佐剂性关节炎大鼠肾功能损伤及对肾脏有机阴离子转运体3表达的影响

目的研究佐剂性关节炎(AA)对大鼠肾脏功能和肾脏有机阴离子转运体3(OAT3)表达的影响。方法在大鼠右侧后足趾皮内注射弗氏完全佐剂建立AA模型。固定时间点收集大鼠血液和尿液,观察肾损伤指标的动态变化。通过肾脏的HE染色切片观察肾损伤情况。免疫组化和Western blot检测肾皮质OAT3蛋白和炎性因子白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平。结果与正常组相比,AA大鼠关节炎指数评分、继发性足爪肿胀、关节肿胀数、全身评分均显著增加(P<0.05)。X线检测结果显示,AA模型大鼠足爪骨关节出现软组织水肿以及骨畸形的特征。生化指标显示,AA大鼠的肾损伤指标出现明显异常。免疫组化与Western blot结果显示,AA大鼠肾皮质OAT3的表达水平显著降低,同时炎性因子IL-6、TNF-α和IL-1β的表达水平明显升高(P<0.05)。结论AA大鼠的肾功能损伤可能与肾脏OAT3的表达降低及炎性因子表达升高有关。

板蓝根及所含靛蓝和靛玉红强烈抑制小鼠肾主要有机阴离子转运体Oat1,Oat2和Oat3

目的探讨板蓝根颗粒剂(GRI)和饮片水煎剂(DRI)及其所含主要成分靛蓝和靛玉红对小鼠肾有机阴离子转运体(OAT)中3个主要亚型Oat1,Oat2和Oat3的影响。方法 NIH小鼠分别ig给予GRI0.615和2.460 g·kg-1,DRI 1.6和6.4 g·kg-1(生药量),靛蓝0.008和0.640 mg·kg-1,靛玉红0.0192和1.5360 mg·kg-1,每组60只(雌雄对半),每天2次,连续5 d。同时设丙磺舒(0.05 g·kg-1)阳性对照组和两种溶媒〔纯水和0.5%羧甲纤维素钠(CMC-Na)水溶液〕对照组及糊精加蔗糖(各1.5 g·kg-1)添加剂组。最后1次给予供试物后实施对-氨基马尿酸(PAH,iv,0.03 g·kg-1)清除实验,即在iv PAH后1.0,2.5,5.0,7.5,10.0和20.0 min时每组分别各取10只小鼠(雌雄对半),安乐处死收集全血制备血清,并迅速摘取双肾,右肾进行组织匀浆后测定PAH蓄积量,左肾组织用于提取总m RNA。每组另取10只小鼠(雌雄各半),同样给药处理,按Nakakariya法做肾切片进行摄取PAH实验。用Kiguchi法测定血清和肾组织匀浆液中PAH浓度。以药动学软件(DAS 2.0)计算血清及肾组织中PAH的主要药动学参数。以实时定量PCR法测定小鼠肾组织Oat1,Oat2及Oat3 m RNA表达。结果与纯水对照组比较,0.5%CMC-Na对照组各项检测指标均无显著差异。与两种溶媒对照组相比,GRI 2.460 g·kg-1,靛蓝0.640 mg·kg-1和靛玉红1.5360 mg·kg-1组消除半衰期(t1/2β)显著延长(P<0.05);各供试物组分布容积(Vd)和清除率(Cl)均显著减少(P<0.01),曲线下面积(AUC0→20 min)均显著增加(P<0.01);由采血时间段内各组肾组织中的PAH蓄积量所求得的AUC0→20 min显著大于同期对照组(P<0.05,P<0.01),且肾AUC0→20 min与血液AUC0→20 min的比值在各组间无显著差异。各剂量供试物均可使肾切片摄取PAH的量显著少于对照组(P<0.05,P<0.01)。与纯水/CMC对照组相比,GRI 2.460 g·kg-1,DRI 6.4 g·kg-1,靛蓝0.640 mg·kg-1,靛玉红1.5360 mg·kg-1组小鼠肾组织Oat1,Oat2及Oat3 m RNA表达除靛玉红组Oat2 m RNA(P<0.05)、GRI组Oat3 m RNA(P<0.01)表达水平被显著上调外,其余均被显著下调(P<0.05,P<0.01)。结论 GRI、DRI、靛蓝、靛玉红在所用剂量下对小鼠肾组织Oat1,Oat2及Oat3均有明显抑制作用,GRI和DRI的这种抑制作用可能主要来自其所含的靛蓝和靛玉红成分。

