气相色谱-质谱法测定蔬菜中有机磷杀虫剂和克百威的残留量

利用气相色谱 质谱 (GC MS) ,电子轰击离子化 (EI)法同时测定及确证蔬菜中多种有机磷农药和克百威的残留量。对样品的前处理方法进行了选择实验。试样用乙腈提取 ,将提取液过滤后 ,加氯化钠使水相与乙腈分离 ,浓缩有机相 ,无需净化。用GC MS的选择离子监测 (SIM)方式测定其中的敌敌畏、甲胺磷、甲拌磷、氧乐果、甲基对硫磷、克百威共 6种杀虫剂的残留量并进行阳性确证。该方法的检出限量为 0 0 0 0 2mg/kg～ 0 0 1 6mg/kg,1 0种蔬菜 6种农药的标准添加 (0 0 1、0 0 2、0 1、0 2mg/kg)的回收率为 72 %～ 1 2 5 % ,测定的相对标准偏差为 6 7%～ 2 0 %。本方法可以满足这 6种杀虫剂在蔬菜中的最高残留量限量的检测要求。

固相微萃取与气相色谱-质谱联用测定有机磷杀虫剂的残留量

建立了固相微萃取与气相色谱 质谱(SPME GC/MS)联用测定水样中有机磷杀虫剂残留量的方法。探讨了影响SPME萃取效果的萃取头类型、萃取时间、解吸时间、离子强度等诸因素,优化了GC MS仪器条件。在优化的GC MS条件下,杀虫剂的响应值与浓度有良好的线性关系,检出限分别为敌敌畏0 40μg/L、甲基对硫磷0 01μg/L、马拉硫磷0 025μg/L、对硫磷0 004μg/L。方法用于实际水样分析,结果令人满意,样品的加标回收率为94 7%～110 0%。该方法具有分析速度快、灵敏度高、重现性好、预处理简单易行等优点。

有机磷杀虫剂通用结构半抗原的设计及广谱特异性抗体的制备

【目的】制备针对有机磷农药的广谱特异性抗体,用于有机磷农药的免疫快速筛选检测。【方法】设计采用二乙基膦酸乙酸作为通用结构半抗原,用NHS-DCC法和EDC法合成两种人工抗原免疫新西兰大白兔制备抗血清。【结果】NHS-DCC法所制得抗血清的最高滴度为25600,EDC法合成的抗原制得的抗血清滴度最高为6400,均获得免疫应答。以二乙基膦酸乙酸为对象建立的间接竞争ELISA检测方法对二乙基膦酸乙酸最低检测浓度0.0035μg·ml-1,抑制中浓度I50为0.182μg·ml-1。经对12种常见磷酸酯类有机磷农药特异性检测反应试验,结果发现:所得抗体对毒死蜱、氧乐果、二嗪农、乙基对硫磷、丙溴磷、辛硫磷等农药有特异性反应,I50分别为0.12、0.21、0.24、0.78、0.97、3.8μg·ml-1。【结论】该检测技术可用于毒死蜱、氧乐果、二嗪农、乙基对硫磷、丙溴磷等药剂的快速定性或半定量检测。

有机磷杀虫剂毒死蜱人工抗原的合成与鉴定

以杀虫剂毒死蜱为起始原料 ,在碱性条件下与 3 巯基丙酸反应 ,合成了半抗原O ,O 二乙基 O [3,5 二氯 6 (2 羧乙基 )硫代 2 吡啶基 ]硫逐磷酸酯 (简称AR) ,然后分别与牛血清白蛋白 (BSA)和卵清白蛋白 (OVA) ,经过碳二亚胺法和混合酸酐法偶联反应得到了免疫抗原和包被抗原 ,其结合比分别为 39∶1和 13∶1。用所得的免疫抗原免疫兔子获得了效价较高的多克隆抗体。

