HPLC法同时测定野木瓜片中木通苯乙醇苷B和绿原酸的含量

目的:建立同时测定野木瓜片中木通苯乙醇苷B和绿原酸含量的高效液相色谱法。方法:采用Thermo BDS HYPERSIL C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温为35℃;以甲醇-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱;流速为1.0 mL•min^(-1);检测波长为327 nm;进样体积为10μL。结果:木通苯乙醇苷B和绿原酸分别在0.51~20.60μg•mL^(-1)(r=1.000)和0.52~20.63μg•mL^(-1)(r=1.000)内呈良好线性关系;平均回收率分别为100.3%(RSD为1.1%)和105.9%(RSD为1.4%)。测定5批次样品,木通苯乙醇苷B和绿原酸含量分别为0.083~1.115 mg•g^(-1)和0.161~1.204 mg•g^(-1)。结论:本法可为野木瓜片的质量评价标准提高提供参考依据。

RP-HPLC测定木通中木通苯乙醇苷B的含量

目的：建立木通药材中木通苯乙醇苷B的HPLC分析方法。方法：采用Phenomenex Luna C18（4．6mm×250mm，5μm）柱，以甲醇．水．磷酸（35：65：0．05）为流动相，流速1．0mL·min^-1，检测波长330nm，柱温35℃。结果：木通苯乙醇苷B在0．04～0．86μg呈良好的线性关系，r=0．9998，平均回收率97．2％。对3个基源（三叶木通、五叶木通、白木通）的木通药材及其他部位（根、叶、果实）共39个样品进行了含量测定，各样品含量在0．021％～0．745％。结论：方法简单，重复性好，适合用于木通药材的质量控制。

双波长高效液相法同时测定双香排石颗粒中的马钱子苷、当药苷、断氧化马钱子苷、迷迭香酸和木通苯乙醇苷B

目的建立高效液相双波长切换法同时测定双香排石颗粒中马钱子苷、当药苷、断氧化马钱子苷、迷迭香酸和木通苯乙醇苷B的含量。方法采用Alltima C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;以乙腈-甲醇（1∶3）（A）-0.1%磷酸溶液（B）为流动相进行梯度洗脱;柱温为35℃;流速为1.0 ml/min;进样量为20μl;马钱子苷、断氧化马钱子苷和当药苷检测波长为240 nm,迷迭香酸和木通苯乙醇苷B检测波长为330 nm。结果马钱子苷、当药苷、断氧化马钱子苷、迷迭香酸和木通苯乙醇苷B在给定浓度范围内线性范围分别为5.91~118.20μg/ml（r=0.9995）、4.10~82.00μg/ml（r=0.9991）、8.13~162.60μg/ml（r=0.9993）、12.57~251.40μg/ml（r=0.9998）和4.95~99.00μg/ml（r=0.9997）,线性关系良好;平均加样回收率（n=6）和RSD值分别为96.88%（1.31%）、99.09%（1.47%）、98.29%（1.59%）、98.82%（1.42%）和97.51%（0.86%）。结论本文建立的双波长HPLC方法同时测定双香排石颗粒中马钱子苷、当药苷、断氧化马钱子苷、迷迭香酸和木通苯乙醇苷B含量。方法灵敏度高、简便、准确、重现性好,为评价双香排石颗粒质量控制提供可靠方法。

超高效液相色谱串联质谱法测定龙胆泻肝丸中木通苯乙醇苷B含量

目的 建立测定龙胆泻肝丸中木通苯乙醇苷B含量的超高效液相色谱串联质谱法。方法 色谱柱为Waters ACQUITY UPLC®BEH C_(18)柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,进样量为10μL。电喷雾离子源(ESI-),多反应监测模式(MRM),毛细管电压0.5 kV,锥孔电压-55 V,锥孔气流量50 L/h,脱溶剂气流量900 L/h,脱溶剂气温度550℃,木通苯乙醇苷B检测离子对m/z 477→161、m/z 477→133和m/z 477→315。结果 木通苯乙醇苷B质量浓度在0.103 4~5.170 0μg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 9);精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于4.0%;平均加样回收率为104.96%,RSD为4.36%(n=6)。36批样品中均含有木通苯乙醇苷B,含量为14.42~255.02μg/g。结论 所建方法精密度、稳定性、重复性均较好,可用于测定龙胆泻肝丸中木通苯乙醇苷B的含量,并可快速甄别是否有不投料或伪品假冒行为。

