杀白细胞毒素基因阳性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的红霉素耐药基因的检测

目的了解杀白细胞毒素(PVL)基因阳性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MR-SA)的红霉素耐药基因(ermA/B/C)检出情况。方法收集2007年1月—2008年6月分离自河北医科大学第一医院临床患者的MRSA 45株,采用聚合酶链反应对45株MRSA的ermA/B/C和PVL基因进行检测,分析PVL基因阳性MRSA的ermA/B/C检出率。结果45株MRSA中有33株检出ermA/B/C,检出率为73%(33/45);有12株检出PVL基因,检出率为27%(12/45);12株PVL基因阳性MRSA中有9株检出ermA/B/C,检出率为75%(9/12);33株PVL基因阴性MRSA中仅24株检出ermA/B/C,检出率为73%(24/33)。结论PVL基因阳性与PVL基因阴性MRSA的ermA/B/C检出率基本一致,MRSA的重要致病基因——PVL的产生可能与红霉素耐药基因ermA/B/C无关。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌杀白细胞毒素基因的检测

目的了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌杀白细胞毒素基因的检出情况。方法收集2007年1月至2008年6月分离自河北医科大学第一医院临床患者的MRSA45株,采用聚合酶链式反应进行杀白细胞毒素基因的检测。结果45株MRSA中有12株检出杀白细胞毒素基因,检出率为26.7%。结论杀白细胞毒素基因PVL检出率较高,是MRSA的重要致病因子。

杀白细胞毒素基因阳性MRSA的临床和实验研究

目的了解2003—2006年我院MRSA临床分离株中杀白细胞毒素(PVL)基因的分布、SCCmec分型、药物敏感性及其临床特征。方法对2003年1月至2006年12月我院1 366株MRSA临床分离菌株,用PCR方法筛选PVL基因阳性菌株,用多重PCR方法进行SCCmec分型;并进行回顾性研究,分析PVL基因阳性及阴性株所致感染的临床特点及相关危险因素;用琼脂稀释法测定其对临床常用抗菌药的敏感性(MIC)。结果在1 366株MRSA菌株中共筛出5株PVL基因阳性菌株,阳性率为0.37%。50株MRSA临床分离菌株中,SCCmecⅠ型1株,占2%(1/50);SCCmecⅡ型26株,占52%(26/50);SCCmecⅢ型16株(其中包括SCCmecⅢA1株),占32%(16/50);SCCmecⅣ型1株,占2%(1/50);SCCmecⅤ型2株,占4%(2/50);4株(8%)未能分型。5株PVL基因阳性株中SCCmecⅢ型1株,SCCmecⅣ型1株,SCCmecⅤ型2株,未分型1株。MIC结果显示PVL基因阳性株较阴性株对多种非β内酰胺类抗生素更为敏感,未发现万古霉素不敏感菌株。该5株PVL阳性菌株所致感染分别为皮肤软组织感染2例、肺部感染2例和尿路感染1例。结论PVL基因阳性MRSA已在我院检出,应加强医院感染控制防治其播散流行。

MRSA杀白细胞素基因检测和SCCmec分子流行病学调查

目的了解我院临床分离的耐甲氧西林金葡菌(MRSA)葡萄球菌染色体mec基因盒(sta phyloccoccal cassette chromosomemec,SCCmec)的分布和杀白细胞毒素(Panton-Valentine Leukocidin,PVL)基因的携带状况。方法收集我院2005年10月—2006年6月从临床标本中分离的30株MRSA(mecA基因阳性)。运用多重PCR检测SCCmec的基因型和亚型;PCR扩增PVL基因;纸片扩散法检测MRSA对10种抗菌药物的耐药性。结果30株MRSA中,SCCmecⅡ型6株(20.0%);SCCmecⅢ型15株(50.0%);SCCmecⅣa型1株和SCCmecⅤ型2株。6株MecA基因阳性菌株未能分型。PVL总阳性率36.7%(1 1/30),其中SCCmecⅡ1株、SCCmecⅢ5株、SCCmecⅣa 1株,SCCmecⅤ2株、未分型2株。SCCmecⅡ型和SCCmecⅢ型菌株除对β内酰胺类抗生素耐药以外,对其他抗菌药物呈现多重耐药。SCCmecaⅣa和SCCmecⅤ型的菌株除对β内酰胺类抗生素耐药以外,对其他类抗菌药物均敏感。结论我院临床分离MRSA的SCCmec型别主要以SCCmecⅢ和SCCmecⅡ为主;PVL基因的阳性率较高;携带SCCmecⅡ和SCCmecⅢ的MRSA对抗菌药物呈现多重耐药现象。