高亲和力抗有机磷杀虫剂单克隆抗体的制备与鉴定

制备抗有机磷杀虫剂单克隆抗体。采用人工合成带有特殊功能基团的半抗原 ,将其与载体蛋白偶联 ,以半抗原偶联物为免疫原 ,免疫BALB c小鼠 ,取免疫小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合 ,HAT选择、有限稀释法克隆化 ,建立分泌抗机磷杀虫剂单克隆抗体的杂交瘤细胞系。ELISA间接法和ELISA竞争抑制法检测抗体滴度 ,非竞争抑制法检测抗体亲和常数。结果获得 9株分泌抗机磷杀虫剂单克隆抗体的杂交瘤细胞系 ,其中 7株为型特异性 ,2株为组特异性 ;Ig亚型均为IgG1 ;亲和常数为 4 0 7× 1 0 8± 0 43M和 1 2 7× 1 0 9± 0 2 4M。结论为人工人工合成的、含特殊功能基团的半抗原 ,与载体蛋白偶联后 ,做免疫原 ,可用于制备高滴度的抗有机磷杀虫剂单克隆抗体 。

不同地区棉蚜酯酶与有机磷杀虫剂抗性的关系

通过生物测定和生化分析研究了北京和山东高密地区木槿和棉花上棉蚜种群对杀虫剂的敏感性及体内α -乙酸萘酯 (α-NA)酶活力的变化。结果表明 ,高密地区木槿和棉花棉蚜对甲基对硫磷和久效磷的耐药性高于北京地区寄主植物棉蚜 ,同时高密棉花棉蚜对 2种杀虫剂的耐药性高于木槿棉蚜。高密地区木槿和棉花上棉蚜的蛋白含量分别是北京地区对应棉蚜的 3 86倍和 1 73倍 ,北京和高密地区棉花棉蚜α -NA酯酶活力分别是木槿棉蚜的1 74倍和 2 1倍 ,说明棉蚜α

羧酸酯酶与北京市不同城区德国小蠊对有机磷杀虫剂抗性的关系

目的研究羧酸酯酶在不同品系德国小蠊中的活性以及其在有机磷杀虫剂抗性形成中的作用。方法以对有机磷杀虫剂敏感品系(SS)及采自北京市宣武区(XW)、昌平区(CP)、顺义区(SY)和石景山区(SJS)的德国小蠊野外品系为试虫材料,利用生物测定、生化分析及增效剂试验等方法研究羧酸酯酶与德国小蠊对有机磷杀虫剂抗性的关系。结果增效剂TPP对马拉硫磷、敌敌畏的增效比在敏感品系中分别为1.86和1.51倍,TPP对马拉硫磷的增效比在XW、CP、SY和SJS品系中分别为5.79、20.08、15.26和4.74倍;TPP对敌敌畏的增效比在XW、CP、SY和SJS品系中分别为2.00、1.67、2.16和4.81倍。德国小蠊野外品系与敏感品系羧酸酯酶的米氏常数(Km)和最大反应速度(Vmax)之间差异有统计学意义,敏感品系羧酸酯酶的Km、Vmax分别为0.1580 mmol/L和58.4225μmol/(mg pro.min);野外品系(XW、CP、SY和SJS)羧酸酯酶的Km、Vmax分别为0.1279、0.1071、0.1080、0.1095 mmol/L和307.2550、338.5755、340.3300、212.4570μmol/(mg pro.min),2个品系的羧酸酯酶对马拉硫磷和敌敌畏的抑制作用也不同,2种有机磷药剂对敏感品系的抑制中量I50分别为17.64 mmol/L和0.91μmol/L,对野外品系(XW、CP、SY和SJS)的I50分别为80.48、35.49、83.24、82.29 mmol/L和15.35、7.89、11.52、8.60μmol/L。结论羧酸酯酶解毒代谢活性的增加是德国小蠊对有机磷杀虫剂产生抗性的机制之一。