高效液相色谱法测定木通属植物苯乙醇苷B含量

以江西、湖南、四川、安徽4省的38份木通植物为试材,采用高效液相色谱法建立木通属植物苯乙醇苷B含量的测定方法,并测定木通藤茎中苯乙醇苷B的含量。结果表明：1）采用85%甲醇回流提取1 h,可以完整提取木通苯乙醇苷B;木通苯乙醇苷B在0.04~1μg呈良好的线性关系,R2=0.9991,平均回收率99.44%。2）木通苯乙醇苷B在三叶木通、五叶木通、白木通藤中均含有,含量0.01%~1.194%,其中在三叶木通中的成熟藤中含量最大。

RP-HPLC法同时测定排石颗粒中木通苯乙醇苷B、京尼平苷酸和丹皮酚的含量

目的建立能同时测定排石颗粒中木通苯乙醇苷B、京尼平苷酸和丹皮酚含量的RP-HPLC法。方法将排石颗粒研细后,加甲醇超声提取,滤过。以Agilent eclipse zorbax SB-C_(18)色谱柱分离;检测波长:254 nm(京尼平苷酸)、273 nm(丹皮酚)和330 nm(木通苯乙醇苷B);流速1.0 mL·min^(-1);柱温30℃;进样量10µL;流动相A:甲醇,流动相B:0.5%冰乙酸溶液,采用梯度洗脱;二极管阵列检测器定量检测。结果京尼平苷酸、木通苯乙醇苷B和丹皮酚依次在质量浓度0.981~98.1、0.393~39.3和0.199~19.9 mg·L^(-1)内有良好的线性,重复性RSD为2.61%、1.49%和2.02%,平均加标回收率依次为100.14%、99.70%和100.27%,溶液稳定性和仪器精密度均良好。结论该方法具有快速、准确等特点,适用于排石颗粒的质量控制。

高效液相色谱法测定安徽产木通药材中3种有效成分含量

目的测定安徽产木通药材中木通苯乙醇苷B、齐墩果酸和常春藤皂苷元的含量,考察安徽产木通药用价值。方法采用高效液相色谱法,木通苯乙醇苷B的色谱测定条件为:Alltima C18柱(4.6 mm×250mm,5μm),流动相是甲醇-水-磷酸(35∶65∶0.05),流速1.0mL/min,检测波长330nm,柱温35℃;齐墩果酸和常春藤皂苷元的色谱测定条件为:Alltima C18柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相是乙腈-水(65∶35),流速1.0mL/min,检测波长203nm,柱温25℃。结果安徽宁国、明光产木通药材中木通苯乙醇苷B、齐墩果酸和常春藤皂苷元含量高于市售木通。结论安徽宁国、明光产木通药材质量较好,可进一步开发利用。

龙胆泻肝丸中木通的鉴别研究

目的:建立龙胆泻肝丸中木通的定性鉴别方法,确保木通药味质量可控。方法:采用超高效液相色谱串联质谱法进行鉴别分析,以Waters ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×100 mm,1.7μm)为色谱柱,0.1%甲酸溶液-乙腈为流动相(梯度洗脱),流速为0.2 mL/min,进样量2μL,柱温30℃;质谱采用电喷雾离子源(ESI)负离子模式,进行子离子扫描监测。结果:样品的一级质谱出现与木通的特征性成分木通苯乙醇苷B保留时间一致的色谱峰,样品的二级质谱主要碎片离子为477、315、281、179、161、135、119和89,与木通苯乙醇苷B对照品一致。36批市售样品均含有木通的特征性成分木通苯乙醇苷B,未出现川木通、关木通和甘木通冒充木通投料的风险。结论:所建方法能准确鉴别龙胆泻肝丸中木通的特征性化学成分,可用于控制龙胆泻肝丸的质量。

