染料木黄酮抑制前列腺癌进展和转移的机制研究

目的探讨染料木黄酮对前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及其分子机制。方法将前列腺癌细胞株LNCaP和CWR22RV1细胞分为对照组(常规培养)和实验组(50μmol/L染料木黄酮处理)。采用噻唑蓝(MTT)法分析染料木黄酮对前列腺癌细胞增殖能力的影响,通过细胞划痕实验和Transwell实验分析染料木黄酮对前列腺癌细胞迁移及侵袭能力的影响。Western blot检测上皮间质转化(EMT)中间质标志物E-钙黏蛋白(ECadherin)、N-钙黏蛋白(N-Cadherin)、波形蛋白(Vimentin)以及肿瘤干细胞标志物CD44和Oct4的蛋白水平。结果MTT实验结果表明,染料木黄酮具有抑制前列腺癌细胞增殖的作用。实验组LNCaP和CWR22RV1细胞划痕闭合率较对照组下调,穿过Transwell膜的细胞数量减少(P<0.05)。Western blot实验证实,染料木黄酮能够下调前列腺癌细胞中间质的标志物N-Cadherin、Vimentin和肿瘤干细胞的标志物CD44与Oct4蛋白表达,上调上皮细胞标志物ECadherin表达(P<0.01)。结论染料木黄酮通过抑制EMT过程并降低前列腺癌细胞的干性,从而降低前列腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。

染料木黄酮的生物学功能与作用机制及其在畜禽生产中的应用研究进展

染料木黄酮是一种在大豆及其制品中天然存在的异黄酮,具有抗炎、抑菌、抗癌、抗氧化及免疫调节等多重生物学功能。染料木黄酮作为一种植物雌激素,可以有效预防慢性疾病、心血管疾病及激素相关癌症,在食品保健、医药治疗等领域已得到广泛应用。在畜牧养殖中,染料木黄酮对动物生长性能、繁殖性能、抗氧化能力等也有一定积极效应,发挥类雌激素作用时还可起到双向调控作用。本文就染料木黄酮的理化性质、生物学功能与作用机制及其在畜禽生产中的应用研究进行综述,旨在为推动染料木黄酮在畜禽生产中的开发利用提供理论依据。

PPARγ及其配体介导的自噬在染料木黄酮抑制前列腺癌细胞活性中的作用

目的:探讨染料木黄酮对前列腺癌PC-3细胞恶性生物行为学的抑制作用、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor,PPARγ)及其配体介导的自噬在该过程中的作用。方法:以0、10、20、40和60μmol/L染料木黄酮处理前列腺癌细胞,采用cell counting kit-8细胞计数(CCK-8)法检测细胞增殖率,采用定量反转录聚合酶链反应检测细胞中PPARγ信使核糖核酸(messenger ribonucleic acid,mRNA)相对表达量。将前列腺癌细胞随机分为对照组、罗格列酮组、染料木黄酮组、罗格列酮+染料木黄酮组。各组以相应药物处理24 h后,采用CCK-8法检测细胞增殖率,采用划痕试验检测细胞迁移能力,采用Transwell实验检测细胞侵袭能力,采用蛋白质印迹法检测PPARγ、p62、Beclin1蛋白相对表达量及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ。结果:与0μmol/L染料木黄酮组对比,10、20、40和60μmol/L染料木黄酮组细胞增殖率降低、PPARγmRNA相对表达量升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组对比,罗格列酮组和染料木黄酮组细胞增殖率、划痕愈合率和p62降低,侵袭细胞数减少,PPARγ、Beclin1和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ升高(P<0.05)。与罗格列酮组和染料木黄酮组对比,罗格列酮+染料木黄酮组细胞增殖率、划痕愈合率和p62降低,侵袭细胞数减少,PPARγ、Beclin1和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ升高(P<0.05)。结论:染料木黄酮可抑制前列腺癌细胞增殖,降低迁移和侵袭能力,其可能是通过激活PPARγ诱导细胞自噬而发挥作用。

