朝鲜白头翁(Pulsatilla Koreana Nakai)不同组织的解剖结构研究

以朝鲜白头翁的叶片、叶柄和诱导的分生结节为材料,进行组织解剖结构研究。结果显示,朝鲜白头翁木质部细胞呈"V"字型排列,维管束呈三角形排列,外包有维管束鞘。分生结节的结构表明,初期的分生结节细胞排列较紧密,没有明显的内部结构;进一步培养,内部分化形成多个维管组织中心,染色较深的中心由垂周分裂的小细胞组成,周围分布着大小不等的导管细胞或管胞成分;维管束进一步分化发生器官分化,分生结节脱分化形成胚性愈伤组织并形成体细胞胚。

朝鲜白头翁的三萜皂苷成分研究

目的 研究朝鲜白头翁 [Pulsatillacernua(Thunb .)Bercht.etOpiz.]根茎的化学成分。方法 朝鲜白头翁根茎的乙醇提取物经大孔树脂、硅胶、ODS柱以及HPLC分离得到 6个化合物 ,通过波谱 (1H ,13CNMR ,FAB MS等 )分析和化学方法进行结构鉴定。结果 6个化合物分别被鉴定为 pulsatillasaponinA(1) ,常春藤皂苷元 3 O β D 吡喃葡糖 (1→ 3) α L 吡喃鼠李糖 (1→ 2 ) α L 吡喃阿拉伯糖苷 (2 ) ,pulsatillasaponinD(3) ,dipsacosideB(4 ) ,3 O α L 吡喃鼠李糖 (1→ 2 ) [β D 吡喃葡糖 (1→ 4) ] α L 吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷元 2 8 O β D 吡喃葡糖酯苷 (5 )和胡萝卜苷 (6 )。结论 5为新化合物 ,命名为朝鲜白头翁丙苷 (cernuosideC)。2 ,4和 6为首次从朝鲜白头翁中分离获得。

朝鲜白头翁总皂苷提取工艺的优化

目的：通过单因素和正交试验优化朝鲜白头翁中总皂苷的超声波提取工艺。方法：以白头翁皂苷B4为对照品,采用分光光度法进行含量测定。结果：确定皂苷的最大吸收波长为470 nm,皂苷含量在0-0.040 mg/mL范围内与吸光度呈良好线性关系。最佳提取工艺为：乙醇浓度80%,超声时间40 min,料液比1∶20,超声功率80W,提取1次。其中乙醇浓度对总皂苷提取影响最大,此工艺条件下朝鲜白头翁中总皂苷含量为4.32%。结论：该方法提取效率高、稳定、准确、重现性好。

朝鲜白头翁化学成分的研究

目的研究毛茛科白头翁属植物朝鲜白头翁Pulsatilla koreana根茎中的化学成分。方法利用硅胶柱、反相硅胶柱,葡聚糖凝胶LH-20、大孔树脂柱、制备高效液相分离纯化,并通过波谱解析和化学方法进行结构鉴定。结果从朝鲜白头翁根茎中得到11种化合物,分别为3-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅰ)、3-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤苷元-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅱ)、3-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅲ)、3-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷元-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅳ)、3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(12)[β-D-吡喃葡萄糖(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅴ)、3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤苷元-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅵ)、3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅶ)、3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤苷元-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅷ)、齐墩果酸-3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(Ⅸ)、常春藤苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(Ⅹ)、常春藤皂苷元-3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(Ⅺ)。结论化合物Ⅲ为首次从该属植物中分离得到,Ⅺ为首次从该植物中分离得到。

循环制备HPLC分离纯化朝鲜白头翁中三萜皂苷

目的研究分离纯化朝鲜白头翁中三萜皂苷的新方法。方法利用溶剂提取法、柱色谱法及循环制备HPLC进行分离纯化。结果从朝鲜白头翁中分离得到4个化合物,分别鉴定为:3-O-α-L-rhamnopyranosyl(1→2)[β-D-glucopyranosyl(1→4)]-α-L-arabinopyranosyl hederagenin28-O-α-L-rhamnopyranosyl(1→4)-β-D-glucopy-ranosyl(1→6)-β-D-glucopyranoside(Ⅰ)、cernuosides A(Ⅱ)、cernuosides B(Ⅲ)、oleanolicacid28-O-α-L-rhamnopyranosyl(1→4)-β-D-glucopyranosyl(1→6)-β-D-glucopyranoside(Ⅳ)。结论化合物Ⅳ为首次从该属植物中分离得到,此外循环制备HPLC可作为天然产物、合成医药研究的有效手段。

