一测多评法同时测定十一味定喘口服液中5种成分的含量

目的建立一测多评法同时测定十一味定喘口服液中黄芩苷、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷、黄芩素、甘草酸铵的含量。方法分析采用Welch Ultimate XB C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量1 mL/min;柱温30℃;检测波长254 nm。以黄芩苷为内标,计算其他4种成分的相对校正因子,测定其含量。结果5种成分在各自范围内线性关系良好(r>0.9993),平均加样回收率97.27%~104.89%,RSD 0.16%~1.70%。一测多评法所得结果与外标法接近。结论该方法专属性强,准确度高,稳定可靠,可用于十一味定喘口服液的质量控制。

UPLC同时测定清热止咳颗粒中7种黄酮类成分含量

目的建立同时测定清热止咳颗粒中芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、黄芩苷、木蝴蝶素A-7-葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷含量的方法。方法采用超高效液相色谱法(UPLC),采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相乙腈-0.1%甲酸水溶液(梯度洗脱),流速0.3 m L·min^-1,检测波长280 nm,柱温30℃。结果芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、黄芩苷、木蝴蝶素A-7-葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷分别在0.324~6.480(r=0.999 9),1.337~26.75(r=0.999 7),0.687~13.80(r=0.999 6),1.347~26.95(r=0.999 8),2.770~55.40(r=0.999 2),0.330~6.600(r=0.999 8),0.242~4.840(r=0.999 6)μg·m L-1范围内与峰面积呈良好的线性关系;并且芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、黄芩苷、木蝴蝶素A-7-葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷平均加样回收率分别为99.41%、101.80%、99.42%、98.47%、101.71%、102.27%和97.64%,RSD范围分别是2.32%、1.69%、2.38%、2.45%、1.24%、1.77%和1.91%。结论建立的超高效液相色谱方法操作简便、稳定、准确且可行,可用于清热止咳颗粒的质量控制。

带叶卷瓣兰乙酸乙酯部位的化学成分研究

目的:研究带叶卷瓣兰乙酸乙酯部位的化学成分。方法:采用硅胶、聚酰胺、Sephadex LH-20凝胶等柱色谱技术对带叶卷瓣兰80%乙醇提取物进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物结构。结果:从带叶卷瓣兰80%乙醇提取物的乙酸乙酯部位中分离并鉴定了9个化合物,分别为:gymconopin B(1)、(2S)-二氢木蝴蝶素A-7-O-[β-D-芹菜糖基(16)]-β-D-葡萄糖苷(2)、2(S)-5,7-二羟基-6-甲氧基二氢黄酮(3)、(-)-丁香脂素(4)、p-coumarate(a)(5)、豆甾醇(6)、β-谷甾醇(7)、3,4′-二羟基-3′,5-二甲氧基联苄(8)、7-羟基-4-甲氧基-2,3-二氧亚甲基菲(9)。结论:其中,化合物2、4为首次从该植物中分离得到。

大鼠胆汁中黄芩苷代谢物的分离、纯化及其对肝癌细胞HepG2增殖的影响研究

目的:从大鼠胆汁中分离纯化黄芩苷的代谢物,并研究其对肝癌细胞HepG2增殖的影响。方法:取6只SD大鼠,麻醉后进行胆管插管,待大鼠清醒后,灌胃给予黄芩苷(168 mg/kg),收集灌胃给药后24 h的胆汁样品1,经处理后,采用高效液相色谱法进行初步分析;另取5只SD大鼠,同上述方法麻醉、插管后,灌胃给予黄芩苷(400 mg/kg),并收集灌胃给药后48 h的胆汁样品2,经处理后,采用半制备型高效液相色谱法对代谢物进行分离纯化;采用紫外光谱、红外光谱、质谱、核磁共振技术并结合其理化性质对分离得到的代谢物进行鉴定;采用MTT法及高内涵细胞成像分析法研究代谢物对HepG2细胞增殖的影响。结果:黄芩苷通过胆汁主要代谢成代谢物1和代谢物2,经分离纯化后分别鉴定为千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷和黄芩素6-O-β-D-葡萄糖醛酸苷。MTT法结果显示,代谢物2对HepG2细胞具有显著的增殖抑制作用,其半数抑制浓度(IC50)为90μg/mL;高内涵细胞成像分析法结果显示,在一定浓度下,代谢物2可能通过改变HepG2细胞线粒体分布及膜通透性从而抑制细胞增殖(代谢物1的药理活性已有报道,本研究略去)。结论:成功分离并鉴定出2个黄芩苷的胆汁代谢物,其中代谢物2黄芩素6-O-β-D-葡萄糖醛酸苷对HepG2细胞具有显著的增殖抑制作用。

