高效木质素降解菌株的分离筛选

为筛选能高效降解木质素的菌株,从31份采集的朽木和土壤样品中分离纯化获得155株菌;将纯化获得的菌株接入到含愈创木酚的选择培养基上进行初筛,观察其颜色变化,根据菌落圈和变色圈直径的比值,筛选出9株可降解木质素的菌株;将这9株菌接入产酶培养基中进行液体静止培养并测定木质素酶活力,最终获得2株高产木质素酶的真菌菌株14-7和15-1.将这2株真菌培养7 d后,所产木质素过氧化物酶、锰过氧化物酶和漆酶的活力分别为0.087、0.060、0.144和0.070、0.059、0.000U·mL-1.

几种木质素降解菌的筛选及其协同作用降解煤炭的研究

通过筛选微生物菌种,筛选出Z1,Z3,Z6三种降解木质素的真菌,应用于煤炭转化降解试验.通过比较,3种真菌混合液体培养对煤炭降解效果最好,10 d的作用时间,能降解转化38.13%的义马褐煤,比其单一菌种的效果都要好,降解过程伴随有培养基pH值下降现象.煤降解产物的MS研究表明,经微生物作用后,煤大分子结构发生了降解,分子量整体下降,以低分子量类物质为主.

碳氮源对复合木质素降解菌木质素降解能力及相关酶活的影响

白腐真菌所具有的降解木质素能力源于其所产生的酶系统,碳源和氮源是其降解木质素和产酶的一个极为重要的影响因素。通过室内小麦秸秆固态发酵试验,研究了不同的碳、氮源对两株侧耳属真菌Tf1(P.pulmonarius)和JG1(P.cornucopiae)产酶活力、木质素降解和粗蛋白含量的影响。结果表明,Lip和MnP是参与复合木质素降解菌Tf1+JG1降解小麦秸秆重要的木质素降解酶。以葡萄糖为碳源,酒石酸铵为氮源能显著提高复合木质素降解菌对木质素的降解能力,发酵9 d后小麦秸秆的失重率为14.87%,木质素含量为8.68%,木质素降解率为22.95%;粗蛋白含量为7.28%,比未发酵麦秸提高了36.84%(P<0.05);Lip和MnP活力分别为629.11 U.g-1和622.22 U.g-1。

高温木质素降解菌Geobacillus caldoxylosilyticus J16的筛选及其产酶发酵性质研究

从张家界、白云山采集到的朽木及落叶中,经分离、纯化后,获得了一株高温木质素降解菌,命名为地芽孢杆菌(Geobacillus caldoxylosilyticus J16),此菌嗜热,耐高温,只降解木质素且不降解纤维素,对造纸业和可再生能源产业具有重要意义。笔者通过对木质素中2种酶木质素过氧化物酶、锰过氧化物酶活性的研究,确定了木质素过氧化物酶的最适温度为65℃,最适pH为4,在55℃至70℃之间时酶活力较其他温度高且较稳定;锰过氧化物酶最是温度为60℃,最适pH为3在温度为55℃至65℃之间时,活力较其他温度高。作者发酵了黄豆杆、玉米杆、芝麻杆、油菜杆、锯末、小麦杆这6种农业废弃物,通过发酵前后的比较,说明了J16菌株对木质素降解的最大减少量为7.5%。上述数据显示此菌可以应用于废弃秸秆的处理和造纸厂污水的处理,对环保有重要意义.

碳氮比对复合木质素降解菌产酶活力和木质素降解能力的影响

本研究采用了L16(42)正交试验确定了复合木质素降解菌Tf1和JG1发酵麦秸的最佳碳氮比条件,试验结果表明,当葡萄糖:酒石酸铵为5:0.5,发酵麦秸9d时Lip、MnP、Lac活力和总酶活分别为419.99、1028.31、13.65U/g和1461.95U/g,木质素含量、失重率和木质素降解率分别为8.81%、19.71%和26.22%。