老年病房耐甲氧西林金黄色葡萄球菌葡萄球菌染色体mec基因盒基因型和杀白细胞素基因的检测及特点

目的了解复旦大学附属华东医院老年科临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)葡萄染色体mec基因盒(SCCmec)的分布和杀白细胞毒素(PVL)基因的携带状况。方法收集复旦大学附属华东医院老年科病房2011年2—7月从临床标本中分离的不重复MRSA共57株。运用多重聚合酶链反应检测金黄色葡萄球菌16SrRNA基因、PVL基因和mecA基因,并同时检测SCCmec的基因型及亚型。采用琼脂稀释法进行13种药物的药物敏感试验。结果 57株MRSA中,SCCmecⅠ型1株(1.8%),SCCmecⅠA型5株(8.7%),SCCmecⅡ型30株(52.6%),SCCmecⅢ型15株(26.3%),SCCmecⅢA型2株(3.5%),4株(7.0%)未能分型。57株MRSA中,PVL基因均为阴性。MRSA菌株最敏感的药物为万古霉素和利奈唑胺(敏感率均为100.0%),其次为呋喃妥因和甲氧苄啶-磺胺甲口恶唑(98.2%、96.5%)。结论复旦大学附属华东医院老年科临床分离的MRSA呈多重耐药,其SCCmec型别主要以SCCmecⅡ型和SCCmecⅢ型为主,未发现PVL基因阳性菌株。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的红霉素耐药基因和杀白细胞基因的检测

目的了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)红霉素耐药基因和杀白细胞毒素基因的检出情况。方法收集MRSA 45株,采用聚合酶链式反应对45株MRSA的红霉素耐药基因ermA/B/C和杀白细胞毒素基因(PVL)进行检测。结果45株MRSA中有33株检出红霉素耐药基因,检出率为73.3%;有12株检出杀白细胞毒素基因,检出率为26.7%。结论在红霉素耐药基因ermA/B/C多重耐药的MRSA中检出率较高,是MRSA对大环内酯类抗生素耐药的主要机制;PVL基因检出率较高,是MRSA的重要致病因子。

金黄色葡萄球菌致病毒素基因与耐药性的相关性研究

目的研究金黄色葡萄球菌的致病毒素基因与耐药性的关系。方法对临床收集的74株金黄色葡萄球菌,采用聚合酶链反应(PCR)检测耐药基因mecA和致病毒素基因中毒休克综合征毒素-1(TSST-1)、杀白细胞毒素(PVL),采用纸片扩散法进行药敏试验,对红霉素耐药和克林霉素敏感的菌株做D-试验。结果 74株金黄色葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的检出率为55.4%。MRSA除对万古霉素、呋喃妥因敏感外,对其他抗菌药物均高度耐药,甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)对抗药物的耐药性较轻,两组间的耐药性差异有统计学意义(P<0.05)。PVL基因阳性的MRSA耐药性与PVL基因阴性的MRSA比较,两组间耐药性差异无统计学意义(P>0.05)。PVL基因阳性的MSSA耐药性比不携带PVL基因的MSSA强,两者间差异有统计学意义(P<0.05)。携带TSST-1基因的MRSA除对万古霉素、呋喃妥因无耐药菌株外,对其他16种抗菌药物100%耐药。D-试验阳性菌株占所检菌株的10.8%,占红霉素耐药、克林霉素敏感菌株的88.9%。只有1株PVL基因阳性的MRSA D-试验阳性。结论 MRSA的耐药性非常严重,表现为对多种抗菌药物同时耐药,并且具有较高的红霉素诱导克林霉素耐药率;PVL和TSST-1可增强金黄色葡萄球菌的致病力及MSSA的耐药性,增加了临床抗感染治疗的难度。