菊苣对高尿酸血症鹌鹑肾脏有机阴离子转运体OAT3-LIKE的影响

目的从肾脏转运蛋白角度探究中药菊苣降尿酸的药效机制。方法将40只雄性迪法克鹌鹑按体质量随机分为5组,正常组给予普通饲料,其余各组均给予含酵母饲料(15 g·kg-1·d-1)建立高尿酸血症模型,同时给药组分别给予菊苣5,7.5 g·kg-1·d-1,苯溴马隆20 mg·kg-1·d-1,实验第35天处死。检测鹌鹑血清尿酸(Uric Acid,UA)、尿素氮(Urea Nitrogen,BUN)水平,并用Real-time RT-PCR(Real-time Reverse TranscriptionPolymerase Chain Reaction)方法检测其肾脏有机阴离子转运体OAT3-LIKE(Organic Anion Transporter3-LIKE)的mRNA表达水平,同时测定肝脏尿酸代谢相关酶活性。结果与正常组比较,实验第21天、28天、35天模型组鹌鹑血尿酸升高,第35天肾脏OAT3-LIKE m RNA表达水平下降。与模型组比较,实验第35天,菊苣可以降低鹌鹑血尿酸水平,上调其肾脏OAT3-LIKE mRNA表达水平并降低肝脏腺苷脱氨酶(ADA)活性。结论高嘌呤食饵可以成功诱导鹌鹑高尿酸血症;菊苣具有抑制高尿酸血症鹌鹑尿酸生成和促进尿酸排泄的双重作用;菊苣药效机制可能与降低ADA活性及上调OAT3-LIKE表达水平相关。

肉桂等八种中药对小鼠肾脏三种主要有机阴离子转运体的影响

目的:检测8种具有肾毒性的中药对小鼠肾脏有机阴离子转运体(OATs)中3个主要亚型(Oat1,Oat2,Oat3)的影响。方法:肉桂等8种中药水煎剂(以高、低两个剂量)及纯水、丙磺舒(阳性对照)及羧甲基纤维素钠(CMC,丙磺舒溶媒)分别灌胃给NIH小鼠(每组雌雄各半),2次/d,连续5 d。最后一次给予供试品后1 h所有受试鼠逐一经尾静脉注入对氨基马尿酸(para-aminohippuric acid,PAH,30 mg/kg),然后在1、2.5、5、7.5、10、15和20 min时从各组分别取10只鼠安乐处死收集全血并迅速摘取双肾。匀浆各左肾(以Folin-酚法定量蛋白浓度)后以文献法定量其中及血清中的PAH浓度,以药动学软件(DAS2.0)分析血中PAH的主要药动学参数:消除半衰期(t1/2β)、分布容积(Vd)、总清除率(CL)及药时曲线下面积(AUC0-20 min);比较全部采血点中5个时间点(1、5、10、15、20 min)各组肾组织中的PAH蓄积量;从1 min采血点时的各组右肾提取总mRNA,以实时荧光定量PCR法比较各组小鼠肾脏中Oat1、Oat2、Oat3 mRNA的表达量。结果:与纯水组相比,益母草高剂量组,蜈蚣高、低剂量组的t1/2β显著延长(P<0.05,P<0.01),其余各组无明显改变(P>0.05)。除细辛低剂量组和益母草低剂量组外所有其他供试物组的Vd、CL和AUC0-20 min均发生显著变化:Vd变小(P<0.01),CL变慢(P<0.01),AUC0-20 min增大(P<0.01)。与纯水对照组相比,肾组织中的PAH蓄积量除冬虫夏草低剂量组、蜈蚣低剂量组外其余各组均显著升高(P<0.05,P<0.01)。与CMC组相比,丙磺舒组的mRNA表达量在Oat1、Oat3被显著上调(P<0.05,P<0.01),而在Oat2被显著下调(P<0.05);与纯水组相比,Oat1的mRNA表达水平在细辛、冬虫夏草、益母草、番泻叶、厚朴等各组被显著上调(P<0.05,P<0.01),而在蜈蚣组则被显著下调(P<0.05);肉桂、冬虫夏草、益母草、番泻叶、厚朴等各组的Oat2的mRNA表达量被显著上调(P<0.01);肉桂、厚朴两组的Oat3的mRNA表达水平被显著上调(P<0.01),而细辛、益母草、蜈蚣、苦参等组的Oat3的mRNA表达水平被显著下调(P<0.05,P<0.01)。结论:肉桂、细辛、益母草、番泻叶、苦参、厚朴、蜈蚣、冬虫夏草等8种肾毒性中药可能通过抑制有机阴离子转运体中的3个主要成员OAT1、OAT2、OAT3而导致肾损伤。