木质素降解菌的筛选及其纤维素酶基因克隆表达研究

以高效降解木质素为指标,进行木质素降解菌的筛选和纤维素酶处理纤维材料的研究。通过测定14株白腐菌菌株在愈创木酚、苯胺兰和鞣酸培养基上生长状况和酶活分泌能力,得到8株能产生阳性反应的菌株。以木质素和综纤维素失重的比值(SF指数)为指标,对这几株菌进行复筛,从中筛选出具有生长优势和强酶分泌能力的菌株平菇10969和侧耳WP1。与黄胞原毛平革菌Phanerochaete chrysosporium RP78和P.chrysosporium BKM-F-1767两株模式菌相比,白腐菌具有良好的生长优势、强酶系分泌能力和降解的优势。从分离的白腐菌中克隆纤维素酶基因(egl2),表达蛋白并测定酶活。用粗酶液处理不同的纤维材料,结果表明,其还原糖产量为综纤维素(酸解)>菌草(白腐菌处理)>未处理菌草。白腐菌的研究对草质资源的充分利用、污染物的降解、燃料乙醇的开发以及我国生态农业的持续发展等都有着重要意义。

园林废弃物堆肥中木质素降解菌的鉴定及其降解能力研究

【目的】筛选出具有木质素降解功能的菌株,用于园林废弃物降解.【方法】通过对从园林废弃物高温好氧发酵堆体中筛选得到的菌株进行分子生物学鉴定,得出目标菌,并将该菌接种在灭菌的小叶榕枝条上,测定小叶榕枝条的木质素、纤维素和半纤维素含量.【结果和结论】结果表明,目标菌为一株链霉菌Streptomyces sp.;在小叶榕碎枝条上接种不同用量(5%、10%、15%)的该菌一级发酵液,培养45 d后,与对照相比,木质素质量分数可降低22.48%,半纤维素质量分数可降低26.60%.

复合木质素降解菌对麦秸降解及相关酶活的研究

研究在优化固态培养基上复合木质素降解菌Tf1+JG1连续发酵对麦秸的降解及相关酶活的变化,通过检测木质素过氧化物酶(LiP)、锰过氧化物酶(MnP)和漆酶(Lac)的活力及发酵麦秸的木质素和粗蛋白含量,计算失重率和木质素降解率,结果表明:Tf1+JG1发酵30d时麦秸木质素降解率达到57%,粗蛋白含量提高60.71%,从而提高麦秸饲料利用率和营养价值。

木质素降解菌的筛选

采用愈创木酚法筛选出木质素降解菌X_2,并对其进行摇床培养,观察其生物学特性。研究表明:X_2在第8天生长最快,12d后生长速度开始下降;X_2生长最适温度为28℃,最适pH值为4.4;第10天木质素降解酶酶活最高,LiP为550.23u/mL,MnP为660.32u/mL,Lac活力很低,仅为20u/mL。此外,发现X_2的木质素的降解率也很高,在第35天达到43.31%。

木质素降解菌株产木质素降解酶的研究

采用液体静止培养,通过对分离筛选获得的两株高效木质素降解菌株15-1和14-7的发酵产木质素酶条件进行优化,得出结论:两株菌的最佳碳源均为稻草,最佳氮源均为尿素,最佳温度均为30℃。在最佳培养条件下进行发酵产酶,测得14-7的木素过氧化物酶和锰过氧化物酶活力分别为0.350 U.mL-1和0.080 U.mL-1;而15-1的木素过氧化物酶和锰过氧化物酶活力分别为0.300 U.mL-1和0.072 U.mL-1。

不同碳氮源对复合木质素降解菌木质素降解酶系活力的影响

通过小麦秸秆固态发酵试验,研究了不同的碳、氮源对2株侧耳属白腐真菌Tf1(Pleurotus sajor-caju)和JG1(Pleurotus Cornucopiae Roll)混合发酵产酶活力的影响。结果表明,Lip和MnP是复合木质素降解菌Tf1+JG1主要的木质素降解酶。以淀粉为碳源,麸皮为氮源时总酶活最高,分别为1419.01U/g和1626.64U/g。