羧酸酯酶与棉铃虫对有机磷杀虫剂抗性的关系

以对有机磷杀虫剂敏感的品系(SS) 和抗性的品系(R2) 为试虫材料, 利用生测和生化分析两种方法研究了羧酸酯酶在棉铃虫对有机磷杀虫剂抗性形成中的作用。结果表明: TPP对久效磷、辛硫磷的增效比在R2品系中分别为2.76 和2.46倍, 在SS品系中分别为1.85 和1.48 倍; 两品系羧酸酯酶的Km 和Vm ax之间存在显著的差异, R2 和SS品系羧酸酯酶的米氏常数Km 、Vm ax分别为76.74 μm ol/L、56.29 nm ol/ (m in·m g) 和107.39 μm ol/L、44.40 nm ol/ (m in·m g); 两品系的羧酸酯酶对TPP、久效磷和辛硫磷的抑制反应也不同,三种化合物对SS品系的抑制中量I50分别为39.21,68.80 和0.25 μg/m L, 对R2 品系的I50分别为62.95, 91.05 和0.41 μg/m L。由此认为: 羧酸酯酶解毒代谢活性的增加是棉铃虫对有机磷杀虫剂产生抗性的机理之一。

快速溶剂萃取-气相色谱法同时测定含脂羊毛中47种有机磷杀虫剂残留量的方法

建立了快速溶剂萃取-气相色谱法同时测定含脂羊毛中47种有机磷杀虫剂残留量的方法.结果表明:在0.1—10.0μg·ml-1范围内,47种有机磷杀虫剂的峰面积Y与其含量X的线性关系良好;除敌敌畏和亚胺硫磷外,其余45种有机磷定量检出限均为0.025mg·kg-1.大部分有机磷杀虫剂的回收率大于75%.

烟草中含硫有机磷杀虫剂残留量的测定

采用德国官方食品中农药残留量通用方法测定了239个国产烟叶、49个进口烟叶、12个进口卷烟样品中二嗪磷、甲基对硫磷、毒死蜱、马拉硫磷、杀螟硫磷、乙基对硫磷和倍硫磷的残留量。结果表明，国产烟叶样品中杀螟硫磷、马拉硫磷、乙基对硫磷和倍硫磷的检出率为0．8％-2．9％，未检出二嗪磷、甲基对硫磷和毒死蜱；进口烟叶和卷烟样品中未检出这7种含硫有机磷杀虫剂。

食品中有机磷杀虫剂残留分析方法的研究进展

对食品中有机磷杀虫剂(organophosphorus pesticides,OPPs)残留分析技术及其进展进行了综述。评述了前处理方法如固相萃取、基体固相分散萃取、超临界流体萃取、加速溶剂萃取、固相微萃取和液相微萃取等技术在分析中的应用。概述了气相色谱、液相色谱及其联用技术、免疫分析技术、超临界流体色谱和毛细管电泳等检测技术用于分析食品中OPPs的优势和局限性,并展望了未来该领域研究的发展趋势。

苹果黄蚜对常用有机磷杀虫剂的抗性监测

本文采用点滴法测定了山西省 3个地区苹果黄蚜对 6种有机磷杀虫剂的敏感性。结果表明 ,以晋中苹果黄蚜为相对敏感种群 ,忻州苹果黄蚜对辛硫磷、氧化乐果、马拉松、敌敌畏、杀螟松和水胺硫磷的抗性倍数分别为 :2 6 9倍、 0 81倍、 1 33倍、 2 70倍、 0 97倍、 0 73倍 ;运城苹果黄蚜对氧化乐果、马拉松、敌敌畏、杀螟松和水胺硫磷的抗性倍数分别为 :2 2 1倍、8 0 2倍、 4 73倍、 4 4 7倍、 3 91倍。采用同样的方法测定了晋中苹果黄蚜对齐螨素、吡虫啉、灭多威三种杀虫剂的敏感性。结果为 :齐螨素对苹果黄蚜的毒力最高 ,其次是吡虫啉。这 3种杀虫剂的毒力都明显高于有机磷杀虫剂 ,是目前田间防治苹果黄蚜的较理想药剂。

