基于网络药理学、分子对接和实验验证探讨朱茯苓用于失眠的作用机制

为探讨朱茯苓治疗失眠的可能作用机制,通过TCMSP、BAT-MAN、TCMID和STITCH数据库以及文献挖掘筛选朱茯苓的活性成分及潜在靶点,利用TTD、OMIM、GeneCards和CTD数据库获取失眠类疾病的相关靶点,采用Cytoscape软件和String数据库构建活性成分-靶点网络和靶点蛋白相互作用网络,通过BioGPS数据库进行靶点的器官定位,基于David数据库进行GO功能和KEGG通路的富集分析,利用Autodock_vina软件进行活性成分和核心靶点的分子对接验证,最后通过免疫印迹法(Western blot)验证朱茯苓对γ-氨基丁酸(GABA)的两种受体蛋白α1亚基基因GABRA1和γ2亚基基因GABRG2的影响。最终筛选得到朱茯苓活性成分33种,潜在靶点267个,与失眠的交集靶点36个,多作用于脑、心脏等器官;分子对接结果显示GABRA1、GABRG2两个靶点能够与活性成分自发结合并借助氢键等分子间作用力形成较为稳定的构象;富集分析共获得189个GO条目和24条KEGG通路,主要涉及GABA信号通路、5-羟色胺(5-HT)信号通路等;Western blot实验证明朱茯苓能够增强小鼠脑内GABRA1和GABRG2蛋白的表达。通过网络药理学、分子对接和Western blot实验验证,发现朱茯苓可能通过多成分、多靶点、多途径的协同作用发挥镇静安神的作用,为深入进行朱茯苓治疗失眠的作用机制研究提供新思路和新方法。

从茯苓朱砂谈朱茯苓用法之改进

朱茯苓是茯苓各用朱砂挂衣而成，茯苓的有效成分β－茯苓聚糖水溶性极少，而朱砂主含HgS，水中几近不溶，且火煎火煅产生剧毒，故认为传统的朱茯苓入煎剂使用方法不妥，宜制成散剂或丸剂使用，以便提高药效，保证用药安全。

朱茯苓水提物对小鼠的催眠作用和分子机制研究

目的:研究朱茯苓对小鼠的催眠作用和对小鼠海马神经元细胞的影响,从分子层面探讨其催眠机制。方法:ICR小鼠随机分为正常对照组、艾司唑仑0.1 mg/kg组、朱茯苓水提物1.1、2.3、4.5 g/kg组,连续灌胃给药7 d后,分别观察小鼠自主活动次数;阈下剂量戊巴比妥钠所致小鼠入睡率;阈剂量戊巴比妥钠致小鼠睡眠时间的测定,取小鼠海马组织,以酶联免疫吸附法测定(ELISA)法测定睡眠相关因子γ-氨基丁酸(GABA)和5-羟色胺(5-HT)的含量。体外培养小鼠海马神经元HT22细胞,采用CCK-8法检测细胞活性,优选合适的朱茯苓水提物和艾司唑仑浓度用于后续实验。将小鼠海马神经元细胞随机分为为空白对照组、艾司唑仑20μg/mL组、朱茯苓水提物80、160、320μg/mL组,给药24 h后采用流式细胞术分析海马神经元细胞早期凋亡情况,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测细胞内Gaba、5-Ht受体和钟基因mRNA表达情况,采用蛋白免疫印迹(Western blot)检测细胞内GABA、5-HT受体和钟基因蛋白表达情况。结果:小鼠自主活动结果表明,与正常对照组相比,朱茯苓2.3、4.5 g/kg组小鼠自主活动次数显著减少(P<0.01);朱茯苓水提物4.5 g/kg组小鼠入睡率明显提高(P<0.05);朱茯苓水提物1.1、2.3、4.5 g/kg组小鼠睡眠潜伏期显著缩短(P<0.01),睡眠时间显著延长(P<0.01),朱茯苓水提物2.3、4.5 g/kg组小鼠海马组织GABA和5-HT含量明显提升(P<0.05或P<0.01)。细胞实验结果表明培养第7 d的小鼠海马神经元细胞更为饱满,光晕变得立体,细胞间网络连接更加紧密,突起进一步增多和增长,生长成熟。与正常对照组比较,朱茯苓水提物80、160、320μg/mL组细胞早期凋亡率显著降低(P<0.01),朱茯苓水提物320μg/mL组GABRA1、GABRA2、5-HT1A、5-HT1B、Cry1、Per1、Per2基因蛋白表达和mRNA表达水平显著上调(P<0.01)。结论:朱茯苓对小鼠具有一定的催眠作用,可能通过提高海马组织内GABA和5-HT含量、降低小鼠海马神经元细胞的早期凋亡率、调节相应的神经递质受体和钟基因的mRNA和蛋白表达来发挥催眠作用。

滇南云苓

佚苓，又私门佚苓、云伏苓、朱茯苓、秩菟、云苓．为我国传统常用中药材，主产于湖北、安徽、河南、云南、贵州、四川等省。云南南部地处亚热带气候，

朱砂拌衣类中药饮片的临床应用探讨

朱砂,又称丹砂、辰砂、赤丹、汞沙、赤胆,属于天然矿石,呈颗粒状或块片状,鲜红色或暗红色,条痕红色至褐红色,具光泽。体重,质脆,片状者易破碎,粉末状者有闪烁的光泽。2020年版《中华人民共和国药典(一部)》载:朱砂为硫化物类矿物辰砂族辰砂,主含硫化汞(HgS)。功能主治:清心镇惊,安神,明目,解毒。用于心悸易惊,失眠多梦,癫痫发狂,小儿惊风,视物昏花,口疮,喉痹,疮疡肿毒[1]。