染料木黄酮对大菱鲆生长、消化酶活力和肠道组织结构的影响

以鱼粉为主要蛋白源配制了5种不同剂量的染料木黄酮(0、5、10、20、100mg·kg-1)的实验饲料,来研究其对大菱鲆生长、消化酶活力和肠道组织结构的影响。结果表明:饲料中添加不同剂量的染料木黄酮对大菱鲆幼鱼的存活、终末体重、特定生长率、饲料效率、摄食率以及肥满度、脏体比和肝体比均未产生显著影响(P>0.05);饲料中添加染料木黄酮显著降低了鱼体粗蛋白和粗脂肪含量并显著提高了鱼体水分含量(P<0.05),但对鱼体灰分含量无显著影响(P>0.05);饲料中添加染料木黄酮显著降低了胃蛋白酶、胰蛋白酶和肠淀粉酶的活性(P<0.05),但对肠蛋白酶和胃淀粉酶的活性未产生显著影响(P>0.05);饲料中染料木黄酮的添加量达100mg/kg时会对鱼的肠道组织结构产生一定的破坏作用,而其他处理组间肠道组织结构没有明显的差异。实验结果表明,饲料中添加高剂量的染料木黄酮对大菱鲆的生长性能和消化吸收会造成一定的负面作用,使用大豆蛋白做蛋白源时,其含有的染料木黄酮的抗营养作用不可忽视。

染料木黄酮对人胃癌细胞生长抑制作用研究

目的 : 探讨染料木黄酮对体外培养的人胃癌 SGC- 790 1细胞的抑制和诱导细胞发生凋亡的作用。方法 : 用 MTT法、集落形成实验、透射电镜及流式细胞仪的方法 ,观察染料木黄酮处理 SGC- 790 1后细胞生长和细胞凋亡。结果 : (1 ) MTT法和集落形成实验证实染料木黄酮对 SGC- 790 1细胞生长有抑制作用 ,抑制作用呈剂量 -效应关系 ; (2 )透射电镜可见 SGC- 790 1细胞在形态学上出现典型的细胞核固缩、碎裂等凋亡细胞的形态学改变 ; (3)流式细胞仪检测到凋亡峰。结论 : 染料木黄酮对 SGC- 790 1细胞有抑制作用 ,而这一作用的机制之一是通过诱导人胃癌细胞发生凋亡 。

染料木黄酮的物化常数测定

目的 :测定染料木黄酮在不同溶剂中的溶解度、油 /水分配系数、pKa值。 方法 :采用紫外分光光度法。结果 :染料木黄酮在丙酮、乙醇、甲醇中溶解度较乙醚、乙酸乙酯、氯仿、正辛醇等溶剂中高 ;在酸性条件下油 /水分配系数较大 ;pKa值7.994 2。结论 :染料木黄酮为弱酸性脂溶性药物。

染料木黄酮在Beagle犬体内代谢动力学的剂量依赖性研究

目的 研究不同剂量染料木黄酮(genistein)在Beagle犬体内的药代动力学特征。方法 将染料木黄酮制成混悬液,按2 67, 5 34及10 68mg·kg-1给Beagle犬灌胃,于灌胃后不同时间在犬前腿部静脉采抗凝血标本,用葡糖醛酸酶溶液处理血浆。采用反相高效液相色谱法测定血浆中母体药物及葡糖醛酸结合型药物浓度,血浆药物浓度时间数据用3P97药代动力学软件分析。结果 染料木黄酮在Beagle犬体内过程符合二室开放模型,当剂量为2. 67mg·kg-1时,母体药物MRT为52 9min,AUC为6 .7mg·min·L-1,葡糖醛酸结合型药物AUC为33 9mg·min·L-1;当剂量为5 .34mg·kg-1时,母体药物MRT为224 .8min,AUC为26. 1mg·min·L-1,葡糖醛酸结合型药物AUC为70 .1mg·min·L-1;当剂量为10 68mg·kg-1时,母体药物MRT为267. 7min,AUC为33 .2mg·min·L-1,葡糖醛酸结合型药物AUC为140. 5mg·min·L-1。结论 染料木黄酮首过代谢突出,血浆中药物主要以葡糖醛酸结合形式存在。在一定范围内随给药剂量增加,母体药物的吸收量趋于饱和,药物的血浆消除半衰期延长。