朝鲜白头翁种子后熟调控和育苗关键技术研究

目的：以朝鲜白头翁种子为供试材料,筛选并确定调控朝鲜白头翁种胚快速发育和种子萌发的主要因素及水平。方法：通过多因子交叉重复试验对影响朝鲜白头翁种胚发育和种子萌发的主要因素及其水平进行探讨。结果：朝鲜白头翁种胚发育成熟和种子萌发的方法为：种子用2.40 mg/L KT、2.80 mg/L GA3和0.30~0.70mg/L 2,4-D混合溶液浸泡24 h,将种子与河砂（1∶2）混合,进行63~70 d的变温处理,变温幅度和时间：白天温度为（23±2）℃,处理14 h,夜间温度为（10±2）℃,处理10 h,子叶胚发生率95.1%,种子发芽率92.3%。结论：解决了朝鲜白头翁种胚发育调控和育苗技术,该技术适合于朝鲜白头翁种苗的工厂化生产。

朝鲜白头翁小孢子发育时期与花器形态的相关性研究

为了寻找朝鲜白头翁小孢子发育时期的鉴定方法以及探讨小孢子发育时期与花器形态的相关性,采用常规石蜡切片法,对朝鲜白头翁小孢子发育时期的细胞学以及小孢子不同发育时期与花蕾大小的关系进行了研究。结果表明:朝鲜白头翁每个花药具4个花粉囊,小孢子母细胞减数分裂属同时型,小孢子在四分体中的排列属四面体型。成熟花粉粒属2-细胞型,并有3个萌发沟。花粉囊壁由4层细胞构成,即表皮(1层)、药室内壁(1层)、中层(1～2层)、绒毡层(1层)。绒毡层发育属腺质型(或分泌型),出现多核现象。朝鲜白头翁小孢子发育时期与花蕾的外部形态特征、花药颜色有一定的相关性。小孢子处于单核期时花蕾长度在1.10～1.20cm,花萼外侧颜色为紫红色,花药的颜色为黄色,花丝的长度为0.4～0.5cm。朝鲜白头翁同一花蕾不同花药小孢子的发育存在一定程度的渐续性。

朝鲜白头翁抗炎有效部位活性成分研究

目的:对朝鲜白头翁抗炎有效部位进行化学成分分离,以进一步明确朝鲜白头翁抗炎有效部位的药效物质。方法:采用正相硅胶、反相ODS柱色谱及高效制备液相色谱分离纯化朝鲜白头翁抗炎有效部位中的化合物,并根据理化特征结合NMR波谱学数据分析鉴定化合物的结构。结果:对朝鲜白头翁抗炎有效部位进行系统的化学成分分离,共分离得到11个化合物,分别鉴定为落叶松脂醇(1)、落叶松脂醇-4-O-β-D-葡萄糖苷(2)、(1S,2R,3S)-dimethyl-1,2,3,4-tetrahydro-3,6,7-trihydroxy-1-(3',4'-dihydroxyphenyl)naphthalene-2,3-dicarboxylate(3)、23-Hydroxy-3β-[(O-α-L-arabinopyranosyl)oxy]lup-20(29)-en-28-oic acid 28-O-β-D-glucopyranosyl ester(4)、23-Hydroxy-3β-[(O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-α-L-arabinopyranosyl)oxy]lup-20(29)-en-oic acid 28-O-β-D-glucopyranosyl ester(5)、impressic acid(6)、3α,11α,23-trihydroxy-lup-20(29)-en-28-oic acid(7)、3-O-β-D-glucopyranosyl 3α,11α-dihy-droxy-lup-20(29)-en-28-oic acid(8)、3-O-β-D-glucopyranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranosyl-27-oxo-betulinic acid-28-O-β-D-glucopyranoside(9)、Kalopanax-saponin B(10)和Acanthopanax saponin CP3(11)。结论:朝鲜白头翁抗炎有效部位的主要成分为木脂素和三萜类化合物,其中化合物1、2、6、7、8和9为该属植物中首次分离得到。

不同处理对朝鲜白头翁种子萌发的影响

以朝鲜白头翁种子为材料,测定其基本特征和吸水特性,研究GA3、PEG6000浸种和超声处理对其种子萌发的影响。结果表明,朝鲜白头翁种子具有快速吸水的生物学特性,入水后1 h的吸水量可达最大吸水量的61.09%;适宜的GA3、PEG6000浸种以及超声处理均可以显著提高朝鲜白头翁种子发芽率和出苗率,100 mg.L-1GA3浸种12 h、10%~30%PEG6000浸种12 h和40℃条件下80 W超声波处理20 min,3种前处理萌发出苗效果最好,其出苗率可分别达到48.33%、52.00%和55.67%。赤霉素GA3操作简单易行,成本低,适合生产采用。

