成人成牙本质细胞原位培养的初步研究

目的:建立成人成牙本质细胞原位培养模型。方法:取20～30岁成人新鲜、健康、完整的第三磨牙30颗,随机分为拔髓实验组、有血清培养组和无血清培养组,每组各10颗。冠根分离,拔髓,将成牙本质细胞保留在牙冠上,进行有血清和无血清的原位培养,每天换液,连续培养7d。通过光镜检测细胞保留情况,扫描电镜检测细胞形态和分布特征,台盼蓝检测细胞活性,对模型进行鉴定。结果:室温拔髓后,成牙本质细胞保留在髓室壁上,在7d的培养过程中细胞有活性,形态保持良好。结论:采用有血清和无血清培养,均可建立成人成牙本质细胞培养模型。

比较不同培养基培养脐带间充质干细胞

目前的培养体系和培养方法中通常采用的是含10%~20%胎牛血清的培养基,但含血清培养基使临床细胞治疗受到限制,存在不安全因素。通过对脐带间充质干细胞在IMDM、DMEM/F12(不含酚红)及无血清培养基StemPro R MSC SFM的培养扩增,比较三种培养体系的优略。建立从减血清到无血清的培养体系,减少血清对临床细胞治疗的干扰,提高临床细胞治疗的稳定性与安全性。

无血清悬浮MDCK细胞技术培养不同基因型流感病毒的最佳培养条件

目的探索无血清悬浮(SFM)MDCK细胞技术培养不同基因型流感病毒的最佳培养条件。方法以SFM-MDCK细胞以及有血清培养基(FBS)-MDCK细胞为介质,比较两种技术的稳定性以及阳性培养率。对不同基因型流感病毒的培养条件进行优化,确定最佳培养温度、pH值、TPCK胰酶添加浓度及作用时间。结果MDCK细胞在SFM中的生长状态优于FBS,在第3至4天MDCK细胞生长最旺盛,活细胞比率最高。H1N1、H3型流感病毒在34℃、35℃培养时获得的病毒血凝滴度较高,BV、BY型流感病毒在34℃培养时获得的病毒血凝滴度较高。当TPCK-胰酶浓度为10、20μg/ml时获得的H1N1、H3、BV、BY型流感病毒血凝滴度较高。吸附时间为1.5、2 h时获得的BY型流感病毒血凝滴度较高,吸附时间为1、1.5、2 h时获得的H1N1、H3型流感病毒血凝滴度较高。SFM的阳性率为91.23%(104/114),高于FBS的79.82%(91/114),差异有统计学意义(χ^(2)=9.327,P=0.014)。FBS与SFM培养各亚型流感病毒的血凝滴度比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论SFM分离病毒的阳性率和血凝滴度均高于FBS,应针对不同流感病毒亚型建立实验室最佳培养条件,得到更高载量的病毒样本。

不同培养基分离流感病毒效果及最佳培养条件

目的比较有血清培养基与无血清培养基分离流感病毒的效果,探索无血清培养基分离流感病毒的最佳条件。方法将原始标本接种于2种培养基培养的MDCK细胞,比较流感病毒分离效果。将原始标本接种于无血清培养基培养的MDCK细胞,比较MDCK细胞、样品液、接种方法、胞龄、培养温度、无血清病毒分离液含TPCK-胰酶浓度对流感病毒的影响,确定最优培养条件,红细胞凝集试验测血凝滴度。结果 2种培养基分离流感病毒的阳性率差异与血凝滴度差异有统计学意义(P<0.05);无血清培养基的细胞不洗涤、24 h与48 h胞龄、直接接种、2μg/ml^3μg/ml TPCK-胰酶、34.5℃培养条件下病毒血凝滴度较高。结论无血清培养基分离流感病毒优于有血清培养基且操作简便。