南瓜未授粉子房培养形成再生植株的研究

以‘贵阳小青瓜’(南瓜)未授粉子房为外植体,在离体条件下研究热激时间和TDZ浓度对胚状体诱导的影响。进一步优化试验步骤,探讨直接获得形成再生植株的方法,加速育种进程。结果表明:35℃高温黑暗培养5d后转入25℃光照培养90d能直接形成再生植株;培养基中附加TDZ浓度在0.04~0.06mg/L能诱导离体子房直接产生再生植株,并以0.06mg/L诱导效果最好,出胚率为22.57%,植株再生率为14.30%。

西瓜未授粉子房的离体培养

为了探讨西瓜未授粉子房诱导率的影响因素,以‘早春红玉’、‘西农9号’和‘小绿皇’为供试材料进行西瓜未授粉子房的离体培养,研究供体植株的黑暗热激处理、基因型、不同取样时间、2,4-D浓度和不同激素浓度组合等因素对其芽点诱导率的影响。结果表明:西瓜未授粉子房离体培养以33℃的条件下黑暗热激4 d效果最佳;以开花前1 d的子房诱导率最高为17.2%;3个品种中仅‘早春红玉’获得了再生植株,且在激素组合为4.0 mg·L-12,4-D+2.0 mg·L-16-BA+0.5 mg·L-1NAA时芽点率最高为15.0%;根据再生植株的根尖染色体数目,初步鉴定再生植株中有单倍体植株,还有二倍体和四倍体植株。

南瓜未授粉子房离体培养及植株再生

以南瓜(Cucurbita moschata)未授粉子房为外植体,在离体条件下研究了激素种类、基因型、胚囊发育时期、消毒方式和热激处理时间对胚状体诱导效果的影响,旨在建立完善的南瓜未授粉子房离体诱导再生体系。结果表明,MS+4.0mg·L–1 2,4-D+0.5 mg·L–1 NAA+1.0 mg·L–1 6-BA和MS+0.04 mg·L–1 TDZ两种培养基胚状体的诱导率都较高,分别为19.8%和20.1%,二者相比,使用TDZ诱导更加简单;在6个南瓜品种中,2个生长势较强的品种(雪峰蜜本和鱷鱼南瓜)胚状体诱导率较高,适合作为离体雌核诱导的实验材料;开花当天的子房先切片后消毒可以有效降低愈伤组织的形成,提高胚状体的诱导率;在黑暗且35°C条件下热激5天有利于子房的转绿和出胚。将子叶胚转移至无激素的MS培养基上得到再生植株并移栽成活。经鉴定有7个再生植株的染色体数目n=x=22,气孔保卫细胞叶绿体数的平均值为4.28个,是单倍体植株。