肾脏有机阴离子转运体在尿酸转运中的作用研究进展

尿酸是嘌呤核苷酸类和游离碱基转化过程中的最终酶产物,肾脏有机阴离子转运体在维持体内尿酸的重吸收与分泌之间的平衡有显著性意义。尿酸的重吸收和分泌失衡是导致高尿酸血症的主要原因。研究肾脏有机阴离子转运体在尿酸转运中的作用有重要意义。

常见可药/食用植物及其所含化学成分明显抑制小鼠肾脏主要有机阴离子转运体

目的检测市售主要草（凉）茶、植物瘦身产品、热带水果、热门中药等是否影响小鼠肾脏有机阴离子转运体（OAT）中3个主要亚型Oat1,Oat2和Oat3,以预测对患者的药物排泄是否产生可能的干扰.方法王老吉等5种凉茶、碧生源等4种减肥产品、清开灵等4种清瘟解毒复方中药以及上述产品的主要组成植物和它们所含有的部分化学成分的水溶液、以及荔枝等9种热带水果榨汁,分别以两种剂量经口投与NIH小鼠,每天2次连续5天.同时设丙磺舒阳性对照组和两种溶媒（纯水和05%羧甲基纤维素钠水溶液）对照组及糊精加蔗糖添加剂组.最后1次投与供试物后实施对-氨基马尿酸（PAH）清除试验：在静脉注射PAH后1.0、2.5、5.0、7.5、10.0及20.0min时从每组分别各取10只小鼠（♀♂对半）,安乐处死收集全血并迅速摘取双肾（右肾供匀浆后测定其PAH蓄积量,左肾供提取总mRNA）.另取NIH小鼠（♀♂对半,10只/组,供试物投与同前）,按Nakakariya法做肾切片摄取PAH试验.用Kiguchi法测定来自上述血清及肾匀浆液中的PAH浓度（以Folin酚法定量其蛋白含量）;以药动学软件（DAS20）计算血中PAH的主要药动参数;以实时定量PCR法定量小鼠肾脏Oat1,Oat2及Oat3的mRNA表达.结果与相应对照组比较,大部分供试物组（高剂量更明显）的消除半衰期（T1/2β）明显延长（P〈0.05～0.01）,且其分布容积（Vd）和清除率（CL）均明显减少（P〈0.05～0.01）而曲线下面积（AUC0→20min）则均明显增加（P〈0.05～0.01）.肾组织中的PAH蓄积量在所查时间段（ivPAH后1～20min）大部分供试物组（高剂量更明显）均明显高于相应对照组（P〈0.05～0.01）.肾切片摄取PAH的结果在大部分供试物组（高剂量更明显）均明显低于相应对照组（P〈0.05～0.01）.与对照组相比,大部分供试物组小鼠的Oat1、Oat2及Oat3的mRNA表达均明显异常（P〈0.05～0.01）.结论大部分供试物（高剂量更明显）在本实验条件下对小鼠肾脏Oat1、Oat2及Oat3均有明显抑制作用,提示上述供试物对患者的药物排泄过程可能产生明显干扰,故服药期间需谨慎食用它们.

