反相高效液相色谱-蒸发光散射检测法同时测定阿胶中的17种未衍生氨基酸

建立了反相高效液相色谱-蒸发光散射检测法（HPLC—ELSD）同时测定中药阿胶中17种未衍生氨基酸含量的方法。采用Prevail^TM C18色谱柱（250mm×4．6mmi．d．，5μm），以乙腈-0．7％三氟醋酸溶液（含5．0mmol／L七氟丁酸）为流动相进行线性梯度洗脱，流速为0．8mL／min，在漂移管温度115℃、氮气流量2．5L／min条件下，在25min内即可完成对阿胶中17种氨基酸的分离测定。氨基酸质量浓度为0．073～2．327g／L时，其峰面积的对数值与质量浓度的对数值线性关系良好；17种氨基酸的加样回收率为93.5％～104．8％；信噪比为3时，测得氨基酸的最低检测限介于18．2mg／L与54．6mg／L之间。该法快速、简便、准确，可作为阿胶中氨基酸的直接测定方法，亦为其他药物中氨基酸的分析提供了参考。

HPLC-ELSD法测定疏血通注射液中17种未衍生氨基酸含量

目的:建立高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD),直接测定疏血通注射液中17种未衍生氨基酸含量的方法。方法:以异亮氨酸等氨基酸为标准品;色谱柱:Prevail^(TM) C_(18)(4.6mm×250mm,5μm);流动相A:乙腈,流动相B:5.0mmol·L^(-1)七氟丁酸的0.7%三氟醋酸溶液,流动相A与B比例:0min为0∶100,5min为0∶100,8min为15∶85,25min为35∶65;漂移管温度:115℃;气体流量:2.5L·min^(-1);流速:0.8mL·min^(-1);柱温:35℃;进样量:10μL。结果:在25min内即可完成对疏血通注射液中17种氨基酸的分离测定,氨基酸质量浓度0.071～2.285g·L^(-1)时,其对数值与峰面积对数值线性关系良好,17种氨基酸的加样回收率为92.9%～105.1%,信噪比为3时,异亮氨酸检出限为20mg·L^(-1)。结论:该法不需要专门的氨基酸分析仪和衍生化氨基酸,操作简便,有足够的灵敏度,结果准确可靠。

高效液相色谱-蒸发光散射检测法直接检测20种未衍生基本氨基酸

应用国产蒸发光散射检测器(ELSD),建立了一种采用反相高效液相色谱-蒸发光散射检测器(RHPLC-ELSD)直接测定20种未衍生基本氨基酸的分析方法,并将其用于氨基酸注射液中氨基酸含量的测定。采用BISCHOFFTMC18 AQ PLUS色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分离,以甲醇-0.2%七氟丁酸溶液(含0.1%三氟乙酸)为流动相进行梯度洗脱,流速0.8 mL/min,ELSD飘移管温度40℃,载气流量2.5 L/min,对20种基本氨基酸进行分离检测。氨基酸的质量浓度在30～300 mg/L范围内,其峰面积的对数值与进样质量的对数值呈良好的线性关系;氨基酸的检出限(信噪比(S/N)>3)介于24～100 ng之间,样品加标回收率为90.6%～106.0%。结果表明,该系统及方法操作简便快速、准确可靠,无需依靠专门的氨基酸分析仪或衍生处理氨基酸即可直接测定氨基酸注射液中氨基酸含量,为药品、食品及化工生产等领域混合氨基酸样品的直接检测提供了参考。

反相高效液相色谱法直接测定水蛭中14种未衍生氨基酸的含量

建立了一种反相高效液相色谱/蒸发光散射检测器方法,同时测定中药水蛭中14种未衍生氨基酸含量.以异亮氨酸等氨基酸为标准品、Prevail^TM C18（250 mm×4.6 mm i.d., 5 μm）为色谱柱、梯度洗脱、漂移管温度115℃、气体流量2.5 L/min,在25 min内即可将水蛭中14种氨基酸分离测定.氨基酸质量浓度0.072～2.29 g/L时,其对数值与峰面积对数值线性关系良好;14种氨基酸的加样回收率为94.8%～104.4%;信噪比为3时,异亮氨酸检出限为20 mg/L.该法快速、简便、准确,可作为水蛭中氨基酸直接测定方法,亦可为其它中药中氨基酸分析提供参考.

