C/EBPβ作为LIF的中介维持小鼠胚干细胞于未分化状态(英文)

C/EBPβ(CCAAT/增强子结合蛋白β,又称NF-IL6)是一个多功能的转录因子,其主要功能之一是促进细胞分化。白血病抑制因子(LIF)是一个细胞因子,其在不同类型的细胞中具有不同的效应:它诱导前脂肪细胞分化,却抑制小鼠胚多能干细胞(mES)的分化。在mES中,C/EBPβ究竟起什么作用,尚未有报道。本文首次报告在mES中,在LIF蛋白存在下,C/EBPβ的作用是维持mES的未分化状态,即C/EBPβ是LIF的调控对象。主要事实如下。在mES细胞中,内源C/EBPβ蛋白的表达量与加到培养基中的LIF蛋白的量呈正相关。而在未分化的mES细胞中人工高表达的外源C/EBPβ蛋白和其截短形式LIP蛋白,在LIF存在下,也不但不促进反而抑制mES细胞分化,C/EBPβ的大分子异型蛋白还显著促进mES细胞的增殖;而且,在LIF去除后,这种促进mES细胞增殖的效应还能持续一段短时间。当LIF不存在时,C/EBPβ和LIP才如所预期的那样,诱导分化相关基因表达并促进细胞分化。C/EBPβ和LIP所调控的某些分化相关的基因的表达水平,当LIF存在时,也比没有LIF时显著降低。因此,在mES细胞中C/EBPβ是受LIF的调控而作为LIF的中介,维持mES于未分化状态。

不同饲细胞对维持角膜缘干细胞未分化状态的方法

角膜缘干细胞体外扩增后用于组织工程角膜移植,可成功治疗多种原因引起的角膜缘干细胞缺乏症,由于角膜缘干细胞在体外培养过程中数量少且容易分化,寻找一种理想的饲养层与其共培养以达到扩增角膜缘干细胞的目的成为目前的研究热点.本文将就目前各饲养层的制备、机制等方面的研究进展做一综述.

人胚胎干细胞培养体系的研究进展

人胚胎干细胞(hES细胞)是来源于着床前人囊胚内细胞团的、具有自我更新能力和分化全能性的细胞。由于具有体外无限增殖和分化成三个胚层来源的各种细胞的潜能,hES细胞具有重要的科学意义和巨大的医学应用价值。目前,hES细胞常规体外培养技术多采用培养基与饲养层相结合的方法,但常规方法存在异源病原体污染的可能。近年来,优化hES细胞体外培养体系的研究取得较大进展,现就饲养层、无饲养层培养体系进行综述,分析目前在维持hES细胞未分化状态的优化培养研究中取得的新进展和存在的问题。

大鼠骨髓间充质干细胞作为滋养层培养小鼠胚胎干细胞

目的:探讨大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)作为滋养层体外培养小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cells ESCs)的可能.方法:收集BALB/C小鼠3.5d胎龄的囊胚,接种于大鼠骨髓间充质干细胞的滋养层上,培养5～6d后挑取胚胎干细胞集落,胰酶消化传代.观察细胞集落生长情况,通过碱性磷酸酶染色、细胞核型分析对细胞生物学特性进行检测.结果:ES细胞呈集落性生长,碱性磷酸酶组织化学染色阳性,具有正常核型及多向分化潜能.结论:大鼠MSCs可以作为滋养层体外培养小鼠胚胎干细胞,并能保持未分化状态.

人胚胎干细胞优化培养的进展

人胚胎干细胞(humanembryonicstemcell,hEScell)是来源于着床前人囊胚内细胞团(innercellmass,ICM)的、具有自我更新能力和分化全能性的细胞。由于hES细胞能在一定条件下分化成三个胚层来源的各种细胞,所以它具有重要的基础研究价值和巨大的临床应用前景,可应用于人早期胚胎发育过程的研究、药物毒物筛选、细胞移植治疗、基因治疗等领域。目前,世界上已经建立了多株hES细胞系,最早建立的hES细胞系是生长在小鼠胚胎成纤维(mouseembryonicfibroblast,MEF)细胞上的,培养体系中含血清等动物源性成分,这些成分可能引起动物源性病原体或支原体的污染,从而限制了hES细胞的临床应用。近年来,科学家们在优化hES细胞的体外培养体系方面做出了很大的努力并取得了长足进展,已经开始采用无血清、无饲养层细胞、无外源性蛋白、成分明确的培养体系进行hES细胞建系及培养,从而在一定程度上解决了上述问题。本文主要从饲养层细胞、无饲养层培养体系、培养基质、细胞因子等方面综述了hES细胞建系和维持其未分化状态的优化培养所取得的最新进展和存在的问题。

论从“无”开启的“存在主义”自由——基于萨特意识的前反思理论视角

萨特的存在主义自由是通过意识的本体论结构得以揭示的。意识的存在是以一种原初的未分化的、充实的状态呈现,萨特称之为自在的存在,相当于海德格尔的"无"或"此在"。虚无是存在的另一面。在意识结构中,前反思意识比反思意识更原始。自由既是绝对的,同时又不是知识论式的预设,自由发生在意识否定性的虚无化运动过程之中。人从"无"开启自由,通过虚无,成就自由与存在。