木黄酮对心肌成纤维细胞增殖的影响

观察木黄酮对心肌成纤维细胞 (CF)增殖的影响 .采用培养的新生大鼠CF ,以 [3 H]TdR参入率作为细胞增殖指标 ;流式细胞仪分析细胞周期 .结果显示木黄酮 (0 .5～ 50 μmol·L- 1)具有浓度依赖性地抑制 2 .5%胎牛血清刺激CF增殖的作用 ,并将CF细胞周期阻抑在G2 /M期 ;

三氧化二砷联合木黄酮抑制CML细胞增殖的研究

目的 探索三氧化二砷 (As2 O3)联合酪氨酸激酶抑制剂木黄酮抑制慢性粒细胞性白血病 (CML)细胞增殖的效应及可能机制 ,为临床应用提供理论依据。方法 以CML细胞系K5 6 2为模型 ,通过细胞增殖检测、形态学观察、肿瘤集落形成和琼脂糖凝胶电泳手段 ,观察比较As2 O3 与木黄酮对CML细胞的增殖抑制效应。结果 经≥ 2 5 μmol/LAs2 O3 和 5mg/L木黄酮处理 2天后的K5 6 2细胞可出现增殖受抑和凋亡的形态学改变及DNA片段化 ,二者具有协同抑制作用。结论 As2 O3 与木黄酮能分别或协同抑制K5 6 2细胞生长 。

染料木黄酮对大鼠胰岛素分泌的调控作用

我国糖尿病的发病率近年来呈现快速增长的趋势。2型糖尿病以胰岛素分泌相对不足和胰岛素抵抗为主要特征，因此，促进胰岛素分泌是临床治疗2型糖尿病的重要手段。染料木黄酮（genistein）主要来源于豆类植物，大量证据表明染料木黄酮对糖尿病、慢性缺氧、骨质疏松等有一定的预防和治疗作用［1－3］。研究显示，染料木黄酮可改善2型糖尿病大鼠的胰岛素抵抗［1］，但其对胰岛素分泌的作用及机制尚不明晰。本研究采用放免法测定胰岛素分泌，膜片钳测定胰岛β细胞钾离子通道电流等方法，观察染料木黄酮对大鼠胰岛素分泌的影响，并探讨其作用机制。

染料木黄酮对去势抵抗前列腺癌22RV1细胞增殖的影响

目的:探讨大豆异黄酮对去势抵抗前列腺癌细胞增殖的抑制作用及可能机制。方法:以不同浓度[0.0、12.5、25.0、50.0、100.0和(或)200.0μmol/L]的染料木黄酮处理去势抵抗前列腺癌细胞22RV1,在24、48、72 h采用CCK-8法测定细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期,免疫细胞化学法检测Ki-67表达水平,Western blot法检测PSA、P53、CyclinD1、PCNA及AR表达水平。结果:染料木黄酮对22RV1细胞具有抑制作用。流式细胞术结果显示,染料木黄酮阻滞细胞周期于G2/M期(P<0.05)。免疫细胞化学法检测结果显示,染料木黄酮能够抑制细胞中Ki-67的表达(P<0.05)。Western blot结果显示染料木黄酮处理后细胞中CyclinD1、PCNA、PSA、AR的表达下降,P53的表达上调(P<0.05)。结论:染料木黄酮能够抑制22RV1细胞的增殖,其作用机制可能与阻滞细胞G2/M期及下调周期蛋白CyclinD1表达有关。