黄芩中黄酮类成分的分离鉴定及其体外对凝血系统的影响

目的研究黄芩Scutellaria baicalensis中的黄酮类成分及其对体外凝血系统的影响。方法使用反复硅胶柱色谱进行分离纯化,并根据其理化性质和波谱数据鉴定结构。通过测定黄酮类成分对凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)、纤维蛋白量(FIB)的影响研究其体外凝血活性。结果从黄芩的乙醇提取物中分离得到12个黄酮类化合物,分别鉴定为黄芩素(1)、汉黄芩素(2)、千层纸素A(3)、韧黄芩素-I(4)、黄芩黄酮-II(5)、5,7,2′,5′-四羟基-8,6′-二甲基黄酮(6)、5,7-二羟基-6-甲氧基二氢黄酮(7)、5-甲氧基-7-羟基二氢黄酮(8)、黄芩苷(9)、汉黄芩素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯(10)、汉黄芩素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸丁酯(11)、木蝴蝶素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸丁酯(12)。所有化合物均对FIB没有影响,部分化合物能显著缩短TT、PT,同时能显著延长APTT。结论化合物11和12为新化合物。黄芩中黄酮类化合物体外对凝血系统有双向调节作用,其对凝血系统的不同作用体现在凝血过程的不同环节。

藏紫菀化学成分的研究(Ⅱ)

目的研究藏紫菀的化学成分。方法采用硅胶、大孔树脂和Sephadex LH-20柱等进行分离纯化,用物理、化学和光谱学方法鉴定化合物的结构。结果分离并鉴定出10个化合物,分别为齐墩果酸(1)、香草酸(2)、异鼠李素(3)、山柰酚(4)、槲皮素(5)、大波斯菊苷(6)、槲皮素3-O-(6″-O-E-咖啡酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷(7)、芦丁(8)、芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸正丁酯(9)、芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷(10)。结论除化合物8以外,其余均为首次从该种植物中分离得到。

黄芩水煎液中化学成分的定性及定量研究

目的 分析黄芩Scutellaria baicalensis水煎液中的化学成分,并对其中的主要成分进行定量研究,为黄芩质量标准的建立和进一步研究提供参考依据。方法 定性分析采用UHPLC LTQ-Orbitrap MS技术,0.1%甲酸水-乙腈为流动相,梯度洗脱,分析化合物的精确相对分子质量及碎片离子信息。通过对照品对比、分析化合物质谱裂解碎片推测未知物。定量分析采用HPLC-UV技术,1%乙酸水溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱,测定10批黄芩中主要成分含量。结果 从黄芩水煎液中分析鉴定了86种化合物,含65个黄酮、11个有机酸、7个氨基酸、2个苯乙醇苷、1个其他类化合物。对黄芩中黄芩苷、汉黄芩苷、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、黄芩素、汉黄芩素及千层纸素A进行了含量测定,结果表明黄芩不同批次之间的黄酮类成分含量有一定差异,但6个黄酮的总量相对稳定(18.09%~25.33%,RSD为9.95%)。结论 全面分析了黄芩水煎液的化学成分,并建立了6个黄酮成分的定量分析方法,可为黄芩的质量控制和质量标准建立提供数据参考。