朝鲜白头翁生长发育与总皂苷积累规律研究

目的:研究朝鲜白头翁生长发育及其总皂苷积累规律,为朝鲜白头翁适宜采收期的确定提供依据。方法:田间调查朝鲜白头翁植株的个体发育进程,定期采样并对其各器官生物量和总皂苷进行测定。结果:朝鲜白头翁植物的个体发育划分为5个时期,即:出苗期、开花期、种子成熟期、果后生长期、枯萎期。二年生朝鲜白头翁生育期内只进行营养生长,根干重逐渐增加,呈"S"型曲线,以7月中旬至8月中旬积累速率最快;野生移栽型和三年生朝鲜白头翁生长初期主要进行生殖生长,种子成熟后植株进入营养生长阶段,其根的干重呈逐渐增加的趋势,以6月中旬至7月中旬积累速率最快。野生移栽型、二年生和三年生朝鲜白头翁在不同生长期总皂苷含量以8月中旬最高,单株总皂苷产量最高值出现在8月中旬至9月中旬,9月中旬以后逐渐下降。结论:从药材内在质量和产量两方面综合考虑,生产上可将朝鲜白头翁最佳采收时间安排在8月下旬至9月中旬。

朝鲜白头翁指纹图谱的高效液相色谱测定

目的建立朝鲜白头翁药材的HPLC指纹图谱,为科学评价及有效控制朝鲜白头翁药材质量提供新方法。方法采用高效液相色谱法分析和比较不同来源朝鲜白头翁和白头翁的指纹图谱。色谱条件为:Symmetry@C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),乙腈-水梯度洗脱,体积流量0.5 ml.min-1,检测波长210 nm,柱温35℃。结果建立了朝鲜白头翁药材的指纹图谱共有模式,标定了23个共有峰;经相似度计算,15批药材整体相似度较好,其中10批样品相似度较高,另外5批药材相似度偏低;朝鲜白头翁与白头翁的HPLC指纹图谱差别明显,二者相似度较低。结论朝鲜白头翁药材的指纹图谱特征性及专属性强,可用于控制朝鲜白头翁药材的内在质量。

朝鲜白头翁皂苷类化学成分研究

目的:研究朝鲜白头翁Pulsatilla cernua(Thunb.)Bercht.et Opiz.根中皂苷类化学成分。方法:采用硅胶柱色谱、D101大孔吸附树脂、循环制备高效液相色谱等方法进行分离纯化,并通过化学方法和波谱手段鉴定化合物的结构。结果:从朝鲜白头翁干燥根70%乙醇提取物中分离得到10个化合物,分别鉴定为常春藤皂苷元3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(1),齐墩果酸3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖基-28-O-β-D-吡喃葡萄糖酯苷(2),齐墩果酸3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(3),常春藤皂苷元3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(4),齐墩果酸3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(5),齐墩果酸3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖基-28-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖基(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖酯苷(6),常春藤皂苷元3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖基-28-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖基(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖酯苷(7),常春藤皂苷元3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→4)-α-L-吡喃阿拉伯糖基-28-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖基(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖酯苷(8),常春藤皂苷元3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-[β-D-吡喃葡萄糖基(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖基-28-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖酯苷(9),常春藤皂苷元3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖基-28-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖基(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖酯苷(10)。结论:化合物2为首次从该属植物中分离得到,化合物9为首次从该植物中分离得到。

氮、磷、钾配施对朝鲜白头翁产量、品质及养分吸收分配的影响

目的:研究氮、磷、钾及其配比对朝鲜白头翁生长、产量、总皂苷含量以及养分吸收的影响,以期为朝鲜白头翁规范化栽培技术的建立提供理论依据。方法:采用三因素二次饱和D-最优设计进行田间试验,定期取样,测定植株氮、磷、钾的含量、农艺性状、产量及其总皂苷含量。结果:朝鲜白头翁植株对氮的吸收最多,钾次之,磷最少,不同生育时期养分含量不同,同一生育时期不同器官养分含量也不相同,其地上部分养分含量总体高于地下部分,出苗到7月中旬植株对氮、磷、钾的吸收比例高于生长后期;施肥能显著提高朝鲜白头翁药材产量,氮、磷、钾元素对朝鲜白头翁药材产量影响依次为氮>钾>磷,氮、磷、钾元素对朝鲜白头翁总皂苷含量影响依次为氮>钾>磷。结论:朝鲜白头翁在大田栽培中应合理配比施肥,生长前期及时追施氮、磷、钾肥,并适当提高钾的比例。依据朝鲜白头翁总皂苷产量提出朝鲜白头翁优化施肥方案为氮(N)180 kg/hm2、磷(P2O5)79.74 kg/hm2、钾(K2O)225kg/hm2,氮、磷、钾的最佳配比为2.3∶1.0∶2.8。

