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番木瓜环斑病毒甜瓜分离物的基因组及其侵染性克隆
1
作者 刘莉铭 彭斌 +3 位作者 康保珊 吴会杰 刘茜 古勤生 《中国瓜菜》 CAS 北大核心 2024年第2期8-14,共7页
番木瓜环斑病毒(papaya ringspot virus,PRSV)是瓜类作物主要病毒之一,分析了甜瓜分离物HaNHK10的基因组序列和分子变异,构建了具有侵染性的全长cDNA克隆。结果显示,HaNHK10分离物基因组全长为10332 nt,与其他分离物的核苷酸和氨基酸序... 番木瓜环斑病毒(papaya ringspot virus,PRSV)是瓜类作物主要病毒之一,分析了甜瓜分离物HaNHK10的基因组序列和分子变异,构建了具有侵染性的全长cDNA克隆。结果显示,HaNHK10分离物基因组全长为10332 nt,与其他分离物的核苷酸和氨基酸序列一致性分别为74.60%~97.80%和85.30%~98.50%。基于全基因组序列的系统进化分析显示,HaNHK10与来自中国的所有分离物均聚集于II组中,并与中国山东的西葫芦分离物PRSV-SD亲缘关系最近。接种试验显示,HaNHK10分离物的全长cDNA克隆具有侵染性,它能系统侵染甜瓜、黄瓜、西瓜、南瓜、西葫芦和瓠瓜6种作物,经接种产生的病毒后代也能够通过摩擦接种侵染植株。 展开更多
关键词 木瓜环斑病毒 甜瓜分离物 基因组 侵染性克隆
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基因沉默番木瓜环斑病毒复制酶基因(PRSV-Nib)获得抗病毒病番木瓜的研究
2
作者 吴清铧 贾瑞宗 +5 位作者 郭静远 杨牧之 胡玉娟 郝志刚 赵辉 郭安平 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2024年第4期837-846,共10页
番木瓜是重要的热带经济水果。番木瓜环斑病毒(Papaya ringspot virus,PRSV)是番木瓜的重要病毒病,经常导致严重的产量损失和质量恶化。自从1998年第一例转基因番木瓜问世以来,使得基于“致病菌衍生的抗病性(pathogen-derived resistanc... 番木瓜是重要的热带经济水果。番木瓜环斑病毒(Papaya ringspot virus,PRSV)是番木瓜的重要病毒病,经常导致严重的产量损失和质量恶化。自从1998年第一例转基因番木瓜问世以来,使得基于“致病菌衍生的抗病性(pathogen-derived resistance,PDR)”的抗病育种策略获得成功广泛应用。然而依赖于序列同源性的抗病性与病毒突变导致多样性增加之间的矛盾成为番木瓜育种科学家的新挑战。本研究拟采用RNAi策略针对复制酶(nuclear inclusion b.Nib)获得广谱抗PRSV番木瓜新种质。通过团队已建立的胚性愈伤诱导-农杆菌介导转化-再生苗诱导的番木瓜遗传转化体系,共获得经过抗性筛选的再生苗52株,通过特异性PCR进行筛选共计获得24株转基因阳性植株。通过对T0代田间自然发病试验中,转基因番木瓜株系抗病性明显高于非转基因对照,其中NibB5-2田间抗病性最优。通过hiTAIL-PCR方法确定NibB5-2插入位点位于第2号染色体supercontig_30的1976766的位置。T1代接种试验中,无病毒积累且无发病症状,初步确认具有良好的病毒抗性,为番木瓜抗病育种提供新思路。 展开更多
关键词 木瓜 木瓜环斑病毒 Nib基因 RNA介导的病毒抗性
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番木瓜环斑病毒畸叶株系的CP基因克隆和序列分析 被引量:6
3
作者 贺国安 肖火根 +2 位作者 张曙光 李华平 范怀忠 《中国病毒学》 CAS CSCD 2001年第4期369-372,共4页