缩泉丸和真武汤对小鼠肾脏有机阴离子转运体Oat1和Oat3的影响

目的初步检测缩泉丸和真武汤对小鼠肾脏有机阴离子转运体（Oats）中的2个主要亚型（Oat1,Oat3）的影响。方法以缩泉丸和真武汤及方中各药水煎剂、丙磺舒、氢氯噻嗪给NIH小鼠灌胃,每天2次,连续5 d,另设纯水对照组。末次给药后所有受试鼠逐一经尾静脉注入对氨基马尿酸（para-aminohippuric acid,PAH）30mg·kg^-1,然后在1,2.5,5,7.5,10,15,20 min时分别从各组各取10只小鼠处死收集全血,并迅速摘取双肾,测定血清及肾匀浆液中的PAH浓度,以药动学软件（DAS2.0）求出血清及肾组织匀浆液中PAH的主要药动学参数：消除半衰期（t1/2β）,分布容积（Vd）,清除率（CL）和药-时曲线下面积（AUC0-20 min）;从各组右肾提取总mRNA,以实时荧光定量PCR法比较小鼠肾脏中Oat1、Oat3 mRNA的表达量。另从各组各取10只小鼠,末次给药后1 h,断头处死后,取右肾做肾切片摄取PAH试验。结果与纯水对照组比较,真武汤组、茯苓组t1/2β显著延长（P〈0.01）,缩泉丸、乌药、附子各组t1/2β显著缩短（P〈0.05,P〈0.01）;缩泉丸、益智仁、山药、真武汤、白芍、生姜、茯苓各组Vd显著降低（P〈0.05,P〈0.01）,附子组Vd升高（P〈0.01）;缩泉丸、山药、真武汤、白术、生姜、茯苓各组CL均显著降低（P〈0.05,P〈0.01）;除益智仁、白芍、茯苓各组AUC0-20 min无显著变化外（P〉0.05）,其他供试物组均显著增大（P〈0.01）。各供试物组肾脏与血清AUC0-20 min比值均在0.247~0.475之间,与纯水对照组相似;肾切片摄取PAH试验显示,与纯水对照组比较,缩泉丸、乌药、山药、真武汤、白术、白芍、附子、生姜、茯苓各组摄取PAH量明显降低（P〈0.05,P〈0.01）。与纯水对照组比较,益智仁组、附子组小鼠肾脏Oat1 mRNA表达水平显著上调（P〈0.01）,而缩泉丸组、真武汤组Oat1 mRNA表达水平则显著下调（P〈0.01）;缩泉丸、益智仁、附子各组小鼠肾脏Oat3 mRNA表达水平显著上调（P〈0.01）,而真武汤组Oat3 mRNA表达水平则显著下调（P〈0.01）。结论缩泉丸及其君药益智仁、真武汤及其君药附子可能通过影响有机阴离子转运体的2个主要成员Oat1,Oat3的表达导致肾脏损伤。

新疆地区维吾尔族和汉族冠心病合并血脂异常患者有机阴离子转运体家族1B1*5基因多态性分析

目的分析有机阴离子转运体家族1B1(SLCO1B1)~*5基因型和等位基因在新疆地区维吾尔族和汉族冠心病(冠状动脉粥样硬化性心脏病)合并血脂异常患者中的分布特征,为制定他汀类药物个体化用药方案、提高调脂疗效、降低不良反应发生率提供用药依据。方法选取2017年7月至2019年8月就诊于新疆维吾尔自治区人民医院的冠心病合并血脂异常维吾尔族和汉族患者。采用荧光原位杂交技术检测患者SLCO1B1*5基因多态性,采用Hardy-Weinberg平衡检验样本的群体代表性,分析新疆地区维吾尔族和汉族患者SLCO1B1*5基因型和等位基因频率的差异。结果本研究共纳入720例冠心病合并血脂异常患者,其中维吾尔族311例(43.2%)、汉族409例(56.8%)。维吾尔族和汉族患者SLCO1B1*5基因型和等位基因分布频率均符合Hardy-Weinberg平衡定律(均P> 0.05),研究对象具有群体代表性。维吾尔族患者SLCO1B1*5基因型CC、CT、TT的分布频率分别为0.6%(2/311)、19.9%(62/311)、79.4%(247/311),等位基因C、T频率分别为10.6%(66/622)、89.4%(556/622)。汉族患者SLCO1B1*5基因型CC、CT、TT的分布频率分别为1.5%(6/409)、20.8%(85/409)、77.8%(318/409),等位基因C、T频率分别为11.9%(97/818)、88.1%(721/818)。新疆地区维吾尔族和汉族冠心病合并血脂异常患者SLCO1B1*5基因型和等位基因频率差异均无统计学意义(χ^(2)=1.093,P=0.548;χ~2=0.621,P=0.459)。结论根据SLCO1B1*5基因多态性为维吾尔族、汉族冠心病合并血脂异常患者制定他汀类药物个体化用药方案时,无需考虑民族间差异性。