朝鲜白头翁及其混淆品兴安白头翁的生药学研究

目的:研究毛茛科植物朝鲜白头翁及其混淆品兴安白头翁的植物来源、根及根茎的药材性状和生长过程中显微组织结构变化。方法:比较两味药材的基源、性状和横切面显微特征,找出两者区别点。结果和讨论:通过药材横切面显微特征研究,较好地反映了两者在生长发育过程中异同点,为朝鲜白头翁药材的鉴别和用药安全提供检验依据。

朝鲜白头翁的HPLC特征图谱研究

目的:建立朝鲜白头翁的特征图谱,为科学有效评价和控制其质量提供可靠依据。方法:采用高效液相色谱法,Thermo Hypersil BDS C_(18)色谱柱(4.6×250 mm,5μm),以乙腈-水作为流动相进行梯度洗脱,流速0.8 mL·min^(-1),柱温35℃,检测波长201 nm。结果:初步建立了朝鲜白头翁的特征图谱,标定了20个共有峰,并指认出2个。结论:采用HPLC法建立朝鲜白头翁的特征图谱,操作简单,选择性高,分离效果好,可用于朝鲜白头翁及其混淆品的鉴别和质量控制。

朝鲜白头翁RAPD反应体系的优化

采用改进的CTAB法提取朝鲜白头翁的基因组总DNA,建立朝鲜白头翁RAPD分析的PCR反应体系,成功进行RAPD扩增.筛选出的最佳PCR反应体系为:25μL反应体系中包括模板DNA 20ng,dNTP 200μmol/L,引物0.4μmol/L,Mg2+1.5 mmol/L,Taq酶1 U,10×Buffer 2.5μL,其余部分为无菌重蒸馏水.

大黑山野生白头翁、朝鲜白头翁浸出物及含量分析

大黑山野生中药资源非常丰富,其中包括白头翁和朝鲜白头翁,经检索中文期刊数据库,未发现有对其进行研究的报道,因此,为了开发和保护野生资源,课题组按照《中华人民共和国药典》(2015版)白头翁项下规定的测定的方法,以大黑山野生白头翁、朝鲜白头翁为供试品,以白头翁皂苷B4为对照品进行分析。结果表明白头翁和朝鲜白头翁的浸出物含量分别为23.0%和20.5%;白头翁和朝鲜白头翁中的白头翁皂苷B4的含量分别为10.2%和9.2%。证明大黑山野生白头翁、朝鲜白头翁符合《中华人民共和国》(2010版)的相关规定。

HPLC测定朝鲜白头翁中常春藤皂苷C的含量

目的:建立高效液相色谱法测定朝鲜白头翁中专属性成分常春藤皂苷C的定量分析方法。方法:采用Thermo Hypersil BDS C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水(28∶72)作为流动相进行洗脱,流速:0.8 m L·min^(-1),柱温:35℃,检测波长:201 nm。结果:常春藤皂苷C在0.220~2.203μg(r=0.999 9)线性关系良好,回收率为97.25%。结论:该方法专属性强,结果准确可靠,重现性好,可用于朝鲜白头翁的质量控制。

白头翁及其同属植物总皂苷含量测定

目的对白头翁及其同属植物朝鲜白头翁、兴安白头翁和细叶白头翁进行总皂苷的含量测定。方法以白头翁皂苷B4为对照品,采用分光光度法测定总皂苷的含量。结果 SPSS统计分析表明白头翁及其同属植物总皂苷的含量具有极显著性差异,其中以兴安白头翁的含量为最高。结论实验结果可为白头翁属药材的来源鉴别和开发利用提供科学依据。

微波辅助提取白头翁皂苷研究

利用响应面法对白头翁(Pulsatilla chinensis)皂苷的微波提取条件进行了优化。在单因素试验基础上,利用Box-Behnken中心组合设计原理及响应面法分析并建立二次回归模型。以乙醇体积分数、微波功率、微波时间为考察因素,以白头翁皂苷提取率为响应值,研究了各因素对白头翁皂苷提取率的影响。确定最佳微波提取条件为乙醇体积分数50%、微波功率300 W、微波时间4 min,在此条件下,白头翁皂苷提取率达到5.33%。