小鼠成熟卵丘-卵母细胞复合体蛋白质谱图的建立

目的通过聚丙烯酰胺二维凝胶电泳技术,全面展示小鼠成熟卵丘卵母细胞复合体(COC)的蛋白质表达谱。方法采用13cmpH3～10的非线性胶条进行双向凝胶电泳,分离成熟雌鼠COC总蛋白,并作质谱鉴定。结果获得了较高分辨率的小鼠成熟COC蛋白质表达谱图,并对胶上的3个蛋白点进行了质谱鉴定。结论蛋白质组学是全面分析COC蛋白表达的有效手段。成熟COC蛋白质表达谱的建立为研究卵泡发育机理提供了依据。

裙带菜与菠菜的色素蛋白质复合体的比较研究

裙带菜PSI复合体的 77K荧光发射光谱与菠菜的明显不同 ,缺少 730nm长波荧光峰 ,位于 715nm处。其捕光色素 蛋白质复合体有墨角藻黄素 叶绿素a/c 蛋白质复合体和叶绿素a/c 蛋白质复合体两种 ,菠菜只有一种叶绿素a/b 蛋白质复合体。

植物系统演化研究中的旁证——光合作用色素-蛋白质复合体

就光合作用色素-蛋白质复合体是否可以作为系统演化的证据谈了作者的看法。在低等植物类群藻类中,光合作用色素-蛋白质复合体特别是捕光色素-蛋白质复合体Ⅱ可以作为推测其彼此间亲缘关系的旁证;在高等植物中,其捕光色素-蛋白质复合体Ⅱ组成成分相同,说明它们在演化中的渊源性,从而为高等植物起源于同一生物类群提供旁证。

全冠牙体预备后影响牙髓-牙本质复合体反应因素的研究

目的:观察全冠牙体预备后牙髓牙本质复合体的反应及剩余牙本质厚度和修复时间对牙髓的影响。方法:选择因正畸需要拔除的健康第一前磨牙38颗,根据牙体制备的深度不同分为3组,暂时冠修复后分别于术后1,3,6周后拔除观察牙髓的炎症反应及剩余牙本质厚度。结果:全冠牙体预备后,牙髓组织主要表现为轻、中度的炎症反应。6周左右可见修复性牙本质形成。剩余牙本质厚度影响牙髓的反应,牙本质越厚,牙髓重度炎症的发生率越低(P<0.05)。结论:术后观察时间对牙髓预后的影响是以剩余牙本质的厚度为前提,剩余牙本质小于2mm时,时间与牙髓反应关系密切(P<0.01)。剩余牙本质为2～2.5mm时,时间与牙髓的反应相关(P<0.05)。但剩余牙本质厚度大于2.5mm时,时间与牙髓反应无关。

噪声引起小型猪耳蜗炎症复合体的激活及蛋白质组学研究

目的通过研究炎症复合体及相关通路在猪耳蜗中的激活,探讨噪声介导炎症复合体激活的关键分子机制,为噪声性耳聋的预防和治疗提供新靶点。方法采用小型猪为研究对象,建立噪声性耳聋模型,测试噪声暴露前后动物的ABR阈值,应用蛋白质组学iTRAQ、生物信息学、western blot、荧光实时定量PCR等技术,研究噪声刺激引起耳蜗炎症复合体的激活以及作用机制。结果正常小型猪ABR阈值为35.4±2.6 dB SPL,噪声后一天ABR阈值平均提高到72.1±4.1dB SPL,在4k Hz处听力损失最严重,高频听力损失较低频严重;噪声后七天平均ABR阈值恢复至52.8±4.7dB SPL,4k Hz以上听力恢复较低频稍差。iTRAQ实验共鉴定到蛋白质2158种,噪声暴露后较正常组具有显著差异表达的蛋白质共227个,富集在免疫过程的差异表达蛋白包括:ASC, caspase-1, IL-1 beta,CD59等。富集的KEGG pathway包括:阿尔兹海默病信号通路,帕金森病信号通路,MAPK信号通路,,氧化磷酸化通路等。结论噪声暴露后可能激活耳蜗内NLRP3受体介导的炎症复合体,通过caspase-1活化IL-1β、IL-18,并间接促进TNF-α等炎症因子上调,加剧耳蜗内炎症反应,导致耳蜗内重要结构的损伤,这一机制可能是噪声引起听力损失的重要原因。