有机阴离子转运体1B1与载脂蛋白E基因多态性分布及对服用瑞舒伐他汀的风险评估

目的:分析有机阴离子转运体1B1(SLCO1B1)与载脂蛋白E(ApoE)基因多态性分布及其对瑞舒伐他汀使用风险的评估价值。方法:选取2017年4月至2020年2月,我院心血管内科收治的高脂血症患者108例,均口服瑞舒伐他汀钙片10 mg/次,1次/d,睡前服用。采用纳米磁珠法提取全血基因组DNA,应用聚合酶链反应(PCR)-焦磷酸测序法测定SLCO1B1与ApoE基因多态性,比较不同SL-CO1B1基因型、不同ApoE基因型患者服药前后TC、TG、HDL-C、LDL-C水平和不良反应发生率。结果:SLCO1B1(521T>C)基因型分布为TT 73.15%、TC 23.15%、CC 3.70%;ApoE基因型分布为ε3/ε364.81%、ε2/ε312.96%、ε3/ε417.59%、ε4/ε44.64%,未见ε2/ε2、ε2/ε4基因型;服药6周后,TC型、CC型TC、LDL-C水平低于TT型,TC型、CC型HDL-C高于TT型(P<0.05),三种基因型患者TG比较,差异无统计学意义(P>0.05);ApoE基因型中,ε3/ε3型服药后TC、LDL-C高于其他基因型(P<0.05),四种基因型TG、HDL-C比较,差异无统计学意义(P>0.05);TC型、CC型肌痛发生率高于TT型,ε2/ε3型头痛、恶心、腹痛、瘙痒发生率高于其他基因型(P<0.05)。结论:SLCO1B1、ApoE基因多态性分布与瑞舒伐他汀疗效和安全性有一定关联,检测SLCO1B1与ApoE基因型有助于进行疗效预测和风险评估,实现个体化给药。

疾病状态下有机阴离子转运体表达和功能的变化及其机制研究进展

有机阴离子转运体属于溶质转运体22亚家族成员,是一类重要的摄取类转运体,其有多个亚型。有机阴离子转运体在体内介导多种小分子内源性物质的转运,起到维持机体内环境稳态的作用。此外,临床上许多药物也是有机阴离子转运体的底物。研究表明某些疾病可能导致有机阴离子转运体表达和功能的异常改变,进而影响药物的疗效或导致机体内源性物质水平紊乱。对有机阴离子转运体的分布和功能进行简要介绍,并综述了疾病状态下有机阴离子转运体表达和功能变化及其机制的研究进展。

10种肾毒性中药对小鼠肾脏有机阴离子转运体的影响

目的:研究10种肾毒性中药对小鼠肾脏有机阴离子转运体(Oats)中3个主要亚型(Oat1、Oat2、Oat3)的影响。方法:1 840只SPF级NIH小鼠随机分为正常对照(等容纯水)组,丙磺舒(30 mg/kg)组,羧甲基纤维素钠(CMC-Na)组与白头翁、延胡索、草乌、川乌、独活、皂角刺、虎杖、甘遂、侧柏叶、木香水煎剂高、低剂量组,ig给药,bid,连续5 d。末次给药1 h后,尾iv给予对氨基马尿酸(PAH,30 mg/kg),测定小鼠肾脏匀浆中PAH药动学参数与在1、5、10、15、20 min时间点的肾组织中PAH的蓄积量。用DAS 2.0分析软件计算血中PAH的药动学参数。分组与给药同上,末次给药1 h后制作肾切片置于PAH-buffer中,测定肾切片PAH摄取量。结果:与正常对照组比较,延胡索高剂量组,草乌高、低剂量组,独活高剂量组,虎杖高、低剂量组,侧柏叶高剂量组t1/2β升高;10种中药高、低剂量组Vd均降低;除独活低剂量组、皂角刺低剂量组、甘遂低剂量组外,其余用药组的CL均降低、AUC0-20 min均升高,差异均具有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。与正常对照组比较,白头翁高剂量组,延胡索高剂量组,草乌高剂量组,川乌高、低剂量组,独活高、低剂量组,皂角刺高、低剂量组,虎杖高、低剂量组,甘遂高、低剂量组,侧柏叶高、低剂量组,木香高、低剂量组小鼠肾组织PAH蓄积量增加,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。与正常对照组比较,延胡索高剂量组,草乌高、低剂量组,皂角高、低剂量组,甘遂高剂量组,侧柏叶高、低剂量组,木香高剂量组小鼠肾切片PAH摄取量减少,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论:10种肾毒性中药可能通过抑制有机阴离子转运体Oat1、Oat2、Oat3而导致肾损伤。