红藤水溶性部位的LC-MS分析及抗炎活性成分的虚拟筛选

目的:基于分子对接,确定中药红藤75%乙醇提取物的水溶性部位(HT_(W))中的抗炎物质基础及相关的炎症因子。方法:采用液质联用(LC-MS)技术确定HT_(W)中的主要化学成分。采用软件Autodock Vina对化合物与肿瘤坏死因子-α、白介素-1β转化酶、IL-6、IκB激酶β、诱导性一氧化氮合酶(iNOS)及Toll样受体2(TLR2)等6种靶点蛋白的结合能进行打分,虚拟筛选出抗炎活性成分以及关键靶点。结果:通过LC-MS分析,共确定14个含量较为丰富的小分子化合物,主要为苯丙酸、苯乙醇和木脂素类化合物,其中绿原酸类化合物含量最高。分子对接结果显示,TLR2与HT_(W)中化合物的结合能平均值最高,其中与化合物2、3、7、11-13的结合能均超过-9.0 kcal/mol,远超过阈值-7.2 kcal/mol。TLR2与木通苯乙醇苷B(12)的结合能为-9.7 kcal/mol,与绿原酸(3)及其异构体(2)亦有较好的结合力。iNOS对HT_(W)中化合物也较敏感,与苯乙醇苷类化合物10的结合能为-9.8 kcal/mol。结论:绿原酸、苯乙醇苷等化合物可能是红藤水溶性部位(HT_(W))最重要的抗炎活性物质;其抗炎关键靶点可能是TLR2和iNOS。

HPLC法同时测定车前草中4种成分的含量

目的:建立HPLC法同时测定车前草中大车前苷、毛蕊花糖苷、木通苯乙醇苷B和木犀草苷含量的方法。方法:采用Agilent TC-C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;柱温30℃;流动相为甲醇(A)-0.1%甲酸溶液(B),梯度洗脱;流速1.0 mL/min;检测波长330 nm。并采用聚类分析和主成分分析对两种基原车前草进行比较。结果:在上述色谱条件下,大车前苷、毛蕊花糖苷、木通苯乙醇苷B和木犀草苷获得良好分离;质量浓度分别在2.29~458μg/mL(r1=0.9999)、2.65~530μg/mL(r2=0.9999)、1.35~270μg/mL(r3=0.9999)、1.60~320μg/mL(r4=0.9999)范围内呈良好的线性关系;平均加样回收率(n=6)分别为98.84%、98.97%、98.94%、99.34%。比较发现两种基原车前草中4种成分差异明显,聚类分析和主成分分析可以将两者分开。结论:该方法简便、准确,重复性好,可为车前草的质量控制提供实验依据。

基于HPLC-QAMS法的复方苦参肠炎康片中10种成分质量控制研究

目的建立高效液相一测多评法同时测定复方苦参肠炎康片中大车前苷、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、木通苯乙醇苷B、黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、苦参醇Ⅰ、苦参酮和槐属二氢黄酮G的含量。方法采用Agilent Zorbax SB C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温30℃。乙腈-体积分数0.1%甲酸溶液为流动相梯度洗脱,体积流量1.0 mL·min^(-1)。检测波长分别为330 nm(大车前苷、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、木通苯乙醇苷B)、280 nm(黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素)和295 nm(苦参醇Ⅰ、苦参酮和槐属二氢黄酮G)。以黄芩苷为内参物,建立其他9种成分的相对校正因子,计算各成分含量。结果大车前苷、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、木通苯乙醇苷B、黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、苦参醇Ⅰ、苦参酮和槐属二氢黄酮G分别在2.110~84.40 mg·L^(-1)(r=0.9994)、7.730~309.2 mg·L^(-1)(r=0.9998)、1.570~62.80 mg·L^(-1)(r=0.9996)、0.4300~17.20 mg·L^(-1)(r=0.9993)、24.64~985.6 mg·L^(-1)(r=0.9997)、3.460~138.4 mg·L^(-1)(r=0.9994)、1.230~49.20 mg·L^(-1)(r=0.9993)、3.709~151.6 mg·L^(-1)(r=0.9999)、14.53~581.2 mg·L^(-1)(r=0.9994)和5.410~216.4 mg·L^(-1)(r=0.9991)范围内线性关系良好。平均加样回收率(RSD)分别为98.42%(1.5%)、100.1%(0.82%)、97.92%(1.1%)、96.87%(1.2%)、100.1%(0.62%)、98.90%(0.81%)、97.96%(1.3%)、99.19%(0.90%)、99.58%(0.57%)和99.01%(1.4%)。复方苦参肠炎康片中大车前苷、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、木通苯乙醇苷B、黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、苦参醇Ⅰ、苦参酮和槐属二氢黄酮G含量一测多评法计算结果与外标法实测值无明显差异。结论所建立的一测多评法可作为复方苦参肠炎康片多指标成分质量控制方法。