血管内皮-钙粘附素/连环蛋白复合体在炎症微血管通透性方面的作用

VE-cadherin forms VE-cadherin/catenins complex by interacting with catenins,and VE-cadherin/catenins complex is an important component of adherens junctions(AJ). During inflammation ,different kinds of factors can increase the microvascular permeability eventually by causing the disassembly of VE-cadherin/catenins complex.

体外循环围术期血管内皮多糖-蛋白复合物层损伤动态变化研究

目的 研究体外循环围术期血管内皮多糖-蛋白质复合物层(EGL)损伤标志物动态变化及其临床意义。方法 对连续44例行体外循环下心血管手术患者在术前(麻醉诱导前)、体外循环开始、体外循环结束、术后6 h、术后1 d、术后3 d、术后5 d、术后7 d分别测量血浆血管EGL损伤标志物多配体蛋白复合物-1(Syndecan-1)、透明质酸(HA)、硫酸肝素(HS)、硫酸软骨素(CS)的浓度,在手术前后不同时间点测量动脉血气并记录乳酸浓度。采用方差分析比较各个时间点Syndecan-1、HA、HS、CS的浓度以及乳酸浓度是否具有统计学差异,并采用Pearson相关性分析比较EGL损伤标志物峰值浓度、乳酸峰值浓度、主动脉阻断时间、体外循环时间之间的相关性。结果 血管EGL损伤标志物Syndecan-1、HA、HS、CS的浓度在体外循环开始后即明显升高,在术后6 h均达到峰值,后逐渐下降并在术后7 d均降到与术前相近水平。患者动脉血乳酸浓度在术后6 h达到峰值,并在术后48 h恢复到术前水平。Syndecan-1、HA、HS、CS峰值浓度与主动脉阻断时间、体外循环时间、动脉血乳酸峰值水平呈正相关。结论 体外循环引起的血管EGL损伤可持续到术后一周的时间,且损伤的严重程度与体外循环时间、主动脉阻断时间、血浆乳酸峰值水平相关。

长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18通过微RNA-497-5p/细胞周期蛋白E1轴调节弥漫性大B细胞淋巴瘤的增殖、凋亡和侵袭

目的 探讨长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18(lncRNA HCG18)调控微RNA-497-5p(miR-497-5p)/细胞周期蛋白E1(CCNE1)轴对弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白质印迹法分别检测2018年5月至2021年5月收集的恩施土家族苗族自治州中心医院DLBCL病人淋巴组织、良性淋巴结增生病人的淋巴组织、人正常B细胞永生化细胞HMy2.CIR、DLBCL细胞系SU-DHL-1、OCI-LY8、U2932中HCG18、miR-497-5p表达及CCNE1蛋白表达,将OCI-LY8细胞分为Ct组(正常培养的OCI-LY8细胞)、pcDNA组(细胞转染过表达物阴性对照)、pcDNA-HCG18组(细胞转染HCG18过表达物)、si-NC组(细胞转染小干扰RNA阴性对照)、si-HCG18组(细胞转染HCG18小干扰RNA)、si-HCG18+inhibitorNC组(细胞转染HCG18小干扰RNA和抑制物阴性对照)、si-HCG18+miR-497-5p inhibitor组(细胞转染HCG18小干扰RNA和miR-497-5p抑制物),CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell检测细胞侵袭,蛋白质印迹法检测CCNE1、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达,双萤光素酶验证HCG18与miR-497-5p、miR-497-5p与CCNE1的关系。结果 在DLBCL淋巴组织和细胞中,HCG18、CCNE1蛋白高表达,miR-497-5p低表达,且在OCI-LY8细胞中HCG18、CCNE1蛋白表达上调最高,miR-497-5p表达下调最多(P<0.05),因此,以OCI-LY8细胞进行后续研究,与si-NC组比较,si-HCG18组HCG18(0.26±0.03比1.01±0.01)、CCNE1蛋白(0.45±0.03比1.44±0.19)表达降低,miR-497-5p(1.95±0.14比1.03±0.02)表达升高(P<0.05),与pcDNA组比较,pcDNA-HCG18组HCG18(1.96±0.23比1.02±0.01)、CCNE1蛋白(2.33±0.21比1.42±0.18)表达升高,miR-497-5p(0.28±0.02比1.02±0.02)表达降低(P<0.05),与siHCG18组、si-HCG18+inhibitor NC组比较,miR-497-5p表达降低(1.21±0.09比1.95±0.14、1.94±0.13),CCNE1蛋白(0.87±0.08比0.45±0.03、0.44±0.04)表达上调(P<0.05),沉默HCG18可抑制OCI-LY8细胞增殖、侵袭行为及PCNA、MMP-9蛋白表达,诱导细胞凋亡及Bax蛋白表达,而上调HCG18则呈相反趋势,下调miR-497-5p逆转了沉默HCG18对OCI-LY8细胞增殖、侵袭、凋亡的影响,HCG18靶向调控miR-497-5p/CCNE1。结论 沉默HCG18可能通过调控miR-497-5p/CCNE1抑制OCI-LY8细胞增殖、侵袭,诱导细胞凋亡。