β—环糊精和染料木黄酮包合作用的研究

以β-环糊精与染料木黄酮的摩尔比、包合温度及包合时间为变量设计正交试验优化β-环糊精与染料木黄酮的包合反应工艺参数,利用紫外和红外吸收光谱、热重和导数热重分析、差示扫描量热分析等测试方法对β-环糊精与染料木黄酮的包合物和主、客体分子进行了表征;比较了包合物与游离主、客体的光谱性质的差异,实验结果表明:β-环糊精与染料木黄酮能形成摩尔比为1:1的水溶性好、热稳定性强的包合物,该包合物可广泛应用于多个领域。

染料木黄酮通过抑制VEGF表达抑制人口腔癌TCA8113细胞增殖

目的:观察染料木黄酮对人口腔癌TCA8113细胞增殖的影响,并探讨其作用机制。方法:MTT法、细胞计数法及集落形成实验检测细胞增殖;蛋白质免疫印迹检测血管内皮生长因子(VEGF)、细胞外信号调节激酶(ERK)及p-ERK的蛋白水平。结果:染料木黄酮能显著抑制TCA8113细胞的增殖,其抗增殖活性具有浓度依赖性;染料木黄酮还可剂量依赖性地降低VEGF、ERK及p-ERK的蛋白水平;VEGF的表达可被ERK特异性抑制剂U0126所抑制;VEGF受体拮抗剂阿西替尼及U0126均显著抑制TCA8113细胞的增殖。结论:染料木黄酮可抑制人口腔癌TCA8113细胞的增殖,其机制可能与其抑制ERK表达及活化,进而抑制VEGF的表达有关。

染料木黄酮、拟雌内酯及槲皮素对孕烷X受体介导的CYP3A4转录的调节作用

目的 研究植物雌激素中的染料木黄酮(GST)、拟雌内酯 (COM)及槲皮素 (QU)能否通过活化人孕烷X受体 (PXR)诱导CYP3A4的转录表达。方法用PXR依赖的瞬时转染报告基因试验检测 3种植物雌激素的诱导作用。结果 GST ,COM和QU均能通过活化PXR诱导HepG2 细胞CYP3A4基因的转录表达 ,最大诱导倍数 (相对于用浓度为 0 .1%的DMSO处理的细胞 )在本实验中分别为 11.97(P <0 .0 1) ,2 .98(P <0 .0 1)和 3.2 8(P <0 .0 1)。结论 GST ,COM和QU均能诱导CYP3A4的转录表达 ,其作用机制通过活化PXR。GST ,COM和QU的摄入可能影响其他CYP3A4底物尤其是药物在体内的代谢。

染料木黄酮对去势抵抗性前列腺癌VCaP细胞增殖的影响

目的:研究染料木黄酮(GDN)对去势抵抗性前列腺癌细胞VCa P增殖的抑制作用及可能机制。方法:以不同浓度(0、12.5、25、50、100、200μmol/L)的GEN处理去势抵抗性前列腺癌细胞VCaP,分别在24、48、72 h以CCK-8法测定细胞增殖;以流式细胞术检测细胞周期;以免疫荧光法检测Ki-67表达水平;以Western印迹法检测Cyclin D1、PCNA、P53及PSA表达水平。结果:12.5、25、50、100、200μmol/L GEN作用于VCaP细胞72 h后,对VCaP细胞的抑制率分别为(25.38±0.02)%、(31.14±0.29)%、(45.27±0.03)%、(52.19±0.05)%与(68.21±0.19)%,与对照组[(10.08±0.02)%]相比差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞术显示GEN可导致VCa P细胞G2/M期阻滞(P<0.05)。免疫细胞化学法检测显示GEN能够抑制细胞中Ki-67的表达。Western印迹显示去势抵抗性前列腺癌细胞内PSA、Cyclin D1、PCNA随着GEN浓度的增加逐渐下调,P53随着GEN浓度的增加逐渐上调(P<0.05)。结论:GEN能够抑制体外培养的去势抵抗性前列腺癌细胞VCaP增殖,其作用机制可能与阻滞细胞周期并伴随相关周期蛋白表达的改变有关。