采用RT PCR方法合成了本研究室保存的番木瓜畸叶病毒 (PMaLV)的外壳蛋白 (CP)基因 ,将其CP基因克隆进Promega公司的pGEM -TandpGEM -TEasyVectorSystem(简称T -载体 ) ,并进行了序列分析。结果表明 ,PMaLVCP基因核苷酸序列全长为 86 1nt... 采用RT PCR方法合成了本研究室保存的番木瓜畸叶病毒 (PMaLV)的外壳蛋白 (CP)基因 ,将其CP基因克隆进Promega公司的pGEM -TandpGEM -TEasyVectorSystem(简称T -载体 ) ,并进行了序列分析。结果表明 ,PMaLVCP基因核苷酸序列全长为 86 1nt,推导其编码 2 87个氨基酸。与番木瓜环斑病毒 (PRSV)美国夏威夷HA株系和澳大利亚W株系的CP基因相比 ,在第 6 6nt处开始连续缺失 3个核苷酸。与PRSV的华南Ys、Sm和G株系以及夏威夷的HA和澳大利亚的W株系相比 ,其CP基因序列同源率分别为 96 %、98%、95 %、89%和 89%。其推导的氨基酸序列同源率分别为 98%、97%、97%、96 %和 95 %。此结果表明 ,PMaLV属于PRSV的一个株系 ,不是一种新病毒。因此 ,我们称其为番木瓜环斑病毒畸叶株系 (ML株系 )。 展开更多
关键词 木瓜畸叶病毒 木瓜环斑病毒 木瓜环斑病毒畸叶株系 CP基因克隆 序列分析
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番木瓜环斑病毒株系的分子生物学方法鉴定 被引量:8
4
作者 贺国安 肖火根 +2 位作者 张曙光 李华平 范怀忠 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期21-25,共5页
以 PRSV株系特异性引物对 PRSV的 PRSV12 6 (PRSV日本分离物 )、Ys、Vb和 Sm等株系进行 RT- PCR方法鉴定 ,引物 PR2 1/ PR2 2能把 Ys从 Vb和 Sm中鉴定出来 ,PR30 0 / PR30 1则能把 Vb从 Ys、Sm和 PRSV12 6中鉴定出来 ;用限制性内切酶 Ha... 以 PRSV株系特异性引物对 PRSV的 PRSV12 6 (PRSV日本分离物 )、Ys、Vb和 Sm等株系进行 RT- PCR方法鉴定 ,引物 PR2 1/ PR2 2能把 Ys从 Vb和 Sm中鉴定出来 ,PR30 0 / PR30 1则能把 Vb从 Ys、Sm和 PRSV12 6中鉴定出来 ;用限制性内切酶 Hae II、Sau3A I和 Hinf I对 PRSV的PRSV12 6、Ys、Vb和 Sm等株系进行单酶切 RT- PCR- RFLP分析 ,Hinf I能把 PRSV12 6与 Ys、Vb和Sm鉴别开来 ,Sau3A I能把 Ys与 Vb和 Sm鉴别开来 ,Hae II则能把 Ys与 PRSV12 6、Vb和 Sm鉴别开来 ;以 P1/ P2为引物 ,对 Vb、Ys和 Sm株系进行 RT- PCR- RFLP- SSCP分析 ,结果能一次把三者较好地区别开来。 展开更多
关键词 分子生物学方法 木瓜环斑病毒 株系鉴定 RT-PCR RT-PCR-RFLP RT-PCR-RFLP-SSCP
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番木瓜环斑病毒PCR检测技术研究 被引量:23
5
作者 肖火根 胡晋生 范怀忠 《中国病毒学》 CAS CSCD 2000年第4期367-372,共6页
建立了检测番木瓜环斑病毒 (PRV)的免疫捕捉 PCR (IC PCR)法、ELISA PCR法和巢式 PCR法 ,它们分别能从 10 - 4、10 - 7和 10 - 14 稀释度的番木瓜叶粗汁液 (所含鲜叶组织的量分别 0 .5ug、0 .5ng和 5× 10 - 6ng)中检测出PRV。
关键词 木瓜环斑病毒 免疫捕捉-PCR法 检测技术
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番木瓜环斑病毒复制酶基因转化番木瓜的研究 被引量:6
6
作者 陈谷 叶长明 +1 位作者 黄俊潮 李宝健 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 1998年第S1期11-13,共3页
构建了含番木瓜环斑病毒复制酶(PRVRP)基因的植物表达载体pRPTW,导入农杆菌LBA4404,转化番木瓜,转基因植株经点杂交和PCRSouthern检测,证明PRVRP基因已整合进番木瓜基因组。
关键词 木瓜环斑病毒 复制酶基因 农杆菌 转化
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番木瓜环斑病毒海南分离株全基因组序列分析 被引量:4