4-二甲氨基吡啶催化硫代磷酰化反应及其在有机磷杀虫剂合成中的应用

本文综述了酰化催化剂4-二甲氨基吡啶（DMAP）的特性和它对硫代磷酰化反应的催化作用，及其他在提高一些有机磷杀虫剂的缩合收率和产品纯度方面的应用。

固相微萃取(SPME)GC/MS、GC/MS/MS法检测环境水中的有机磷杀虫剂

目的 通过对固相微萃取 (SPME)条件的优化、筛选实验 ,建立环境水中有机磷杀虫剂的快速检验方法。方法 收集 17种有机磷杀虫剂 ,使用SPME并结合GC/MS、GC/MS/MS检验方法。结果 该方法简便、灵敏、迅速、可靠 ,样品利用率高 ,最低检测浓度为 0 .0 1～ 10 0 pg/ml,在痕量范围 0 .1～ 10ng/ml内线性回归好(相关系数r达 0 .99以上 )。结论 实际应用效果理想 ,有望成为公安、环保、检验检疫的农残及毒物分析中的一种快速有效的分析方法。

江苏省主要棉区棉铃虫对有机磷杀虫剂的抗性

采用点滴法,以在室内饲养的新疆阿拉尔地区棉铃虫作为相对敏感种群,对江苏省5个市(县)棉铃虫田间种群进行有机磷杀虫剂的抗药性测定。结果表明:江苏泗阳、东台、通州、六合和南京东郊等地棉铃虫对久效磷已产生中等水平的抗性,抗性倍数为126～386;南京郊区和泗阳棉铃虫对甲基对硫磷产生低水平抗性,抗性倍数为55～83;泗阳棉铃虫对辛硫磷敏感性下降,抗性倍数为30;而六合棉铃虫对辛硫磷已接近低水平抗性,抗性倍数为49。鉴此,还对有机磷杀虫剂在目前生产上的应用进行了讨论。

有机磷杀虫剂乐果对乙酰胆碱受体通道的阻断作用

在非洲有爪蟾蜍胚胎神经和肌肉细胞上，用膜片钳技术研究了有机磷杀虫剂乐果对乙酰胆碱受体（ＡＣｈＲ）通道的作用，发现它对自发微终板电流（ＭＥＰＣ）有双重作用，低剂量（２１．６μｍｏｌ／Ｌ）增加其幅度和频率，高剂量（２３７μｍｏｌ／Ｌ）则相反。１４６μｍｏｌ／Ｌ乐果缩短通道开放时间降低开放概率。对ＡＣｈＲ通道电流幅度和细胞膜钠、钾通道电流无影响。提示乐果为ＡＣｈＲ通道开放阻断剂。本实验从分子水平上为有机磷杀虫剂对ＡＣｈＲ的直接作用提供了依据。

有机磷杀虫剂的免疫毒性及其机制的研究进展

有机磷杀虫剂(OP)在世界范围内广泛用于防治植物病、虫害,它对人和动物的主要毒性来自抑制乙酰胆碱酯酶引起的神经毒性,同时还具有免疫毒性,影响免疫应答,抑制抗体产生和T细胞增殖,增加自身抗体,抑制自然杀伤(NK)细胞、细胞毒性T淋巴(CTL)细胞的活性。国内对有机磷杀虫剂免疫毒性机制的研究,尤其是对其抑制NK细胞溶细胞活性的机制研究还很少。现就国外关于OP的免疫毒性及其机制的研究进展作一综述。

昆虫对有机磷杀虫剂的抗性

有机磷杀虫剂在害虫的防治中多年来一直被作为一种有效的化学农药来使用。随着杀虫剂的大量使用,大部分害虫对这些杀虫剂产生了不同程度的抗性,导致杀虫剂剂量不断加大、防治效果降低,同时也造成了严重的环境污染。近年来,对昆虫有机磷杀虫剂抗性机制的研究发现,害虫对有机磷杀虫剂产生抗性的主要原因是由于其作用靶标物乙酰胆碱酯酶(AChE)对杀虫剂敏感性下降、AChE或普通酯酶活性上升等。本文就近年来国内外关于昆虫对有机磷杀虫剂抗性机制的研究进行综述,以期对害虫的抗性监测及抗性治理提供有用的参考。