同位素稀释液相色谱串联质谱法测量血清未结合雌三醇的协作研究

目的用同位素稀释液相色谱串联质谱(ID-LC/MS/MS)候选参考方法进行实验室间血清未结合雌三醇(u E3)协作研究,通过该研究进一步确认方法的性能特征(正确度和精密度),并将该方法在国内参考实验室推广,推动u E3标准化进程。方法依据ISO/WD 15725-1和GB/T 6379标准,拟定我国血清u E3协作研究方案。协作研究分为两个阶段:初步试验和正式试验,共9家参考实验室参加。按要求收集5个浓度水平样品并进行均匀性评价,分发到9家参考实验室,要求每个样品每日重复测量5次,连续测量3 d。计算各实验室测量结果的偏移和精密度,用格拉布斯(Grubbs)检验和柯克伦(Cochran)检验识别离群值和离群实验室。根据合格实验室的结果计算靶值,并向离群实验室和偏出允许范围的实验室提供整改建议。结果样品均匀性评价:所有样品测量结果计算F值均小于F0.05(9,20)临界值,样品中u E3是均匀的。初步试验:Grubbs检验,1个实验室测量结果为离群值;Cochran检验,2个实验室检验结果为离群值。剔除离群值后计算靶值;2017E301为(22.08±0.24)nmol/L;2017E302为(33.46±1.67)nmol/L。2个实验室结果超出允许范围。正式试验:Grubbs检验,所有实验室测量结果均未检出离群值;Cochran检验,3个实验室数据出现离群值。剔除离群值后计算靶值,2017E303为(10.36±0.35)nmol/L,2017E304为(15.47±0.26)nmol/L,2017E305为(46.97±1.19)nmol/L;各实验室间测量结果不精密度分别为1.14%~2.21%、0.79%~1.93%、0.60%~2.09%,测量结果偏移分别为-6.18%~4.83%、-2.26%~2.39%、-4.19%~4.07%。结论通过组织开展协作研究,确认各参考实验室通过协作研究方案能够快速建立并运行u E3候选参考方法,除个别实验室外各实验室的检测性能满足预定要求(不精密度<3.0%,偏移<7.5%),进一步确认了该方法的性能和各实验室运行参考方法的能力。通过初步研究和正式研究对研究方案的各实验环节进行了验证和完善;推动了u E3项目参考方法在我国参考实验室的运行,为后续厂商试剂主校准品联合定值或标准物质研制搭建了平台,促进u E3项目的标准化。

同位素稀释液相色谱串联质谱法测定人血清未结合雌三醇

目的建立测定人血清中未结合雌三醇的同位素稀释液相色谱串联质谱法(ID-LC/MS/MS)。方法以2,3,4-^(13)C_3-雌三醇为内标,与血清采用重量法准确混合,正己烷/乙酸乙酯混合溶剂提取,用高效液相色谱串联质谱分析,电喷雾三重四级杆串联质谱多重反应监测模式检测雌三醇与内标的特征离子,标准曲线法定量。结果方法的回收率为98.90%～102.44%,批内精密度与批间精密度的变异系数(CV)分别为0.46%～1.49%和1.13%、1.00%～2.16%和1.71%、0.35%～0.90%和0.26%;方法检出限为0.05 ng/ml,定量限为0.20 ng/ml。结论建立了同位素稀释液相色谱串联质谱法测定人血清未结合雌三醇,方法准确、简便、精密。

孕中期四联筛查唐氏综合征的参考价值

目的:探讨孕中期绒毛膜促性腺激素(HCG)+甲胎蛋白(AFP)+未结合雌三醇(uE3)+抑制素a四联筛查唐氏综合征的参考价值,为推算唐氏儿的风险率及根据其风险率高低进行更深层次的筛查与诊治提供理论与实践依据。方法:回顾性分析本院2017年3月至2018年3月接受孕中期唐氏综合征筛查并随访成功的201例单胎孕妇(7例胎儿有唐氏综合征)作为本次实验的研究对象,检测AFP、HCG及uE3、抑制素A浓度,唐氏综合征风险值的三联及四联筛查均采用SURUSS相关参数计算,并统计、分析其不同切割值水平对唐氏综合征筛查效果。结果:201例受试者中不同年龄段的MOM值总异常率为24.88%(50/201),其中HCG、AFP、uE3及抑制素A异常率为8.96%、9.95%、1.99%及3.98%。羊水穿刺胎儿染色体检测时发现,共7例(3.48%)染色体异常,其中孕母血清学MOM值≥1项异常者5例,占71.43%,MOM值正常者胎儿的染色体异常发病率1.32%(2/151)较MOM值异常者胎儿染色体异常发病率10.00%(5/50)低,两者相比差异显著(P<0.05)。SURSS计算发现,切割值水平(引自满婷婷:1/100、1/250和1/380)时四联(AFP+uE3+HCG+抑制素A)筛查的假阳性率各3.12%、5.75%和7.68%,较三联筛查低0.85%、2.01%和3.52%。而在切割值相同时,四联筛查的假阳性率均显著低于二联筛查和单项筛查,差异显著(P<0.05)。经Pearson分析发现,抑制素A与HCG、AFP有相关性,其中胎儿正常孕妇的抑制素A与HCG、AFP呈正相关,胎儿为唐氏综合征的孕妇的抑制素A与HCG、AFP呈负相关,差异显著(P<0.05),而抑制素A与uE3则无相关性(P>0.05)。结论:在唐氏综合征的孕中期筛查过程中,科学、合理的予以HCG+AFP+uE3+抑制素A四联筛查的有效性更高,有良好的临床应用与推广价值。

孕中期AFP、β-HCG联合uE3检验用于产前出生缺陷筛查的临床价值

目的 探究孕中期甲胎蛋白(AFP)、血清β-人绒毛促性腺激素(β-HCG)、未结合雌三醇(uE3)联合检验,在产前出生缺陷筛查中的临床价值。方法 研究时间为2022年01月-2022年12月,研究对象为进行常规产检的孕中期孕妇,共计150例,均需接受AFP、β-HCG、uE3检测,分析其对产前出生缺陷筛查价值。结果 经血清学筛查150例孕妇中高风险孕妇占10.67%。三联指标联合检测敏感性60.00%、特异性91.03%、诊断符合率90.00%。结论 孕中期AFP、β-HCG联合uE3检验在产前出生缺陷筛查中具有较高临床价值,值得使用。

AFP、β-HCG、UE_(3)联合检验在孕中期产前出生缺陷筛查中的应用价值

目的探讨甲胎蛋白(AFP)、血清β-人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)、未结合雌三醇(uE_(3))联合检验在孕中期产前出生缺陷筛查中的临床价值。方法选取3575例常规产检的孕中期孕妇,均联合检测AFP、β-HCG、uE_(3),探讨其对产前出生缺陷的筛查价值。结果3575例孕中期孕妇经血清学筛查后高风险孕妇占2.38%,其中89.41%为21-三体综合征高风险,2.35%为18-三体综合征高风险,8.24%为神经管缺陷(NTD)高风险;82例经羊水穿刺检查后5例确诊为出生缺陷儿,均引产于28周内;产前血清AFP、β-HCG、uE_(3)联合检测筛查出生缺陷的敏感性为100%,特异性为97.73%,阳性预测值为4.71%,阴性预测值为100%。结论AFP、β-HCG、uE_(3)联合检验对孕中期产前出生缺陷筛查具有一定临床价值。