7
作者 卢雅薇 沈文涛 +2 位作者 唐清杰 牛艳梅 周鹏 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期152-154,共3页
Total RNA was extracted from infected papaya(Carica papaya L.) leaves in Hainan Province, and the full-length sequences of papaya ringspot virus were amplified by RT-PCR and RACE, and its complete genomic sequence was... Total RNA was extracted from infected papaya(Carica papaya L.) leaves in Hainan Province, and the full-length sequences of papaya ringspot virus were amplified by RT-PCR and RACE, and its complete genomic sequence was assembled,named Hainan-P isolate.The RNA genome sequence of Hainan-P isolate was 10323 nucleotides (nts)in length,excluding the 3’-terminal poly(A) tail. And it was composed of a single open reading frame encoding a polyprotein of 3343 amino acids. The result of homology analysis with twelve GenBank PRSV isolates showed that the polyprotein identity of Hainan-P ranged from 89.8% to 93.2%, that was higher than the complete nt homology of 82.3% to 89.1%. The P1 amino acid was the least conserved( sharing homology only between 65.4% and 80.1%), whereas HC-Pro,CI and CP were the most conserved. Phylogenetic tree were constructed by the Neighbor-joining method in MEGA 3.1, which showed that PRSV isolates were obviously relevant to geographical origin,and it was impossible to delineate host-specific (P type and W type)evolution. 展开更多
关键词 木瓜环斑病毒 全基因组 同源性 系统进化树
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番木瓜环斑病毒融合基因植物表达载体的构建 被引量:14
8
作者 饶雪琴 李华平 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期325-329,共5页
利用PCR重叠延伸技术(genesplicingbyoverlapextension,SOE)将番木瓜环斑病毒(Papayaring-spotvirus,PRSV)Vb株系的外壳蛋白(coatprotein,CP)基因和Ys株系的复制酶(replicaseprotein,RP)基因构建成融合基因VY。同时对常规的SOE法进行了... 利用PCR重叠延伸技术(genesplicingbyoverlapextension,SOE)将番木瓜环斑病毒(Papayaring-spotvirus,PRSV)Vb株系的外壳蛋白(coatprotein,CP)基因和Ys株系的复制酶(replicaseprotein,RP)基因构建成融合基因VY。同时对常规的SOE法进行了改进,并对改进的SOE的反应体系进行了优化,其中以Py-robestDNA聚合酶和60℃的退火温度为最佳。将融合基因VY构建在植物表达载体pCAMBIA2300上,测序结果表明,该融合基因的序列与设计相符。融合基因VY植物表达载体的构建,可为进一步获得对PRSV广谱抗性的转基因番木瓜奠定基础。 展开更多