基质金属蛋白酶和基质金属蛋白酶组织抑制剂在牙本质-牙髓复合体中的研究进展

基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases,MMPs)和基质金属蛋白酶组织抑制剂(tissue in-hibitors of metalloproteinases,TIMPs)在医学的多个领域都得到了广泛的研究。随着近年来对MMPs与TIMPs在牙本质-牙髓复合体中研究的开展,发现它们与牙齿的多种生理、病理反应都有着密切的联系。本文仅就MMPs。

牙髓-牙本质复合体再生的影响因素及其生物学策略

再生性牙髓治疗利用组织工程方法修复缺损牙本质和牙髓组织,再生具有正常生理功能的牙髓-牙本质复合体,以期恢复牙髓的血管神经化和免疫功能并重建管样牙本质。显著影响再生性牙髓治疗效能的因素包括干细胞、生物信号分子和生物支架材料。根据是否来自牙源性组织,干细胞可分为牙源性干细胞(如牙髓干细胞)和非牙源性干细胞(如骨髓间充质干细胞)。鉴于干细胞具有倾向分化为其原始来源组织的特性,牙源性干细胞在再生性牙髓治疗中展现出一定优势。联合应用多种信号分子并通过激活信号转导通路如Wnt/β-catenin、BMP/Smad,对改善干细胞迁移、增殖、成牙本质细胞分化和血管神经再生潜能发挥关键作用。适用于再生性牙髓治疗的生物支架材料包括自然来源材料和人工合成材料,人工合成材料应模仿天然组织进行生物仿生修饰,以营造适宜的再生微环境并实现对信号转导通路的时空调控。牙髓-牙本质复合体再生的真正实现有赖于干细胞移植和干细胞归巢两大策略。干细胞归巢策略因可避免干细胞的体外分离和培养而在临床操作上更具优势,但如何提高干细胞归巢成功率并促进其增殖和分化以实现牙髓-牙本质复合体真正再生仍有待解决。本文介绍了诱导牙髓-牙本质复合体再生的影响因素,探讨其科学、可行的生物学策略,并展望再生性牙髓治疗未来的研究方向,以期为再生性牙髓治疗临床转化和推广应用提供参考。

活髓保存治疗的生理和病理学基础——牙本质-牙髓复合体的防御和修复再生能力

在牙髓治疗学中,活髓保存治疗是最符合生物学观点的治疗方法。虽然间接盖髓术、直接盖髓术和切髓术的适应证、手术方法等不同,但具有相同或相似的生理和病理学基础,即牙本质-牙髓复合体的防御和修复再生能力。本文从牙本质-牙髓复合体的硬组织反应、软组织反应以及临床意义等方面进行了论述。