未衍生毛细管气相色谱法直接测定金思力胶囊中α-亚麻酸的含量

建立了未衍生毛细管气相色谱法直接测定金思力胶囊中α-亚麻酸含量的方法。结果表明,在0.541～109.7 ng,峰面积A与α-亚麻酸的质量m呈良好的线性关系,相关系数为0.999 7(n=7)。同一对照品溶液连续进样6次时,峰面积的相对标准偏差为1.21%。以S/N=3计算,方法的检出限为0.25 ng。被分析的金思力胶囊样品中α-亚麻酸的百分含量为4.29%(RSD=0.76%,n=5),平均回收率为101.3%(RSD=2.80%,n=5)。

橄榄油和山茶油中5种未衍生化脂肪酸含量的分析对比

建立了超高效合相色谱-质谱(UPC2-M S)法快速分析橄榄油中软脂酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸等5种脂肪酸的方法,并比较了橄榄油和山茶油中上述5种脂肪酸的含量差异。以标准品为对象比较了4种色谱柱的分离效果,进行色谱柱的筛选;考察了流动相中助溶剂、柱温和背压、补偿溶剂对分离的影响。助溶剂对保留时间和色谱峰形有影响;降低背压,升高柱温,保留时间增大;补偿溶剂对目标物的离子化效率影响不大。经过优化,确定采用UPC2BEH2-EP色谱柱,以超临界CO2-甲醇/乙腈(V/V=1:1)为助溶剂,在50℃柱温和13.79 M Pa背压条件下,以质谱检测器进行检测,3 min内完成植物油样品的分析。橄榄油和山茶油中的脂肪酸组成比较接近,属于高油酸(含量均>76%)类型的植物油,总不饱和脂肪酸含量远高于饱和脂肪酸,且该结果与气相色谱法测定结果无显著差异。

HPLC-ELSD测定复方甘草酸铵注射液中2种未衍生氨基酸的含量

目的:用HPLC-ELSD法直接测定复方甘草酸铵注射液中2种未衍生氨基酸的含量。方法:使用Agilent-ODS C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相A(乙腈)-B(5.0 mmol.L-1七氟丁酸的0.7%三氟醋酸溶液),梯度洗脱(0～5 min,0%A;5～10 min,15%A;10～25 min,35%A),ELSD漂移管温度80℃,氮气流量2.0 L.min-1,流速0.8 mL.min-1,柱温35℃,进样10μL。结果:甘氨酸进样量在4.858～29.145μg,盐酸半胱氨酸进样量在0.386～2.316μg时,其对数值与峰面积对数值线性关系良好,回收率分别为97.43%,96.99%。结论:测定方法简便,结果准确,可用于复方甘草酸铵注射液中2种氨基酸的测定。

苯并(硫)吡喃-4-酮衍生物的合成与表征

以取代或未取代苯并(硫)吡喃-4-酮(1a～1c)为原料,分别与呋喃甲醛和6-氨基胡椒醛发生缩合反应合成了一系列的取代或未取代苯并(硫)吡喃衍生物2a～2c和3a～3c,化合物2a～2c和3a～3c的结构经IR,1HNMR,MS和元素分析进行鉴定和表征.

高效液相色谱-串联质谱法直接定量分析植物酵素中多种氨基酸成分

利用高效液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）方法直接分析植物酵素中多种未衍生化的氨基酸。样品用甲醇稀释5倍,超声提取30 min,离心10 min（速度为10 000 r/min）,取上清液分析。采用色谱柱Venusil ASB C18（250mm×4.6 mm,5μm）分离,以甲醇-乙酸-水混合溶液为流动相体系进行梯度洗脱,流速为0.5 mL/min,质谱喷雾电压为3 kV,离子源温度为150℃,去溶剂温度350℃,去溶剂气体流速为800 L/h。碰撞气氩气的流速保持压力为0.17 Pa。以被测物的提取离子流图峰面积进行定量,该分析方法的线性范围为0.5~200μmol/L（r2〉0.99）,回收率为86%~110%,可对植物酵素中16种氨基酸成分进行定量分析。该方法操作简便快速、准确可靠,还适用于食品、药品及天然产物中多种氨基酸成分的定量分析。

超高效合相色谱-质谱法快速分析食用植物油中常见脂肪酸

建立了超高效合相色谱.质谱（ UPC2.MS）快速分析6种食用植物油（玉米油、葵花籽油、大豆油、茶油、菜籽油、花生油）中棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸等5种常见脂肪酸的方法，并比较了这6种食用油中上述5种脂肪酸的含量差异。采用皂化反应对植物油进行前处理，以 ACQUITY UPC2 BEH 2.EP 色谱柱（100 mm×2.1 mm，1.7μm）为分析柱，以超临界CO2.甲醇／乙腈（1∶1， v／v）为流动相进行梯度洗脱，流速为0.8 mL／min。在电喷雾负离子模式下进行检测，外标法定量。结果表明：5种脂肪酸标准物质在0.5～100 mg／L范围内呈现良好的线性关系，相关系数为0.9985～0.9998，定量限（ S／N≥10）为0.15～0.50 mg／L；在3个添加水平下，样品的加标回收率为89.61％～108.50％；方法重复性的相对标准偏差（ RSD）为0.69％～3.01％。该方法简单、快速、分离效果好，无需对脂肪酸样品进行衍生化，已成功地用于玉米油、葵花籽油、橄榄油、茶油、大豆油和花生油等6种食用油中常见脂肪酸含量的测定。