木质素降解菌16-2发酵麦麸生产膳食纤维的最佳工艺及其物化特性

用木质素降解菌16-2发酵麦麸制取膳食纤维,以总膳食纤维含量作为指标,确定最佳的发酵条件,并对最佳发酵条件下获取的膳食纤维制品的物化特性进行研究.结果表明:最佳的发酵条件为pH值6.0,发酵温度28℃,发酵时间72 h;在最优发酵条件下获得的产品的总膳食纤维(TDF)为82.41%,不溶性膳食纤维(IDF)为55.12%,可溶性膳食纤维(SDF)为27.60%;膳食纤维的溶胀性和持水力分别为0 mL?g-1和4.2 g?g-1;其纤维素、木质素、粗蛋白、灰分质量分数分别为30.12%、18.28%、7.39%和15.04%;获得的膳食纤维对重金属离子Cd2+、Pb2+和Cu2+的最大束缚量分别为66.9、249.6和15.9μmol?g-1,对H2O2的清除率为23.1%.由此可见,利用微生物发酵法所制得的麦麸膳食纤维的持水力和生理活性较好.

木质素降解菌对腐殖质形成的影响的研究

采用接种培养方法研究了不同木质素降解菌对木质素降解率、腐殖质总量、各组分含量及胡敏酸E4/E6的影响。结果表明,接种黄孢原毛平革菌和栗褐链霉菌对稻草的降解均有所提高,56天培养后,二者的木质素降解率分别达到40.86%和31.04%,而对照组(只含有土著微生物)只有10.56%。接种黄孢原毛平革菌和栗褐链霉菌显著提高了腐殖质产量,这两种不同木质素降解菌产生腐殖质的最大值分别是对照组的2.10和2.13倍,但二者降解木质素形成腐殖质的途径有所不同。培养结束后,各条件下土壤中胡敏酸E4/E6均有所增加,表明胡敏酪的芒构化程度有所减弱。

木质素降解菌的筛选及产漆酶培养条件的优化

以树枝和树皮为样品,利用愈创木酚平板法和鞣酸平板法筛选得到一株产漆酶能力强的木质素降解菌.通过菌丝形态观察,初步认为该菌株为白腐菌.对菌株高产漆酶的液体培养条件进行了优化,最后获得的优化工艺为:温度为28～35℃,转速为140r.min-1,初始pH为5,诱导剂CuSO4加入量为0.5mmol.L-1.在该条件下漆酶的产量为178.6U.mL-1.

不同碳氮源对复合木质素降解菌木质素降解能力的影响

通过室内小麦秸秆固态发酵试验,研究了不同的碳、氮源对复合侧耳属白腐真菌Tf1(P.pulmonarius)和JG1(P.cornucopiae)降解麦秸中木质素能力的影响。结果表明,以葡萄糖为碳源,酒石酸铵为氮源能显著提高复合木质素降解菌对木质素的降解能力,发酵9d后小麦秸秆的失重率为14.87%,木质素含量为8.68%,木质素降解率为22.95%(p<0.05)。

一株木质素降解菌的筛选鉴定及其在堆肥中的应用

为提高农林废弃物堆肥中木质素的降解效率,促进堆肥腐熟,提高堆肥品质,研究筛选了一株高效木质素降解菌株,并应用于猪粪与枯枝落叶混合堆肥。研究结果表明,筛选菌株YZC3对木质素的降解率达到79.2%,可同时产生木质素过氧化物酶、锰过氧化物酶和漆酶,其中锰过氧化物酶活性最强,为16.4 U/mL。经形态学和ITS分子鉴定,确定YZC3其为粉红粘帚霉(Clonostachys rosea strain)。将其应用于堆肥中,可延长高温持续天数6 d和二次发酵天数3 d,堆肥结束时T值降为0.59,而对照堆肥为0.86,显著促进了堆肥腐熟。YZC3还有助于提高堆肥产品中腐植酸含量,减少堆肥中全氮的损失,是一种极具应用价值的堆肥菌剂。