小檗碱对有机阴离子转运体抑制作用及双向跨膜转运研究

目的研究小檗碱对有机阴离子转运体(OATs)的抑制作用及其双向跨膜转运情况。方法应用由转染试剂Lipo3 000介导的动物细胞转基因方法、经筛选得到人有机阴离子转运体OAT1、OAT2、OAT3、OAT4、OAT7和URAT1高表达单克隆细胞株;以野生型(WT)细胞为对照组,用各转运体放射性同位素标记底物和抑制剂验证其转运活性;观察100μmol/L小檗碱对各转运体的抑制作用,并测定小檗碱对URAT1转运活性的半数抑制浓度(IC50)。通过Caco-2细胞模型研究小檗碱的双向跨膜转运情况。结果 100μmol/L小檗碱使OAT1、OAT2、OAT3、OAT4、OAT7和URAT1相对转运活性分别下降至(70.48±4.23)%、(69.13±1.28)%、(72.12±3.28)%、(79.77±6.49)%、(69.51±5.99)%、(38.4±2.67)%;小檗碱对URAT1抑制作用的IC50为13.6μmol/L;在50和100μmol/L浓度下,小檗碱在顶侧(AP侧)-基底侧(BL侧)方向的跨膜渗透率Papp(A-B)分别为0.28×10-6 cm/s和0.40×10-6 cm/s,其相对应的外排率分别为3.18和3.15。结论小檗碱对URAT1的抑制作用较强,对OAT1、OAT2、OAT3、OAT4、OAT7抑制作用相对较弱,小檗碱是一些外排蛋白的底物,为预测小檗碱可能发生的药物-药物相互作用、解释生物利用度低提供了理论依据。

有机阴离子转运体1抑制剂筛选模型的构建及应用

目的建立能稳定表达有机阴离子转运体1(organic anion transporter,OAT1)的马丁达比狗肾上皮(Madin-Darby canine kidney,MDCK)细胞转基因细胞模型,利用该模型初步筛选OAT1的抑制剂。方法采用脂质体转染法将质粒pcDNA3.1(+)通过Lipofectamine^(TM)2000转染试剂转染MDCK细胞,并经G418筛选获得阳性克隆。通过OAT1的经典底物6-羧基荧光素(6-carboxyfluorescein,6-CFL)在单克隆细胞内的积聚量以及中药单体存在时细胞内的积聚量来检测OAT1的活性。实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-tinle PCR)检测OAT1的mRNA的表达量。利用稳定细胞株,研究了6-CFL在MDCK-mock和MDCK-OAT1细胞中的摄取、中药单体对6-CFL摄取的抑制特性。结果 qRT-PCR结果表明,所建立的MDCK-OAT1细胞与mock细胞相比,OAT1 mRNA相对表达量为后者的4 862倍,摄取6-CFL的能力为后者的14.9倍。6-CFL在细胞株中摄取的K_m值为42.36μmol·L^(-1),部分中药单体能显著抑制MDCK-OAT1转运6-CFL的能力。结论 OAT1抑制剂筛选模型构建成功,并能快速有效地筛选出对OAT1有潜在抑制作用的中药单体,为后期的基于OAT1的植物-药物相互作用提供实验基础。