染料木黄酮通过抑制EGFR/ERK通路抗肝癌SMMC7721细胞增殖

目的探讨染料木黄酮对肝癌细胞SMMC7721增殖的抑制作用及其作用机制。方法以染料木黄酮干预肝癌细胞SMMC7721。MTT法及集落形成实验检测细胞增殖;蛋白质免疫印迹检测染料木黄酮对ERK及EGFR活化的影响;免疫共沉淀法检测染料木黄酮对SMMC7721细胞ERK及EGFR间相互作用的影响。结果染料木黄酮能显著抑制肝癌细胞增殖,其抗增殖活性具有浓度依赖性;染料木黄酮还可抑制ERK与EGFR的活化,并抑制ERK及EGFR间的相互作用。结论染料木黄酮可抑制肝癌细胞增殖,其机制可能与其抑制EGFR/ERK通路活化有关。

染料木黄酮诱导HL-60细胞凋亡的作用途径

背景：近年的研究发现，染料木黄酮具有抗氧化、抑制血管生成、调节细胞周期等生物活性。目的：观察染料木黄酮在体外诱导HL-60细胞凋亡过程中，对HL-60细胞c—Myc，Bcl-2和增殖细胞核抗原表达水平的影响，并分析其作用途径。设计、时间及地点：对比观察的细胞分子生物学实验，于2006—03／2007—09在广东医学院血液疾病研究室完成。材料：人早幼粒细胞白血病细胞株HL-60来源于中国典型培养物保藏中心。方法：HL-60细胞分别以0．1，0．5和1．0mmol／L的染料木黄酮处理12～16h，显微镜下观察并经DNA凝胶电泳检测细胞凋亡情况。分别经碘化丙啶染色和经异硫氰酸荧光素标记的鼠抗人Bcl-2，c-Myc及增殖细胞核抗原单克隆抗体作用后，用流式细胞仪检测凋亡细胞和Bcl-2，c-Myc和增殖细胞核抗原阳性细胞的表达百分率。主要观察指标：①HL-60凋亡细胞的形态学变化。②HL-60细胞凋亡百分率和c-Myc，Bcl-2及增殖细胞核抗原表达阳性率。结果：①HL-60细胞经染料木黄酮处理12～16h，显微镜下可见核碎裂和凋亡小体等细胞凋亡形态学改变：DNA凝胶电泳显示典型的凋亡DNA梯形条带。②0．1～1．0mmol／L的染料木黄酮在诱导HL-60细胞凋亡同时，下调Bcl-2，c-Myc和增殖细胞核抗原表达水平。且均呈剂量效应关系。结论：染料木黄酮可能通过抑制Bcl-2和c-Myc的表达水平从而诱导HL-60细胞凋亡；而增殖细胞核抗原表达下调，则可能是染料木黄酮诱导HL-60细胞凋亡的结果。

染料木黄酮在雌雄大鼠体内的药动学

目的观察染料木黄酮(genistein)在雌、雄大鼠体内的药动学差异。方法大鼠ig给予9mg·kg^(-1)染料木黄酮,用反相高效液相色谱法测定不同时间大鼠血浆中原型药物、β-葡萄糖醛酸结合型药物及组织器官中药物的浓度。结果药物在卵巢和子宫中的分布显著高于睾丸,在其他组织器官内的分布未观测到明显的雌雄差异。雌性大鼠的AUC,ρ_(max)和t_(1╱2)分别为1.120 mg·h·L^(-1),0.167mg·L^(-1)和5.767h。而雄性大鼠的AUC,ρ_(max)和t_(1/2)分别为0.592mg·h·L^(-1),0.106mg·L^(-1)和4.486h。雌性大鼠血浆中葡萄糖醛酸结合形染料木黄酮浓度高于雄性大鼠。结论染料木黄酮在雌雄大鼠性器官中的分布具有差异显著;与雄性大鼠相比,雌性大鼠对染料木黄酮的吸收多、葡萄糖醛酸结合量高,使染料木黄酮的半衰期延长。