1株木质素降解菌的筛选、鉴定及液态发酵条件优化

【目的】制作应用于园林绿化废弃物的以木质素降解菌为原材料的高效液体菌剂。【方法】通过苯胺蓝平板褪色圈法和愈创木酚平板变色圈法从分离纯化得到的22株菌中筛选目标菌株,并用内转录间隔区(ITS)测序法对目标菌株进行鉴定,然后通过单因素试验对目标菌株的培养时间、接种量和培养基配方(碳源和氮源)进行优化,最后根据单因素试验结果,采用均匀实验结合人工神经网络算法寻找目标菌株的最佳发酵条件。【结果】根据平板褪色和显色结果,选定菌株Q01为目标菌株。经鉴定,菌株Q01为栓菌属Trametes真菌。根据单因素试验和均匀试验结果,确定菌株Q01的最优发酵条件为培养时间5 d,接种菌液体积分数为12.5%;培养基配方为木质素磺酸钠14.00 g·L^(-1)、蛋白胨12.30 g·L^(-1)、酵母粉5.00 g·L^(-1)、豆饼粉3.00 g·L^(-1)、五水合硫酸铜0.12 g·L^(-1)、氯化钠0.53 g·L^(-1)、pH自然。优化条件后菌株Q01的生物量提高1.27倍,锰过氧化物酶活性提高31.71倍,木质素过氧化物酶活性提高19.12倍,漆酶活性略有降低,但3种木质素酶的总酶活性提高了4.38倍。【结论】菌株Q01在优化后的发酵条件下制得的液体菌剂具有高酶活性和高生物量的特点,在降解园林绿化废弃物木质素方面具有一定应用潜力。图6表3参29。

竹林环境中木质素降解菌株的分离鉴定

为筛选竹林环境中较为高效的木质素降解菌,采用分析苯胺蓝和愈创木酚培养基变色情况和相关酶活大小,从浙江临安市竹林地中分离筛选出一株高效木质素降解菌27-1,根据形态学观察和ITS序列分析,确定该菌株为多孔菌科栓菌属毛栓菌(Trametes hirsuta)。

基于人工神经网络算法的2株木质素降解菌固体菌剂的制备

【目的】以2株不同的木质素降解菌[菌株A(构巢曲霉Aspergillus nidulans)、菌株Q(栓菌属1种Trametes sp.)]为材料,分别制作应用于园林绿化废弃物降解或者堆肥的高效固体发酵菌剂。【方法】采用单因素试验确定固体发酵培养基的碳氮源和外加营养组分种类,再通过正交试验对碳氮源添加量进行优化,最后根据碳氮源优化结果,采用均匀实验结合人工神经网络算法寻找2株木质素降解菌的外加营养组分接种量和最佳固体培养基发酵条件。【结果】优化后的菌株Q固体菌剂培养基基质以麸皮30.000 g作为基底,添加豆饼粉3.000 g和玉米粉0.188 g;外加营养组分(按基质的质量比)为硫酸镁(MgSO_(4))1.434%、磷酸二氢钾(KH_(2)PO_(4))0.115%和硫酸亚铁(FeSO_(4)·7H_(2)O)1.497%;接种条件为接菌量6.000%、料水比(质量比)1.000∶0.992、保护剂1.000%。优化后的菌株A固体菌剂培养基基质以麸皮30.000 g作为基底,添加豆饼粉1.500 g和木质素磺酸钠1.500 g;外加营养组分(按基质的质量比)为MgSO_(4)0.123%、KH_(2)PO_(4)0.213%、FeSO_(4)·7H_(2)O 1.280%;接种条件为接菌量21.000%、料水比1∶1、保护剂19.000%。菌株Q和菌株A在优化培养基上发酵7~9 d获得最大发酵生物量,菌株Q的吸光度D(260)为0.596,菌株A的D(260)为0.478。【结论】2株木质素降解菌在优化后的发酵条件下制得的固体菌剂具有高生物量的特点,在降解园林绿化废弃物的木质素方面具有一定潜力。

柠条木质素降解菌的筛选及其降解条件优化

[目的]将柠条转化为可被牲畜高效利用的优良饲料。[方法]采用柠条作为单一碳源的筛选培养基、苯胺蓝筛选培养基从牲畜粪便以及柠条腐质中分离筛选出对柠条木质素具有降解作用的菌株D-11。[结果]经微生物形态学和16SrDNA鉴定,D-11为地衣芽孢杆菌,同时对D-11降解条件进行优化。菌株D-11的最佳降解条件如下:最佳氮源为蛋白胨;温度为28~32℃;pH为7;添加诱导剂Mn2+的浓度为0.6mmol/L。在最优条件下,菌株D-11对柠条木质素降解率为18.21%,半纤维素的降解率为16.11%,纤维素的降解率为13.19%。[结论]采用菌株D-11对柠条进行发酵降解,使其转化为可被牲畜利用的优良饲料。