有机阴离子转运体1B1和1B3基因多态性对肾移植受者血麦考酚酸浓度的影响

目的探讨有机阴离子转运体1B1和1B3（编码基因分别为SLCO1B1和SLCO1B3）基因多态性对肾移植受者血麦考酚酸（MPA）浓度的影响。方法用聚合酶链反应一连接酶检测反应法对68例汉族肾移植受者的SLCO1B1和1B3基因进行单核苷酸基因多态性（SNP）检测，分别检测SLCO1B3 T334G和SLCO1B1 A338G的突变位点。术后第28天，收集受者血浆检测MPA浓度。比较各基因型受者的MPA浓度-时间曲线下面积（AUC0-12），分析单核苷酸多态性与MPA AUC0-12：之间的相关性。结果SLCO1B3T334G位点GG基因型受者的MPA AUG0-12高于TT基因型受者，分别为（54．54±14．40）mg·h·L^-1和（37．30±12．88）rng·h·L^-1（P=0．052）；SLC0181A338G位点的各个基因型受者之间MPA AUC0-12比较，差异均无统计学意义（P〉O．05）。结论SLCO1B3基因多态性对肾移植受者术后血MPA浓度的个体间差异产生明显影响。

有机阴离子转运体1和3在不同药性中药成分跨膜转运中的作用

目的研究有机阴离子转运体1和3(OAT1、OAT3)在不同药性(苦、辛、酸、甘)中药成分的跨膜转运过程中的作用。方法建立OAT1、OAT3过表达单克隆细胞株(MDCK-OAT1、S2-OAT3),通过100μmol·L^(-1)不同药性成分对OAT1、OAT3介导放射性标记探针底物转运活性的影响,预测各药性成分对OAT1、OAT3的抑制作用;测定不同药性成分对OAT1、OAT3的抑制作用的半数抑制浓度(IC_(50));测定OAT1、OAT3过表达细胞株(MDCK-OAT1、S2-OAT3)和空白对照(MDCK-Mock、S2-Mock)对不同药性中药成分的摄取情况,判断各药性成分是否为OAT1、OAT3的底物,从而预测OAT1、OAT3在不同药性成分跨膜转运中的作用。结果 100μmol·L^(-1)的辛味药和酸味药对OAT1和OAT3有较强的抑制作用,其中川陈皮素、没食子酸、原儿茶酸和β-甘草次酸对OAT1抑制作用的IC_(50)分别是1. 86,2. 88,4. 58和10. 43μmol·L^(-1);欧前胡素、没食子酸、原儿茶酸和β-甘草次酸对OAT3抑制作用的IC_(50)分别是3. 15,3. 39,3. 69和3. 93μmol·L^(-1)。与空白对照相比,OAT1转运体细胞对延胡索乙素、川陈皮素、欧前胡素和异欧前胡素具有较强的摄取能力; OAT3对延胡索乙素、原阿片碱、川陈皮素、欧前胡素和异欧前胡素具有较强的摄取能力。结论多数辛味药为OAT1、OAT3的转运底物,因此OAT1、OAT3对多数辛味药具有较强的摄取能力;而多数的酸味药为OAT1、OAT3的抑制剂,能够抑制OAT1、OAT3对其他底物的转运活性。

有机阴离子转运体研究的最新进展

有机阴离子转运体(organic anion transporter,OAT)亚家族是溶质转运体22(solute carrier 22,SLC22)家族中的重要组成部分,在包括肝脏、肾脏、脑及胎盘等在内的多种组织脏器中表达。因其能够介导许多常见药物(抗生素、抗病毒药、利尿药和非甾体类抗炎药)、毒素以及营养物质在机体内的排泄而受到了广泛的关注。近年来,在Oat1和Oat3基因敲除鼠的代谢组学和微阵列数据以及系统生物学的研究表明,OAT通路在处理肠道微生物代谢和肾脏疾病状态下发挥着非常重要的作用。核受体和其他转录因子会与Ⅰ相和Ⅱ相药物代谢酶结合并调节特定OATs的表达。"远端遥感和信号通路假说"表明,OATs能在许多组织中表达并且转运多种信号分子。一些OATs对于特定的信号分子,如环核苷酸、尿酸和前列腺素等还具有高度的选择性,因此可以有效的介导多种器官、组织及细胞间的信息交流。OATs在正常情况及急慢性病理条件下,在内外源物的转运中起到重要作用。