金黄色葡萄球菌耐药基因及致病毒素基因的研究

目的研究金葡菌耐药基因及致病因子中毒休克综合征毒素-Ⅰ(TSST-Ⅰ)基因和杀白细胞毒素(PVL)基因的分布特征。方法收集临床分离的74株金葡菌,PCR法检测毒素基因TSST-Ⅰ、PVL和mecA耐药基因。结果74株金葡菌PCR法对其行mecA基因检测,检出率为55.4%(41/74)。PVL阳性菌株的分离率为29.7%(22/74),PVL阳性的MRSA为15株(15.41,36.6%),PVL阳性的MSSA为7株(7 33,21.2%),差异无统计学意义(P>0.05)。TSST-Ⅰ基因检出率为6.8%,MSSA中未检出TSST-Ⅰ基因。结论MRSA呈多重耐药性,易造成医院内暴发流行,携带PVL和TSST-Ⅰ的金葡菌其致病力更强,应加强医院感染控制,防止其播散流行。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药基因及致病毒素基因的研究

目的研究金黄色葡萄球菌耐药基因及致病因子中毒休克综合征毒素-1（TSST-1）基因和杀白细胞毒素（PVL）基因的分布特征及致病性。方法收集临床分离的80株金黄色葡萄球菌，PCR法检测毒素基因TSST-1，PVL和mecA耐药基因。结果80株金黄色葡萄球菌经PCR法，mecA基因检出率为56．3％（45／80），其中2006年为65．8％（25／38），2007年为47．6％（20／42），2007年的mecA基因检出率低于2006年。PVL^＋菌株的分离率为30．3％，PVL阳性的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）为13株（13／45，28．9％），金黄色葡萄球菌（MSSA）为11株（11／35，31．4％），差异无统计学意义（P〉0．05）。TSST-1基因检出率为6．3％（5／80），MSSA中未检出TSST-1基因。结论产PVL和TSST-1的MRSA致病力更强，增加了临床治疗的难度，对MRSA引起的感染应加强控制，防止其在医院播散流行。

多重PCR法检测金黄色葡萄球菌耐药基因及致病毒素基因

目的:了解金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)耐药基因及所携带致病毒素基因PVL与TSST-1的特点。方法:应用多重PCR法检测mecA基因、TSST-1基因及PVL基因。结果:84株金葡球经多重PCR法对其mecA基因进行检测,检出率为58.3%(49/84)。PVL基因阳性菌株的分离率为23.8%(20/84),PVL阳性的MRSA为13株(13/49,26.5%),PVL阳性的MSSA为7株(7/35,20.0%),差异无统计学意义(P>0.05);未检出TSST-1基因。结论:金葡菌的耐药性呈上升趋势,且金葡菌可产生多种毒素,在分离金葡菌的同时,应加强其耐药基因及毒素基因的检测。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性,SCCmec分型及毒素基因的检测

目的调查北京大学第一医院致病性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec分型情况、耐药状况、PVL、TSST-1基因携带率,初步了解临床耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药原因,为临床感染控制提供依据。方法收集2007年9月至2008年3月住院患者首次分离的53株有致病意义MRSA,用全自动微生物分析仪进行药敏试验,应用PCR方法检测MRSA的SCCmec基因型、PVLT、SST-1基因。结果53株MRSA呈多重耐药特点,SCCmec分型以ⅢA为主(47.2%),PVL基因均为阴性,12株(22%)MRSA TSST-1阳性。结论53株MRSA的多重耐药性与SCCmec结构密切相关,SCCmec分型技术是探索MRSA多重耐药性与耐药结构有效的分子生物学手段,TSST-1基因阳性株在临床分离的金黄色葡萄球菌中占有较高的比例。