超高效合相色谱-质谱法快速检测植物油脂中5种脂肪酸含量

建立了一种超高效合相色谱-质谱（UPC2-MS）技术快速检测植物油脂中棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸5种常见脂肪酸的方法。样品用正己烷溶解后,采用超临界CO2-甲醇/乙腈（体积比,1∶1）梯度洗脱,经ACQUITY UPC2BEH 2-EP（2.1 mm i.d.×100 mm,1.7μm）色谱柱分离,通过质谱检测器对目标化合物进行分析,外标法定量。结果表明,5种脂肪酸在0.5-100 mg/L范围内具有良好线性（相关系数不小于0.998 5）;在3个加标水平下,样品的回收率为90.5%-105.4%,相对标准偏差为0.8%-2.9%;方法的检出限（S/N≥3）为0.07-0.26 mg/L。相比于其他方法,本方法简单快速,分离效果好,且无需对脂肪酸样品进行衍生化,为UPC2技术在油脂相关分析领域的进一步应用和研究提供了参考。

串联质谱法测定血清中20种游离氨基酸含量

目的建立串联质谱法(LC-MS/MS)测定血清中20种游离氨基酸含量,为临床血清氨基酸检测提供可靠方法。方法血清样本未经衍生化处理,采用LC-MS/MS法,于电喷雾源(ESI)正离子模式下使用选择反应性离子扫描(SRM)进行定量。结果 20种氨基酸线性相关系数为0.9957～0.9999,日内、日间变异系数分别为0.5%～9.0%和0.6%～12.3%,加样回收率为87.6%～115.5%。样本在常温放置24h,8次冻融循环及-20℃冻存20d等条件下稳定性良好。结论该方法简便、稳定、定量准确,适用于血清氨基酸的临床检测,为氨基酸代谢疾病的临床诊断提供了重要的生化依据。

超高效合相色谱-质谱法分析研究单甘酯乳化剂中单甘酯的主要组成

建立了超高效合相色谱-质谱(UPC^2-MS)快速分析3种单甘酯乳化剂(单油酸甘油酯、单亚油酸甘油酯、单硬脂酸甘油酯)中单棕榈酸甘油酯、单硬脂酸甘油酯、单油酸甘油酯和单亚油酸甘油酯等4种主要的单甘酯的方法,并比较了这3种不同类别的乳化剂中此4种单甘酯的含量差异。采用正己烷/异丙醇(7:3,V/V)直接溶解样品,以ACQUITY UPC^2 BEH 2-EP色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm)为分析柱,以超临界CO_2-甲醇/乙腈(1:1,V/V)为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 mL/min。在电喷雾正离子模式下进行分析,外标法定量。结果表明:单棕榈酸甘油酯、单硬脂酸甘油酯、单亚油酸甘油酯在0.20~50mg/L范围内具有良好线性,单油酸甘油酯在0.25~62.5 mg/L范围内具有良好的线性(相关系数不小于0.9983);定量限(S/N≥10)为0.018~0.046 mg/L;在3个加标水平下,样品的回收率在88.0%~110.5%,相对标准偏差为1.1%~4.1%。本方法简单、快速、分离效果好,无需对单甘酯样品进行衍生化,为乳化剂中单甘酯的含量分析提供了一种新的色谱技术手段。

超高效合相色谱-质谱法测定大豆油中5种脂肪酸含量

建立了大豆油中5种脂肪酸的超高效合相色谱-质谱（UPC2-MS）分析方法,这5种脂肪酸分别为棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸和亚麻酸.待测物经皂化反应后,用正己烷溶解,经ACQUITY UPC2BEH 2-EP色谱柱分离,以CO2-甲醇/乙腈（体积比为1∶1）为流动相进行梯度洗脱,通过质谱检测器测定、外标法定量.方法的最低检出限为0.07 mg·L^-1,脂肪酸的加标回收率为90.50%-105.38%,相对标准偏差为0.81%-2.93%.结果表明,该方法灵敏度高、分离效果好、测定结果准确.