水飞蓟素-磷脂酰胆碱复合物的制备及体外溶出速率评价

目的:通过水飞蓟素-磷脂酰胆碱复合物的处方工艺研究,筛选得率和体外溶出速率高的制备处方和工艺并对其进行复合机理的研究。方法:采用正交实验设计制备水飞蓟素-磷脂复合物,以得率和体外溶出速率筛选最佳处方。结果:经处方筛选得最佳复合工艺条件为:水飞蓟素与磷脂摩尔比1∶2,温度45℃,反应时间3 h。经差热分析和核磁共振法证实水飞蓟素与磷脂经复合形成了新的复合物。其复合物体外溶出速率为市售益肝灵片剂的2.27倍。结论:水飞蓟素-磷脂酰胆碱复合物可提高水飞蓟素的溶出速率,是一种值得开发的水飞蓟素产品。

牙本质龋损下牙本质-牙髓复合体的反应

目的探讨牙本质龋损进展过程中,牙本质-牙髓复合体的变化特点及规律。方法选择即刻拔除的第三磨牙65颗,其中牙本质浅龋27颗(急性龋15颗,慢性龋12颗);牙本质深龋28颗(急性龋16颗,慢性龋12颗);无龋损的正常牙10颗。常规固定、脱钙、切片(厚4μm),光学显微镜下观察牙本质龋病损下方牙髓的组织病理学改变,并用多功能图象分析仪对相应部位的成牙本质细胞的数目、浆核比、前期牙本质面积等进行测量分析。结果随龋损深度的增加,成牙本质细胞数目显著减少,细胞形态由高柱状变为立方状直至扁平状,前期牙本质变薄甚至消失,第三期牙本质变厚且发生率增加,血管扩张充血,炎症细胞增多,主要为淋巴细胞与浆细胞;牙本质浅龋阶段,成牙本质细胞浆核比显著下降,慢性龋成牙本质细胞样细胞分化、迁移活跃,胶原纤维增多。牙本质深龋阶段出现修复性牙本质,急性龋炎症细胞聚集明显。结论牙本质-牙髓复合体对龋损的反应与龋损深度及活动性有关;龋损深度增加,损伤反应加重;龋损活动性降低时修复与防御反应加强。

大鼠第一腮弓细胞构建组织工程牙本质-牙髓复合体样结构

目的观察胚胎12.5d(E12.5d)大鼠第一腮弓上皮及外胚间充质细胞离散后肾被膜下移植的成牙能力。方法切取E12.5d大鼠第一腮弓(下颌突),酶消化离心后与明胶海绵支架复合植入大鼠肾被膜下,4周后收获移植物,对移植物进行组织学观察和免疫组化抗牙本质涎蛋白(dentin sialoprotein,DSP)检测。结果种植4周,植入细胞在肾被膜下形成牙本质-牙髓复合体样结构。DSP在新生的牙本质组织中呈阳性表达。Masson三色法显示绿色矿化基质形成。结论E12.5d大鼠第一腮弓细胞部分保留了牙齿自然发育的遗传信号,在肾被膜下可以构建形成牙本质-牙髓复合体样结构。

β-连环素/TCF-4复合体在非小细胞肺癌的研究

目的该研究通过观察β-连环素/TCF-4复合体在NSCLC的表达及β-连环素/TCF-4复合体与NSCLC病理分型、细胞分化的关系,探寻经典Wnt信号通路参与(NSCLC)的直接证据。方法利用双标记免疫荧光法及免疫沉淀和Western boltting检测β-连环素/TCF-4复合体在NSCLC的表达。结果在35%的NSCLC组织中存在β-连环素/TCF-4复合体且主要表达于细胞核,而正常癌旁组织无但β-连环素/TCF-4复合体表达;β-连环素/TCF-4复合体表达与NSCLC的病理分型、细胞分化无显著相关性。结论经典的Wnt信号通路可能通过β-连环素/TCF-4复合体参与部分NSCLC的病变过程。