鄂尔多斯地区蒙古族人群耐甲氧西林金黄色葡萄球菌基因分型

目的：探讨鄂尔多斯地区蒙古族人群耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的分子流行病学特点，明确本地区MRSA基因型别及其分布规律。方法收集2009年1月至2011年8月临床分离的MRSA菌株54株。应用多重聚合酶链反应（PCR）对MRSA菌株进行葡萄球菌染色体mec（SCCmec）基因分型、杀白细胞毒素（PVL）毒力基因（pvl）和多位点序列分型（MLST）检测。结果 MRSA菌株的SCCmec Ⅰ～Ⅴ基因分型分别占0．00％、50．00％、46．30％、1．85％和1．85％；检测出1株pvl基因阳性；24株MRSA菌株MLST分型显示，ST23913株（54．17％），ST59株（37．50％），ST59和ST7各1株（4．17％）。结论鄂尔多斯地区蒙古族人群MRSA菌株以SCCmec Ⅱ型和SCCmecⅢ型为主。

中国7所教学医院耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分子流行病学及耐药性研究

目的调查2007年中国7所教学医院耐甲氧西林金葡菌(MRSA)的分子流行病学分布及耐药性特征。方法采用多位点序列分型(MLST)和葡萄球菌蛋白A基因(spa)分型技术对114株MRSA进行分子流行病学研究,并进行Panton-Valentine毒素(PVL)编码基因lukS检测,采用琼脂稀释法进行13种抗菌药物的药敏试验。结果 114株MRSA中共发现8种MLST-spa分子克隆型,ST239-t030、ST239-t037和ST5-t002是主要的型别,分别占总数的41.2%、28.8%和21.9%。仅有1株MRSA检测到lukS基因阳性。MRSA菌株最敏感的抗菌药物为万古霉素与替考拉宁(100%),甲氧苄啶-磺胺甲口恶唑次之(86.8%);主要的分子克隆型ST239-t030、ST239-t037和ST5-t002菌株具有相似的药敏谱,但所有甲氧苄啶-磺胺甲口恶唑耐药菌株均属于ST239-t037。结论在中国MRSA的流行株由数种主要的分子克隆型引起,与周边国家和地区的情况基本一致。

深圳地区甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌耐药性及分子流行病学特征

目的调查深圳地区甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌的耐药情况并了解其分子流行病学特征。方法收集2012年深圳地区3所医院的112株甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌,琼脂稀释法测定对10种抗菌药物的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC),聚合酶链反应(PCR)来检测杀白细胞毒素(Panton-Valentine leucocidin,PVL)基因,并对PVL基因阳性菌株行多位点基因序列分型(MLST)。结果 MRSA检出率26.2%,112株MRSA对复方新诺明、莫西沙星、环丙沙星、庆大霉素、红霉素、克林霉素和四环素的耐药率分别为4.46%、12.50%、16.96%、19.64%、46.42%、25.00%和26.79%,未发现万古霉素、利奈唑胺和替考拉宁耐药株;PVL阴性株和阳性株对10种抗菌药物的耐药率均无显著性差异;112株MRSA中,PVL基因阳性13株(11.61%),MLST分型为7种已知序列型和1种新的序列型,其中ST338和ST25最多。结论深圳地区MRSA检出率较低,PVL基因阳性率处于中等水平,具有明显不同于其他地区的独特的遗传背景。

新疆乌鲁木齐地区PVL阳性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性检测

目的了解乌鲁木齐地区杀白细胞素(PVL)阳性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药情况,指导临床合理用药。方法采用PCR法进行PVL基因的检测;采用Kirby-Bauer法进行药敏试验,分析其耐药性。结果 49株MRSA中PVL基因扩增阳性菌株为31株,阳性率为63.27%,PVL阳性MRSA对青霉素G、苯唑西林、红霉素、阿奇霉素、左氧氟沙星、利福平、庆大霉素、阿米卡星、克林霉素和环丙沙星的耐药率分别为100%、100%、83.87%、80.65%、90.32%、90.32%、87.10%、87.10%、90.32%和90.32%,对呋喃妥因的耐药率为3.23%,未发现对万古霉素耐药的菌株。结论与国内其他地区相比,乌鲁木齐地区MRSA杀白细胞毒素基因检出率较高,且PVL阳性的MRSA耐药严重,呈多重耐药,应该加强医院感染控制,防止其播散流行。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌基因分型与同源性分析

