纯化木糖结晶母液的发酵试验

采用酿酒酵母对葡萄糖、木糖、阿拉伯糖以及半乳糖进行了发酵试验。结果表明,酿酒酵母在72h内能够完成对葡萄糖和半乳糖的转化,而几乎不能利用木糖和阿拉伯糖。在此基础上采用酿酒酵母对木糖结晶母液进行发酵试验。结果表明,酿酒酵母能够转化结晶母液中的葡萄糖,使得结晶母液4种木糖单糖组成从56.6%提升为81.2%,纯化了木糖结晶母液,为进一步利用分离木糖奠定了基础。采用高效液相色谱法对结晶母液和发酵液进行了分析,在发酵液中未检出葡萄糖。

高效液相色谱法测定木糖结晶母液中单糖

建立了一种木糖结晶母液中四种单糖的高效液相色谱测定方法。样品经石墨化碳黑固相萃取前处理,碳水化合物专用柱分离,流动相采用乙腈/水=70/30(V/V)等比洗脱,流速1.0 mL.min-1,检测器漂移管温度70℃,载气流速(N2)为2.00 L.min-1。该方法条件下,木糖、阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖的加标回收率分别为:101.5%、99.0%、99.5%、100.1%,线性范围均在0.1～25μg之间,相对标准偏差均小于3%;方法检出限:木糖0.025μg、阿拉伯糖0.025μg、葡萄糖0.010μg、半乳糖0.015μg。该方法前处理简单快速,灵敏度高、重现性好。

木糖结晶母液发酵特性的研究

[目的]探讨木糖结晶母液发酵特性,为开发利用木糖结晶母液提供依据。[方法]利用酿酒活性干酵母,研究发酵过程中葡萄糖、木糖、阿拉伯糖、半乳糖含量的变化以及木糖结晶母液糖组分和含量的变化。[结果]在发酵2 d以后,葡萄糖与半乳糖全部被转化,而木糖与阿拉伯糖浓度几乎不变。半乳糖的转化速度慢于葡萄糖。木糖结晶母液经12 d的发酵,葡萄糖完全转化,木糖没有明显变化,而阿拉伯糖色谱峰有所变化。发酵前,木糖结晶母液中含4种糖,木糖占56.6%;发酵后,含2种糖,木糖占81.2%。[结论]发酵后,木糖结晶母液中糖组成由4种变成2种,木糖纯度得到了很大提高。

柱前衍生化-高效液相色谱法分析木糖结晶母液的单糖组成

采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化-反相高效液相色谱(HPLC)法建立了8种常见单糖的分离模式,并用于木糖结晶母液单糖组成的定量分析。结果表明:木糖结晶母液至少由甘露糖、鼠李糖、纤维二糖、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖及岩藻糖8种单糖组成,其中以葡萄糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖为主。以峰高定量,8种单糖的浓度与相应的峰高呈良好的线性关系,相关系数r2在0.9897～0.9994范围内,方法检出限为0.0021～0.003 1 mg/mL,回收率为98.4%～101.0%,测定结果的相对标准偏差为0.66%～1.21%(n=6)。该方法简单、快速、灵敏,可用于木糖结晶母液的质量控制。