大鼠未固定神经组织DiI荧光示踪方法的研究

目的用DiI荧光示踪剂对大鼠未固定神经组织染色,观察神经组织在冰冻保存条件下DiI的示踪效果,以及扩散距离和扩散时间,从而获得使用DiI示踪未固定神经组织的良好方法。方法大鼠脑和脊髓组织取材,放置在-20℃条件下冰冻,用DiI标准溶液表面涂布小脑皮质或脊髓断端,保持-20℃冰冻,染色达到一定时间后用多聚甲醛固定液固定组织,以阻断DiI的传导,冰冻切片观察。结果大鼠未固定神经组织冰冻后,DiI扩散速度较快,均可见顺向。逆向示踪显示,神经元胞体及突起染色效果良好。结论大鼠未固定神经组织在离体后冰冻保存较用固定液保存,其DiI扩散速度明显加快。