关键词 木瓜 木瓜环斑病毒 PCR融合基因 SOE法
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番木瓜环斑病毒研究进展 被引量:5
9
作者 黄江华 黄嘉薇 +1 位作者 张建军 彭仁 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第8期3257-3259,共3页
综述了番木瓜病毒株系、生物学特性、检测及防治方法的最新研究进展。
关键词 木瓜环斑病毒 株系 检测 防治
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dsRNA介导的番木瓜环斑病毒(PRSV)的抗病性研究 被引量:10
10
作者 张帆 姜玲 《植物科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期385-391,共7页
以模式植物拟南芥(Arabidopsis thaliana)和烟草(Nicotiana tabacum)及PRSV寄主植物番木瓜(CaricapapayaL.)作为试验材料,开展了番木瓜环斑病毒外壳蛋白基因dsRNA介导的PRSV病原抗性的研究。利用农杆菌介导法将番木瓜环斑病毒外... 以模式植物拟南芥(Arabidopsis thaliana)和烟草(Nicotiana tabacum)及PRSV寄主植物番木瓜(CaricapapayaL.)作为试验材料,开展了番木瓜环斑病毒外壳蛋白基因dsRNA介导的PRSV病原抗性的研究。利用农杆菌介导法将番木瓜环斑病毒外壳蛋白CP基因反向重复表达载体pHellsgate12-CPIR(简称PHG12-CPIR)分别转化到烟草和拟南芥中,获得阳性植株,并利用渗透法和农杆菌介导的瞬时表达体系将pHG12-CPIR载体导入到番木瓜中。对转基因植株进行攻毒试验并分析了其抗病性。在接种3~7d内,在拟南芥和番木瓜上转基因植株的发病情况较轻,而野生型植株叶片与转基因植株相比,均表现出不同程度的黄化、皱缩和枯斑等症状。在接种PRSV后,番木瓜和拟南芥转化植株表现症状的叶片的比例与对照相比,结果显著低于对照,而在烟草植株上症状表现的差异不明显。在3种植物上RT-PCR检测结果显示,在接种番木瓜环斑病毒PRSV后,野生型植株中有高浓度的病毒积累,而转pHG12-CPIR基因植株中几乎没有病毒积累,推测转pHG12-CPIR基因植株中瞬时表达系统已启动RNAi机制抑制了CP基因的表达。 展开更多
关键词 木瓜环斑病毒 CP基因 木瓜 RNAi 抗病性 渗透法
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番木瓜环斑病毒Ys CP基因的序列分析和植物表达载体的构建 被引量:4
11
作者 叶长明 范怀忠 +1 位作者 叶寅 田波 《中国病毒学》 CAS CSCD 1997年第1期54-60,共7页
用双脱氧链终止法分析了克隆的番木瓜环斑病毒(PRV)Ys株系外壳蛋白(CP)基因的序列,结果表明YsCP基因全长858nt。对PRV国内外16个株系或分离物CP基因的比较发现,YsCP基因与国内株系或分离物CP基因的同源性较高(94.44%~97.68... 用双脱氧链终止法分析了克隆的番木瓜环斑病毒(PRV)Ys株系外壳蛋白(CP)基因的序列,结果表明YsCP基因全长858nt。对PRV国内外16个株系或分离物CP基因的比较发现,YsCP基因与国内株系或分离物CP基因的同源性较高(94.44%~97.68%),而与国外株系或分离物CP基因的同源性较低(88.88%~92.70%)。CP基因之间的差异主要靠近基因5’端,特别是在YSCP基因第63nt后连续缺失6nt,SmGTHAI和SRI的CP基因也在此处缺失3nt。将YsCP基因插入中间质粒pRokⅡ的CaMV35S启动于和nos终止序列之间形成CP基因的植物表达载体pRPCY,通过三亲交配使pRPCY进入农杆菌LBA4404,与其中的pAL4404构成双元载体系统。 展开更多