基于UHPLC-MS/MS技术的导赤丸中24个成分定量测定联合化学计量学质量评价

目的建立UHPLC-MS/MS法同时测定导赤丸中黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、千层纸素A、盐酸小檗碱、表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸药根碱、盐酸巴马汀、大黄素、大黄酸、大黄素甲醚、芦荟大黄素、大黄酚、栀子苷、西红花苷I、西红花苷II、哈巴苷、哈巴俄苷、木通苯乙醇苷B、芍药苷、连翘酯苷A和连翘苷的含量。方法采用Phenomenon C18柱(100 mm×2.1 mm,2.6μm)色谱柱;以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;柱温40℃;进样量为1μL;采用电喷雾离子源(ESI),以多反应监测(MRM)模式正、负离子同时扫描。结果24种成分在各自的质量浓度范围内线性关系良好(r≥0.9977);精密度、稳定性、重复性等均符合方法学要求,平均加样回收率为92.7%~107.9%,RSD均小于6.5%。15批样品中24种成分的平均质量分数在6.834~7667.200μg/g,聚类分析、主成分分析结果一致,均可将3个厂家的样品准确划分为3类。结论所建立的UPLC-MS/MS法24个成分含量测定方法重现性好,简便、准确、稳定,能客观、全面、有效地确定不同生产企业样品中主要成分的差异,可为导赤丸质量评价体系的完善提供依据。

基于高效液相色谱-二极管阵列检测法测定妇科分清丸中8个成分的含量

目的:建立同时测定妇科分清丸中8个成分(京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、芍药苷、甘草酸、阿魏酸、木通苯乙醇苷B、小檗碱、川芎嗪)的方法。方法:采用DIKMA Platisil ODS色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温30℃,流动相为乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B),采用梯度洗脱(0~20 min,10%A→16%A;20~30 min,16%A→40%A;30~50 min,40%A→80%A),流速为1 mL·min^(-1),,变换波长检测(240 nm,京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、芍药苷、甘草酸;327 nm,阿魏酸、木通苯乙醇苷B、小檗碱;295 nm,川芎嗪)。结果:京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、芍药苷、甘草酸、阿魏酸、木通苯乙醇苷B、小檗碱、川芎嗪的线性范围分别为0.050~0.297μg(r=0.999 6),0.125~0.750μg(r=0.999 9),0.029~0.176μg(r=0.999 5),0.030~0.180μg(r=0.999 7),0.024~0.146μg(r=0.999 9),0.012~0.071μg(r=0.999 6),0.023~0.138μg(r=0.999 9),0.016~0.094μg(r=0.999 8),平均回收率分别为97.0%(RSD=1.8%)、98.3%(RSD=1.2%)、100.7%(RSD=1.5%)、98.6%(RSD=1.5%)、97.0%(RSD=1.9%)、98.4%(RSD=1.8%)、97.9%(RSD=1.5%)、107.7%(RSD=1.5%);3批样品中京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、芍药苷、甘草酸、阿魏酸、木通苯乙醇苷B、小檗碱、川芎嗪的含量分别为0.130~0.131、0.588~0.589、0.158~0.164、0.130~0.135、0.043~0.045、0.052~0.059、0.170~0.171、0.042~0.050 mg·g^(-1)。结论:该法能测定妇科分清丸京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、芍药苷、甘草酸、阿魏酸、木通苯乙醇苷B、小檗碱、川芎嗪的含量,可作为妇科分清丸质量控制的一个有效的方法。

高效液相色谱法测定蒙药连翘四味汤散中多指标成分的含量

目的:建立同时测定蒙药连翘四味汤散(连翘、拳参、麦冬、木通)中活性成分连翘苷、连翘酯苷A、没食子酸和木通苯乙醇苷B的含量测定方法。方法:采用RP-HPLC法,色谱柱为Promosil C_(18)柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-1.0%磷酸水为流动相梯度洗脱,流速为1 mL·min^(-1),柱温40℃,检测波长为277 nm(连翘苷)、330 nm(连翘酯苷A和木通苯乙醇苷B)和272 nm(没食子酸),进样量为10μL。结果:连翘四味汤散中连翘苷的含量在0.038~0.051 mg·g^(-1)之间、连翘酯苷A的含量在0.127~0.135 mg·g^(-1)之间、没食子酸的含量在0.079~0.085 mg·g^(-1)之间、木通苯乙醇苷B的含量在0.009 6~0.010 3mg·g^(-1)之间。结论:该方法快速简便、稳定可靠,适用于连翘四味汤散的质量控制。