梯度洗脱高效液相色谱法快速检测厌氧菌代谢物中的有机酸

提出了一种快速分析厌氧细菌代谢物中5种有机酸的高效液相色谱方法。该方法采用乙腈-0．02mol／L磷酸二氢钾缓冲溶液（pH2．8）作为流动相，流速和流动相中两种组分的比例均采用四元泵程序梯度洗脱方法控制，检测波长为215nm，柱温30℃时，能够快速、准确地分离和测定细菌培养基中的甲酸、乙酸、乳酸、琥珀酸和丙酸等5种有机酸，总分析时间只需4min。方法的相对标准偏差为0．26％-1．26％，回收率95．0％～100．8％，各种有机酸的线性相关系数r≥0．99981，具有较高的精密度和准确度，可以用于细菌代谢物中有机酸的分析。

特征黏度系列化聚二甲基二烯丙基氯化铵的杀菌性能

配制6个受菌污染的水样,研究了在不同培养基种类、含量和菌含量的影响下,特征黏度(η)系列化聚二甲基二烯丙基氯化铵(PDM)的实际杀菌能力。结果表明,PDM对含0.1%或10%有机、无机培养基的4种微污染水(菌含量1×104～1×105个/mL)与含10%有机、无机培养基的2种重污染水(菌含量1×106～1×107个/mL)的杀菌率先随加药量增加而增大。当加药质量浓度分别达到4、0.03、11、0.10、14、2.8 mg/L时,杀菌率均可接近或超过99%。实验结果发现,有机培养基的含量明显影响PDM杀菌性能,低含量无机培养基对PDM杀菌率的影响最小。由估算得到PDM(η:0.48、1.53、2.52、3.99 dL/g)对不含培养基的微污染水和重污染水杀菌率达99%时,实际用量分别为0.029、0.028、0.027、0.026 mg/L和2.73、2.35、2.33、2.31 mg/L。PDM的特征黏度越大,杀菌性能越佳。

丁香蘑菇野生菌株的生物学特性及驯化栽培

以采自内蒙古鄂尔多斯市乌审旗丁香蘑菇野生菌株为试材,采用单因素试验和正交实验,研究了其生物学特性及驯化栽培条件,以达到野生丁香蘑菇驯化栽培出菇的目的。结果表明:单因素试验中温度25℃、pH 6、碳源蔗糖、氮源酵母粉、生长因子蘑菇汁,无机盐为硫酸镁,有机物固体培养基为麦粒+牛粪是最佳条件;正交实验表明,4种因子对丁香蘑菇菌株影响程度不同,生长因子>氮源>碳源>无机盐,各因素之间存在显著性差异;出菇栽培试验,分别将草炭土(主料)与羊粪、牛粪、发酵料、草木灰等按3∶1配比,菌丝生长时最适温度20～25℃,pH 6.5～7.5,出菇时最适温度17.5～22.0℃,湿度90%～95%。

低温大曲酵母菌分离和计数培养方法优化

低温大曲是清香型白酒酿造的核心因素之一,为酿造过程提供了物系、酶系和菌系。酵母菌是白酒发酵过程中最重要的功能微生物类群,研究大曲中的酵母菌种类和含量具有重要意义,对大曲质量评价也具有重要参考价值。但用常规酵母菌分离技术和培养基从大曲中分离酵母菌时易受优势丝状真菌(霉菌)的干扰,霉菌常常很快长满培养皿,将酵母菌覆盖,难以对酵母菌进行定量计数、观察和分离纯化。本研究根据酒醅发酵过程中随乙酸和乳酸含量的升高,霉菌含量急剧降低而酵母菌含量逐渐升高的现象,用常规培养基YPD为基础培养基,测试了添加不同量的乙酸、乳酸和丙酸(后者为常用食品防腐和防霉剂),以及不同比例的乙酸乳酸组合物,对低温大曲中霉菌的抑制效果和对酵母菌生长的影响进行探究,发现在灭菌后的YPD中添加3.3mL/L乙酸、2.0mL/L丙酸或在乙酸乳酸1:3的情况下添加2.0mL/L乙酸,30℃培养3–5d之内可有效抑制低温大曲中的霉菌,实现对酵母菌的有效分离、计数和纯化培养,而单加乳酸对霉菌,特别是黄曲霉的抑制效果差。随后测试了以前我们从清香型白酒大曲和酒醅发酵过程中分离的13属18种酵母菌在这些培养基上的生长情况,发现这些酵母菌中的绝大多数,尤其是大曲和酒醅中的优势酵母菌种,均可以在这些加酸培养基上良好生长。综合考虑培养基的成本、配制的简便性及分离效果等因素,本研究推荐将灭菌后添加3.3mL/L乙酸的YPD固体培养基作为低温大曲酵母菌分离和定量计数的优化培养基。