、３９、５０天应力指标最高，分别为（６２０±１３２）牛顿（Ｎ），（５７１±３５８）Ｎ／ｍｍ２、（８２７±２４２）Ｎ／ｍｍ２、（６６２５±２６５１）Ｎ／ｍｍ２，与其他各组比较，有显著性差异（Ｐ＜００５）。结论：丹参－９４０３具有提高骨折断端强度的作用。