超高效液相色谱-质谱测定牛乳中游离氨基酸

建立牛乳中未衍生游离氨基酸的超高效液相色谱串联质谱的测定方法。样品采用酸化乙腈沉淀蛋白,正己烷脱脂,氮吹至近干后初始流动相复溶,超声溶解离心过膜后检测。结果显示:在14 min内所分析目标物得到较好的分离,浓度与峰面积的线性关系良好,相关系数在0.991 2~0.999 8之间,回收率在76%~124%,相对标准偏差1.0%~12.9%。

超高效合相色谱-质谱法快速检测工业油酸中5种常见的脂肪酸

采用超高效合相色谱-质谱（UPC2-MS）技术,建立了工业油酸中5种常见的脂肪酸（软脂酸、硬脂酸、油酸、亚油酸和亚麻酸）的快速检测方法。样品用正己烷溶解,采用超临界CO2-甲醇/乙腈（1∶1,V/V）梯度洗脱,经Acquity UPC^2BEH 2-EP色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.7μm）分离,通过质谱检测器在负离子电喷雾模式下对目标化合物进行分析,外标法定量。通过对UPC^2-MS条件的优化,5种脂肪酸在3 min内实现有效分离,目标物在0.5～100 mg/L范围内具有良好的线性（相关系数大于0.9985）;在3个添加水平下,5种脂肪酸的回收率在89.3%～106.7%之间,相对标准偏差为0.8%～3.0%;方法检出限（S/N≥3）为0.07～0.26 mg/L。实际样品分析结果表明,本方法不但简单快速,分离效果好,而且无需对脂肪酸样品进行衍生化,同时为UPC2在油脂类相关领域的研究与开发提供一种快速有效的检测方法。

核壳液相色谱-蒸发光散射检测法直接检测20种氨基酸

目的 ：应用蒸发光散射检测器（evaporative light scattering detector,ELSD）、＂HALO＂核-壳型新型填料液相色谱柱,建立一种高效液相色谱-蒸发光散射检测法（HPLC-ELSD）直接测定20种未衍生氨基酸的分析方法,并将其用于复方氨基酸注射液中氨基酸含量的测定。方法 ：采用核-壳型HALO色谱柱（4.6 mm×150 mm,2.7 mm C18）,以甲醇-九氟戊酸-七氟丁酸-三氟乙酸-水为流动相进行梯度洗脱,流速0.5 ml/min,ELSD飘移管温度40℃,载气流速3.0 L/min,对20种基本氨基酸进行分离检测。结果 ：氨基酸的质量浓度在0.01~1.0 mg/ml范围内,其峰面积的对数值与进样质量的对数值呈良好的线性关系;氨基酸的检出限介于20~50 ng之间,样品加标回收率为89.0%~111.2%。结论 ：该方法操作简便快速、准确可靠,溶剂消耗少,为药品、食品、饲料及化工生产等领域混合氨基酸样品的直接检测提供了参考。

人血清中谷氨酰胺浓度超高效液相串联质谱检测方法的建立

目的：建立一种新颖的非衍生化的超高效液相串联质谱法（UPLC/MS/MS）测定人血清中谷氨酰胺（glutamine,Gln）的含量,为临床血清Gln检测提供可靠方法。方法：血清样本未经衍生化处理,采用UPLC/MS/MS法,流动相为乙腈-甲酸铵（4 mol·L^-1）溶液（80∶20）,电喷雾离子源（ESI）,正离子MRM扫描。以2-氨基丁酸为内标（IS）,Gln和IS的离子通道分别为m/z146.8→83.6和m/z103.42→57.72。结果：Gln在30-600μg·ml^-1浓度范围内线性关系良好（r2〉0.99）,低、中、高Gln质控（QC）样品的回收率分别（101.1±7.1）%、（98.8±6.2）%、（96.3±2.6）%,日内、日间RSD分别为7.7%、1.3%、4.3%和7.4%、4.0%、3.8%。样本在常温放置8 h、4℃放置24 h稳定性良好。结论：该方法简便、稳定、定量准确,适用于血清Gln的临床检测,为Gln的临床应用提供重要的生化依据。

LC-MS/MS法测定大鼠脑透析液中6种氨基酸含量的方法学建立

目的：建立液质联用（LC-MS/MS）法同时测定大鼠脑透析液中谷氨酸、γ氨基丁酸、天冬氨酸、甘氨酸、谷氨酰胺和牛磺酸等6种氨基酸的含量。方法：应用微透析技术采集大鼠目标脑区的透析液样品,选用Merck ZIC-HILIC柱（50 mm×2.1 mm,5μm）,流动相为10 mmol·L^-1醋酸铵的水溶液-乙腈（85∶15）,正离子方式检测,多反应监测（MRM）扫描,采用稀释法处理透析液样品。结果：透析液中上述6种氨基酸的线性范围为5-1 000 ng·m L^-1,定量下限范围为0.5-10 ng·m L^-1,批内、批间精密度均小于15%,氨基酸样品室温放置2 h,及预处理后16 h均稳定。结论：本方法操作简单,灵敏度高,选择性高,能够实现脑透析液中多种氨基酸神经递质的同时定量分析。