关键词 木瓜环斑病毒 外壳蛋白基因 植物表达载体
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番木瓜环斑病毒海南分离物全基因组结构分析 被引量:3
12
作者 卢雅薇 沈文涛 +2 位作者 唐清杰 牛艳梅 周鹏 《广东农业科学》 CAS CSCD 2007年第9期54-58,共5页
从感病的海南番木瓜叶片中提取总RNA,经RT-PCR和RACE方法分段扩增番木瓜环斑病毒(PRSV)全基因组序列。序列拼接结果显示,PRSV中国海南分离株(HaiNan-P)基因组除3'-末端polyA尾巴外,由10323个核苷酸组成,编码3343个氨基酸。同源性分... 从感病的海南番木瓜叶片中提取总RNA,经RT-PCR和RACE方法分段扩增番木瓜环斑病毒(PRSV)全基因组序列。序列拼接结果显示,PRSV中国海南分离株(HaiNan-P)基因组除3'-末端polyA尾巴外,由10323个核苷酸组成,编码3343个氨基酸。同源性分析表明,HaiNan-P编码的氨基酸序列与GenBank中公布的11株PRSV同源性为89.8%~93.2%,略高于全长核苷酸的82.3%~89.1%。P1蛋白编码区同源性较低,仅为65.4%~80.1%,而HC-Pro、CI及CP同源性相对较高。运用MEGA 3.1软件、NJ法绘制系统进化树,分析结果显示,PRSV分离株类群分化与地理分布有一定的相关性。 展开更多
关键词 木瓜环斑病毒 全基因组 同源性 系统进化树
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转番木瓜环斑病毒复制酶基因番木瓜的多重定性检测 被引量:4
13
作者 阮小蕾 马丽娟 李华平 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期626-629,682,共5页
为监测和管理转基因番木瓜华农1号的商品化生产、销售,建立了相应的转基因定性检测方法.选用木瓜蛋白酶作为番木瓜的内源对照基因,建立对转基因番木瓜PRSV-Rep基因、外源CaMV35S启动子序列、NOS终止子序列和NPTⅡ基因的常规PCR检测体系... 为监测和管理转基因番木瓜华农1号的商品化生产、销售,建立了相应的转基因定性检测方法.选用木瓜蛋白酶作为番木瓜的内源对照基因,建立对转基因番木瓜PRSV-Rep基因、外源CaMV35S启动子序列、NOS终止子序列和NPTⅡ基因的常规PCR检测体系.退火温度为40~60℃时,都分别扩增出了清晰的目的基因.单基因常规PCR检测转基因模板量的下限为5×10-7g.建立的三重PCR检测技术,检测了包括NPTⅡ、Rep和CaMV35S;NPTⅡ、Rep和Nos;NPTⅡ、Rep和Papain等3个组合.建立了NPTⅡ、ReP、CaMV35S和Nos4个基因的四重PCR检测技术. 展开更多
关键词 木瓜环斑病毒 转基因番木瓜 多重聚合酶链式反应
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番木瓜环斑病毒株系、分子生物学及其防治研究进展 被引量:5
14
作者 肖火根 范怀忠 《中国病毒学》 CAS CSCD 1996年第2期103-109,共7页
番木瓜环斑病毒株系、分子生物学及其防治研究进展肖火根,范怀忠(华南农业大学植物病毒研究室,广州510642)AdvancesofResearchontheStrains,MolecularBiologyandCont... 番木瓜环斑病毒株系、分子生物学及其防治研究进展肖火根,范怀忠(华南农业大学植物病毒研究室,广州510642)AdvancesofResearchontheStrains,MolecularBiologyandControlofPapayaRingsp... 展开更多
关键词 木瓜环斑病毒 分子生物学 木瓜环斑 防治
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番木瓜环斑病毒CP基因同源区段的克隆及植物表达载体的构建 被引量:2
15
作者 魏军亚 刘德兵 +2 位作者 蔡群芳 黎小瑛 周鹏 《热带作物学报》 CSCD 2007年第2期54-59,共6页
