有核细胞净化器用于恶性肿瘤患者术中回收血液的可行性研究

目的测定新型有核细胞净化器能否完全清除和破坏回收血液内的肿瘤细胞。方法选择临床肝癌等患者20例，术前安装血液回收机回收术中失血，洗涤后使用有核细胞净化器处理；分别测定处理前后血液内有核细胞、红细胞数量，并观察有核细胞的形态；免疫荧光染色法测定血液内肿瘤细胞和干细胞，细胞培养法测定血液内有核细胞的活性和增殖能力；取净化器膜做光镜和电镜检测。结果有核细胞净化器的红细胞回收率达到（93．9±3．4）％，对有核细胞的去除率为4log，剩余的10^5／L有核细胞中，90％为裸露细胞核。光镜和电镜结果显示：第1层净化器膜上部黏附大量已被破坏的有核细胞，第2—15层未见完整有核细胞。免疫荧光显示：20名患者处理前的血液内均含有约10^4／L的肿瘤细胞，其中50％为CK19＋／CD133＋细胞，80％的患者细胞培养阳性；而处理后的血液内均未找到肿瘤细胞，也无细胞贴壁生长。结论该有核细胞净化器红细胞回收率高，它不仅能够使200ml回收血液内的有核细胞下降5个log，而且能够破坏有核细胞的细胞膜；未被清除的细胞因被破坏和／或缺乏粘附活性也不能够生存，因此这种有核细胞净化器能够安全用于恶性肿瘤手术的血液回收。