三波长切换法同时测定仙灵骨葆胶囊中淫羊藿苷等5种活性成分含量

目的建立三波长切换法同时测定仙灵骨葆胶囊中淫羊藿苷等5种活性成分含量的方法。方法采用Waters Atlantis T3 C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);以乙腈(A)-0.05%甲酸溶液(B)为流动相进行梯度洗脱(0~5 min,12%~20%A;5~15 min,20%~55%A;15~35 min,55%A;35~55 min,55%~76%A;55.1 min,12%A;55.1~60 min,12%A);检测波长:0~30 min为212 nm,>30~42 min为246 nm,>42~60 min为270 nm;柱温:30℃;流速:1.0 m L/min。结果川续断皂苷Ⅵ、补骨脂素、异补骨脂素、朝霍定C、淫羊藿苷分别在101.6~3048 ng、8.7~261 ng、7.9~237 ng、117.2~3516 ng、78~2340 ng范围内线性关系良好;仪器精密度、稳定性、重复性试验中RSD均小于3%;平均回收率分别为99.83%、100.35%、100.59%、100.60%、99.72%,RSD均小于3%。结论该测定方法准确度、灵敏度高,分离效果理想,可为完善仙灵骨葆胶囊质量评价标准提供依据。

4种淫羊藿黄酮苷类主要成分体外药理活性比较

为了比较淫羊藿黄酮苷类4种主要成分朝藿定A,朝藿定B,朝藿定C和淫羊藿苷的抗菌、抗氧化和抗肿瘤活性,采用滤纸片扩散法和双倍稀释法测定四者对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果和最小抑菌浓度(MIC),对其抗菌活性进行评价.采用紫外可见分光光度计测定其清除自由基能力(DPPH和ABTS),对其抗氧化活性进行评价.采用CCK-8法测定其对BEL-7402细胞增殖和活性氧(ROS)含量的影响,对其抗肿瘤活性进行评价.研究发现,朝藿定A和淫羊藿苷对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌表现出明显的抑菌活性,朝藿定B和朝藿定C均无明显抑菌活性.抗氧化活性:淫羊藿苷>朝霍定C>朝霍定A>朝霍定B,表明淫羊藿苷结构C3位鼠李糖基上进行糖基取代会减弱其抗氧化性.朝藿定A、B、C和淫羊藿苷均能抑制BEL7402细胞的增殖,相同浓度比较,朝藿定C和淫羊藿苷有更加明显的抑制作用,且抑制作用呈浓度依赖性.进一步检测对ROS含量影响,表明朝霍定C可能是通过调节细胞内ROS的含量诱导BEL-7402细胞死亡.项目采用生物活性为导向筛选,为淫羊藿黄酮苷化合物药用价值的利用提供依据.

提高黔淫羊藿的质量标准研究

目的 进一步完善黔淫羊藿的质量标准。方法 对黔淫羊藿进行显微鉴别,按2020年版《中华人民共和国药典》(四部)相应方法对水分、灰分及浸出物进行测定,优化薄层色谱法(TLC),用高效液相色谱法(HPLC)对淫羊藿苷和朝藿定C进行含量测定。结果 显微鉴别特征明显;供试品薄层色谱中,在与对照品相应位置显相同颜色的斑点;水分含量为9.23%~9.97%;总灰分含量为5.20%~6.89%;浸出物含量为12.42%~25.10%;淫羊藿苷和朝藿定C的质量浓度分别在2.50~49.95、10.27~205.38μg·mL范围内与其峰面积值呈良好的线性关系(R^(2)=0.999 9),朝藿定C的平均回收率为101.6%,RSD=0.22%;淫羊藿苷的平均回收率为93.72%,RSD=0.21%。结论 修订后的质量标准更加完善,薄层鉴别方法专属性强,HPLC法精密度高,重复性好,可用于黔淫羊藿的质量控制。