采用RT-PCR技术对番木瓜环斑病毒CP基因的同源区段进行了克隆和鉴定分析。序列分析结果表明,获得PRSV-CP基因3′端的278bp DNA片段同源率最高。构建了目的基因包含278bp正义链、内含子(PDK内含子)及278bp反义链的RNA介导的植物表达载体p... 采用RT-PCR技术对番木瓜环斑病毒CP基因的同源区段进行了克隆和鉴定分析。序列分析结果表明,获得PRSV-CP基因3′端的278bp DNA片段同源率最高。构建了目的基因包含278bp正义链、内含子(PDK内含子)及278bp反义链的RNA介导的植物表达载体p2301-CPU,并通过电激法导入农杆菌中。经PCR及酶切鉴定,证实质粒已被导入获得了农杆菌工程菌株。利用该植物表达载体对番木瓜的遗传转化工作目前正在进行中。 展开更多
关键词 木瓜环斑病毒外壳蛋白基因 同源区段 RNA介导植物表达载体 农杆菌工程菌株
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番木瓜环斑病毒海南南瓜分离物全基因组序列分析 被引量:2
16
作者 车海彦 曹学仁 罗大全 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2019年第3期38-43,51,共7页
【目的】研究海南南瓜上番木瓜环斑病毒(Papaya ringspot virus,PRSV)的全基因组特征及系统进化情况,为南瓜病毒病的综合防控提供依据。【方法】通过DAS-ELISA和RT-PCR等方法,检测采自海南澄迈桥头镇疑似感染PRSV的南瓜叶片中是否存在PR... 【目的】研究海南南瓜上番木瓜环斑病毒(Papaya ringspot virus,PRSV)的全基因组特征及系统进化情况,为南瓜病毒病的综合防控提供依据。【方法】通过DAS-ELISA和RT-PCR等方法,检测采自海南澄迈桥头镇疑似感染PRSV的南瓜叶片中是否存在PRSV,采用分段扩增测序方法拼接获得PRSV-HnPumpkin基因组,利用NC-BI中的BLAST工具、DNAStar和MEGA 6.06软件进行序列分析及系统关系树构建。【结果】DAS-ELISA和RT-PCR检测结果表明,采自海南澄迈桥头镇疑似感染PRSV的南瓜叶片中存在PRSV(PRSV-HnPumpkin)。PRSV-HnPumpkin基因组全长为10 327nt,具有典型的PRSV基因组结构特征,含有1个开放阅读框,编码1个含有3 345个氨基酸的多聚蛋白。PRSV-HnPumpkin与已报道的其他PRSV分离物核苷酸和氨基酸之间的相似性分别为80.6%~95.1%和90.7%~97.9%。系统关系分析表明,PRSV-HnPumpkin与亚洲分离物处于同一组中,且与我国台湾分离物亲缘关系较近。【结论】获得了PRSV-HnPumpkin全序列,但其进化来源有待进一步探讨。 展开更多
关键词 木瓜环斑病毒 南瓜病毒 基因序列分析
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dsRNA介导的PRSV-CP基因3′-端同源序列瞬时表达对番木瓜环斑病毒侵染的影响 被引量:2
17
作者 魏军亚 刘德兵 周鹏 《热带作物学报》 CSCD 2007年第3期78-82,共5页
体外合成我国番木瓜主产区环斑病毒外壳蛋白(PRSV-CP)基因3'-端278bp同源区段,构建包含278bp正义链、内含子(PDK内含子)及278bp反义链的RNA介导的植物表达载体p2301-CPU,直接转化根癌农杆菌EHA105。通过根癌农杆菌介导的瞬时表达法... 体外合成我国番木瓜主产区环斑病毒外壳蛋白(PRSV-CP)基因3'-端278bp同源区段,构建包含278bp正义链、内含子(PDK内含子)及278bp反义链的RNA介导的植物表达载体p2301-CPU,直接转化根癌农杆菌EHA105。通过根癌农杆菌介导的瞬时表达法,研究同源dsRNA对番木瓜环斑病毒(PRSV)侵染的干扰作用。结果表明,瞬时表达的dsRNA能够特异地干扰PRSV侵染。 展开更多
关键词 DSRNA 农杆菌浸润法 干扰 木瓜环斑病毒
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番木瓜环斑病毒海南株系植物RNAi表达载体的构建 被引量:1
18
作者 赵辉 张雨良 +5 位作者 孔华 贾瑞宗 朱芸 郭安平 曾会才 彭明 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2015年第12期2210-2215,共6页