基于一测多评法对小儿豉翘清热颗粒中9个成分的质量控制

目的:建立一测多评(QAMS)法测定小儿豉翘清热颗粒中栀子苷、芍药苷、连翘酯苷A、黄芩苷、连翘苷、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素9个成分的含量。方法:采用超高效液相色谱法,Acquity UPLC BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm);乙腈(A)-0.2%磷酸水溶液为流动相(B),梯度洗脱;流速0.25 mL·min^(-1),柱温25℃,检测波长220 nm。以黄芩苷为内参物,建立栀子苷、芍药苷、连翘酯苷A、连翘苷、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素与内参物黄芩苷的相对校正因子(f),通过f计算小儿豉翘清热颗粒中9个成分的含量,并进行验证,将该方法与外标法(ESM)的测定结果进行对比分析,以验证QAMS方法的准确性、重复性及可行性。结果:栀子苷、芍药苷、连翘酯苷A、黄芩苷、连翘苷、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素的质量浓度分别在9.953～199.1μg·mL^(-1)、5.994～119.9μg·mL^(-1)、4.390～87.80μg·mL^(-1)、9.819～196.4μg·mL^(-1)、1.802～36.04μg·mL^(-1)、1.408～28.17μg·mL^(-1)、2.551～51.02μg·mL^(-1)、0.140 2～2.804μg·mL^(-1)、0.361 3～7.225μg·m L^(-1)范围内线性关系良好;加样回收率在95.7%～102.5%;以黄芩苷为内参物,测得的f值分别为4.621 1、4.105 5、1.825 3、1.796 5、1.040 2、1.339 8、0.647 4、0.888 7,且建立的QAMS法计算结果与外标法(ESM)的计算结果之间无显著性差异。结论:本实验建立的QAMS法可作为一种简便快捷的质量评价模式,用于小儿豉翘清热颗粒中9个成分的质量控制。

LC-MS/MS法同时测定小儿豉翘清热颗粒中13个成分的含量

目的:建立LC-MS/MS法同时测定小儿豉翘清热颗粒中栀子苷、芍药内酯苷、芍药苷、连翘酯苷A、甘草苷、黄芩苷、连翘苷、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、大黄酸、甘草酸共13个成分的含量。方法:采用Poroshell 120 SB-C;色谱柱(100 mm×3.0 mm,2.7μm),以0.1%甲酸水与甲醇-乙腈(1∶1)为流动相,梯度洗脱,流速0.45 mL·min^(-1),柱温40℃;采用电喷雾(ESI)离子源,多反应监测模式(MRM)进行负离子扫描。结果:栀子苷质量浓度在9~900 ng·mL^(-1),芍药内酯苷在1~100 ng·mL^(-1),芍药苷在12~1200 ng·mL^(-1),连翘酯苷A在12~1800 ng·mL^(-1),甘草苷在1~100 ng·mL^(-1),黄芩苷在8~800 ng·mL^(-1),连翘苷在5~500 ng·mL^(-1),千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷在5~500 ng·mL^(-1),汉黄芩苷在5~500 ng·mL^(-1),黄芩素在2~200 ng·mL^(-1),汉黄芩素在0.4~40 ng·mL^(-1),大黄酸在0.4~40 ng·mL^(-1),甘草酸在5~500 ng·mL^(-1)范围内线性关系良好(r>0.9985);平均加样回收率(n=6)范围均为97.0%~110.5%,RSD为3.2%~9.6%;5个批次样品中,13个成分的含量分别为栀子苷4.933~5.800 mg·g^(-1),芍药内酯苷0.104~0.123 mg·g^(-1),芍药苷3.140~4.159 mg·g^(-1),连翘酯苷A 17.40~21.05 mg·g^(-1),甘草苷0.354~0.425 mg·g^(-1),黄芩苷4.991~6.422 mg·g^(-1),连翘苷1.446~1.906 mg·g^(-1),千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷0.441~0.534 mg·g^(-1),汉黄芩苷0.925~1.138 mg·g^(-1),黄芩素0.129~0.151 mg·g^(-1),汉黄芩素0.084~0.106 mg·g^(-1),大黄酸0.051~0.063 mg·g^(-1),甘草酸0.964~1.242 mg·g^(-1)。结论:该方法特异、灵敏、高效、可靠,可用于小儿豉翘清热颗粒的质量控制。