有机阴离子转运体1B1基因与新生儿黄疸关系的研究进展

有机阴离子转运体2(OATP2)是一种肝细胞膜上转运胆红素等物质的转运体,影响胆红素的代谢。OATP2由有机阴离子转运体1B1(SLCO1B1)基因编码,该基因突变可抑制OATP2的转运功能,致胆红素清除减慢,引起高胆红素血症。近年的研究显示,SLCO1B1基因多态性可能与新生儿黄疸发生相关。该文综述了SLCO1B1基因结构、功能及SLCO1B1基因突变与新生儿黄疸的关系。

肾脏有机阴离子转运体介导的中药肾毒性研究进展

随着人们对中药的深入了解,中药的毒性和安全性备受关注。在中药所致毒性的范畴中,肾毒性是重中之重,因此,降低中药的肾毒性对于合理使用中药具有重要意义。药物转运体在药物的跨膜转运中起着关键作用,影响药物的吸收、分布、代谢和排泄。其中,有机阴离子转运体(OATs)主要表达于肾组织,负责阴离子和两性离子有机分子的跨膜运输。诸多中药成分能够影响OATs的表达或功能,从而改变药物在肾脏的分布,致使有毒物质蓄积,最终引发肾毒性。从OATs在肾脏中的作用、OATs参与转运的肾毒性中药及调控OATs表达的中药等方面对肾脏OATs介导的中药肾毒性研究进行综述。

有机离子转运体mRNA在人牙龈成纤维细胞上的表达

目的:检测有机阳离子转运家族及有机阴离子转运家族在人牙龈成纤维细胞的表达,并探讨其在人牙龈成纤维细胞主动转运中的作用。方法:采用RT-PCR法检测有机阳离子转运体家族成员OCT1-3,OCT6,OCTN1-2及有机阴离子转运体家族成员OAT1-4的mRNA在人牙龈成纤维细胞上的表达,其中检测OAT1-4时以人肾组织作阳性对照。结果:人牙龈成纤维细胞有OCT1、OCT2、OCTN1及OAT1-4mRNA的表达。结论:证实了人牙龈成纤维细胞存在有机阳离子转运体及有机阴离子转运体的推测。

有机阴离子转运多肽OATP1A2介导芬太尼的转运

目的:建立稳定表达有机阴离子转运多肽1A2(organic anion-transporting polypeptide 1A2,OATP1A2)的HEK293细胞株,体外研究OATP1A2是否转运芬太尼(Fentanyl)。方法:用脂质体转染法将pIRES2-Zs Green1-OATP1A2质粒转染至HEK293细胞中,G418(600 mg/ml)筛选单克隆阳性细胞,采用Western blot、RT-PCR证实HEK293-OATP1A2构建成功;用不同浓度的探针药物非索非那定(Fexofenadine,FEX)验证HEK293-OATP1A2的转运功能;运用不同浓度的芬太尼孵育细胞,另取两组用相同浓度的芬太尼孵育的细胞,分别加或不加抑制剂柚皮素(Naringenin,100μg/m L)进行HEK293-OATP1A2转运实验。结果:FEX浓度为1、10、100 nM时HEK293-OATP1A2实验组与HEK293-VC对照组,FEX的吸收值均有显著的统计学差异(P<0.05),且FEX浓度为100 nM时,实验组对FEX的吸收值是对照组的2.8倍;加入抑制剂柚皮素组FEX吸收值较不加抑制剂时减少了66.8±0.6%。芬太尼转运结果显示,芬太尼浓度为1、10、100、1000 nM时实验组与对照组比较,芬太尼的吸收值均有显著的统计学差异(P<0.05),且芬太尼浓度为1000 nM时,实验组对芬太尼的吸收值是对照组的2.2倍;加入抑制剂组芬太尼的吸收值较未加抑制剂组减少了86.5±0.5%(P<0.05)。结论:成功建立了稳定表达OATP1A2的HEK293细胞株,体外研究发现OATP1A2能介导芬太尼的转运。