为研究广谱抗环斑病毒(PRSV)海南株系转基因番木瓜育种方案,采集海南番木瓜各主要种植区的PRSV株系,以外壳蛋白(CP)、辅助成分-蛋白酶(HC-Pro)和复制酶(Nib)基因作为靶标基因,通过序列比对和运用Clustalx软件分析,得到干扰基因的保守区... 为研究广谱抗环斑病毒(PRSV)海南株系转基因番木瓜育种方案,采集海南番木瓜各主要种植区的PRSV株系,以外壳蛋白(CP)、辅助成分-蛋白酶(HC-Pro)和复制酶(Nib)基因作为靶标基因,通过序列比对和运用Clustalx软件分析,得到干扰基因的保守区域和挑选出海南PRSV典型株系的代表样品。以p UCCRNAi为骨架质粒,利用代表样品的CP、NIb、Hc-Pro基因片断保守序列构建RNAi发夹结构,将发夹结构导入p CAMBIA2300-35S-OCS植物表达载体,构建出抗PRSV植物表达载体p CAMBIA2300-35S-CP-RNAi-OCS、p CAMBIA230035S-Hc-Pro-RNAi-OCS、p CAMBIA2300-35S-NIb-RNAi-OCS。实验将PRSV不同株系保守序列的分析与RNAi的高效抗病设计理念相结合,可用于创造高效、广谱抗PRSV病毒病的新种质。 展开更多
关键词 木瓜 木瓜环斑病毒 RNA沉默 基因转化
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番木瓜环斑病毒弱株系保护作用的研究 被引量:2
19
作者 肖火根 范怀忠 《中国病毒学》 CAS CSCD 1995年第2期155-160,共6页
本文报道了在番木瓜环斑病毒(PRV)弱株系保护作用中,保护接种与攻击接种的浓度,以及攻击接种的部位等因素对HA_(5-1)弱株系保护作用效果的影响结果。通过分析弱株系和强株系在保护接种后攻毒的植株体内的病毒浓度,表明... 本文报道了在番木瓜环斑病毒(PRV)弱株系保护作用中,保护接种与攻击接种的浓度,以及攻击接种的部位等因素对HA_(5-1)弱株系保护作用效果的影响结果。通过分析弱株系和强株系在保护接种后攻毒的植株体内的病毒浓度,表明HA_(5-1)弱株系对Sm株系的保护作用的崩溃是由于强株系在植株顶端叶片中的病毒浓度越来越高所致。本义还就PRV弱株系在田间的应用技术作了一些讨论。 展开更多
关键词 木瓜环斑病毒 弱株系 交互保护作用 植物病毒
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番木瓜环斑病毒西瓜株系衣壳蛋白的原核表达及抗血清制备 被引量:2
20
作者 黄显德 王玉 +2 位作者 田延平 古勤生 李向东 《山东农业科学》 2017年第12期86-89,共4页
以感染番木瓜环斑病毒西瓜株系(papaya ringspot virus-watermelon strain,PRSV-W)的西葫芦叶片为供试材料,通过RT-PCR克隆PRSV-W衣壳蛋白(coat protein,CP)基因,并将其连接到原核表达载体pEHISTEV上得到重组质粒pEHISTEV-PRSV-W-CP。... 以感染番木瓜环斑病毒西瓜株系(papaya ringspot virus-watermelon strain,PRSV-W)的西葫芦叶片为供试材料,通过RT-PCR克隆PRSV-W衣壳蛋白(coat protein,CP)基因,并将其连接到原核表达载体pEHISTEV上得到重组质粒pEHISTEV-PRSV-W-CP。将其转化大肠杆菌Rosetta,经IPTG诱导后可表达分子量约为37 kD的融合蛋白。将融合蛋白从凝胶中切下,乳化后免疫新西兰长耳兔,制备PRSV-W CP的抗血清。间接ELISA测定该血清效价为1∶8192。Western blot检测结果表明,该抗血清只与感染PRSV的西葫芦样品有特异性反应,而与健康西葫芦、感染西瓜花叶病毒的西葫芦及感染马铃薯Y病毒的普通烟样品均无反应。本研究为PRSV的快速检测以及CP蛋白功能的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 木瓜环斑病毒西瓜株系 衣壳蛋白 原核表达 抗血清制备 检测
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