体外牙髓-牙本质复合体观察模型的初步构建

目的体外构建牙髓-牙本质复合体模型,通过对生长于其内的牙髓细胞生长情况的观测,评价该模型的构建效果。方法构建可动态观察细胞形态的牙髓-牙本质复合体模型。将增殖稳定的人牙髓细胞接种于模型内培养,检测细胞在髓腔环内与牙本质髓腔内壁的关系和形态学表现,以及结构内细胞的增殖活性等。结果人牙髓细胞可以在本研究构建的模型内稳定增殖生长。结论本研究成功构建了体外牙髓-牙本质复合体动态观察模型,人牙髓细胞可在其内稳定增殖生长。

乳腺肿瘤与β-连环素及其复合体的相关性

目的探讨β连环素(β-cat)及其与E钙粘附素(E-cad)的复合体在乳腺肿瘤中的表达及意义。方法采用超敏感SP免疫组化方法,检测83例乳腺肿瘤中β-cat、E-cad的表达。结果同正常乳腺组织阳性表达率80%相比,乳腺中重度不典型增生组、乳腺癌组中β-cat阳性表达率分别为26.3%、29.3%,且与正常乳腺组织差别均有统计学意义(P<0.01),但后两组之间相比差别不显著。E-cad在正常乳腺组织阳性表达率为90%,而在乳腺中重度不典型增生组、乳腺癌组中分别为57.9%、20.7%,但仅乳腺癌组与正常乳腺组织差别有统计学意义(P<0.01)。同时发现,乳腺中重度不典型增生组与乳腺癌组中的Ecad阳性表达率差别亦有统计学意义(P<0.05),而Ecad的表达与乳腺癌淋巴结转移的关系不明显。结论β-cat可以作为乳腺疾病向恶性转变过程中的一个监测指标,E-cad在由乳腺不典型增生转变为乳腺癌的过程中起一定的作用。

制备优质牙本质-牙髓复合体组织切片的方法探讨

龋病治疗学、牙体修复学和口腔材料学等研究领域都离不开对牙本质和牙髓组织病理学变化的观察。以完善的病理技术制备优质的牙齿软硬组织联合切片是进行牙髓-牙本质组织病理学研究的基础。

基质细胞衍生因子1α及其受体CXCR4在牙本质-牙髓复合体损伤修复过程中的表达

目的:通过构建牙本质-牙髓复合体损伤修复动物模型,研究基质细胞衍生因子1α及其受体CXCR4(SDF-1α/CXCR4)在其损伤修复过程中的表达。方法:制备大鼠牙本质-牙髓损伤模型,通过免疫组织化学染色、PCR技术分别对损伤后0、6h和1、3、7d及正常大鼠牙髓标本中SDF-1α/CXCR4进行检测。结果:正常大鼠组牙髓中没有发现SDF-1α、CXCR4阳性表达,实验大鼠组损伤6h后少量的成牙本质细胞和前期牙本质开始出现较弱阳性表达,损伤1d后成牙本质细胞阳性表达增强,损伤3d后牙髓成纤维细胞出现阳性表达,损伤7d后未分化间充质细胞出现阳性表达,大鼠牙髓损伤后SDF-1α、CXCR4随着时间的增加阳性表达程度明显增强。图像分析结果显示,SD大鼠牙本质-牙髓复合体损伤后牙髓中SDF-1α、CXCR4的表达(灰度值)除Oh外其余各组均高于对照组(P<0.05)。PCR结果显示,损伤后大鼠牙髓中SDF-1α、CXCR4均符合产物设计大小。其表达(灰度值)除Oh外其余各组均高于对照组(P<0.05)。结论:大鼠牙本质-牙髓复合体损伤后,前期牙本质、成牙本质细胞、牙髓成纤维细胞和未分化间充质细胞对SDF-1α、CXCR4的表达呈时间依赖性,提示SDF-1α、CXCR4可能参与了修复性牙本质的形成。