目的研究襄阳地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的检出率及金黄色葡萄球菌染色体mec(SCCmec)基因型与同源性特征。方法采用苯唑西林/头孢西丁筛选法、mecA基因单一PCR扩增对2013年4-10月间湖北省襄阳地区4所三级医院门诊及住院患者标本分离的金黄色葡萄球菌进行MRSA筛选和确认;用多重PCR扩增(m-PCR)及脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行SCCmec基因分型及同源性分析,并用单一PCR扩增法进行PVL基因的检测。结果从80株金黄色葡萄球菌菌株中分离出MRSA 43株;多重PCR分型结果显示,39株为SCCmecⅢ型,4株为SCCmecⅣa型;单一PCR法获得8株PVL阳性菌株,占18.6%,其中SCCmecⅢ型4株,SCCmecⅣa型4株;PFGE检测结果显示,43株MRSA中有A、B、C、D、E 5种类型,其中以A型为主,A型中又分为A1、A2、A3 3种亚型。结论襄阳地区MRSA以SCCmecⅢ型和A型克隆株为主,PVL基因的携带率较高,应加强感染控制,防止此类菌株的播散。

2010-2011年耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec基因分型及耐药谱分析

目的了解2010-2011年耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)SCCmec基因分型及PVL基因携带情况并对其耐药谱进行分析。方法收集2010年和2011年从临床各标本所分离出的MRSA,分别为54株和119株,应用多重PCR方法对MRSA进行SCCmec基因分型,PCR扩增PVL基因,采用MicroScanWalkAway-40全自动微生物鉴定药敏分析仪进行细菌的鉴定及药敏试验,部分药敏试验采用K-B法。结果 2010年54株MRSA中SCCmecⅡ型42株76.26%,SccmecⅢ型11株20.37%,未分型1株1.88%,2011年119株MRSA中SCCmecⅡ型86株72.27%,SCCmecⅢ型28株23.53%,SCCmecⅣ型3株2.52%,其中SCCmecⅣc型2株,SCCmecⅣd型1株,未分型2株1.68%,在2011年两株SCCmecⅣc型MRSA中检测到PVL基因,其余菌株均未检测到PVL基因;SCCmecⅡ型和SCCmecⅢ型MRSA 2010年和2011年对万古霉素、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶、利奈唑胺、喹奴普汀/达福普汀的耐药率均为0,对氯霉素和利福平的耐药率均<30.0%,SCCmecⅢ型MRSA对四环素的耐药率由2010年的36.36%上升至2011年的78.57%(P<0.05),两种SCCmec基因型的MRSA均表现为多药耐药性。结论 2010-2011年临床分离的MRSA以SCCmecⅡ型为主,SCCmecⅡ型和SCCmecⅢ型MRSA对抗菌药物呈多药耐药;2011年大连地区开始出现SCCmecⅣ型MRSA,并且携带PVL基因。

深圳市金黄色葡萄球菌耐药性分析及分子分型

目的了解深圳市金黄色葡萄球菌的耐药性特点及分子分型特征。方法收集2012年来自深圳市7所医院的428株金黄色葡萄球菌,以琼脂稀释法测定其对12种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC),采用聚合酶链式反应(PCR)检测杀白细胞毒素(PVL),并对携带PVL基因的菌株进行多位点基因序列分型(MLST)。结果428株金黄色葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)共116株(26.2%),甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)共312株(73.8%)。在12种抗菌药物中,该菌对青霉素和红霉素的耐药率最高,分别为88.8%和44.2%;未发现替考拉宁、利奈唑胺和万古霉素的耐药株。MRSA对青霉素和环丙沙星的耐药率显著高于MSSA。428株金黄色葡萄球菌中,有60株(14.02%)携带PVL基因。MLST分型结果显示共有14种已知序列型和4种新的序列型,其中ST59和ST338最多,分别为16株和12株。结论深圳地区金黄色葡萄球菌MRSA检出率以及对多种抗菌药物的耐药率均低于全国平均水平,PVL基因阳性率处于中等水平;存在多种ST分型,以ST59和ST338多见,具有遗传多样性和独特的遗传背景。

儿童社区获得性、金黄色葡萄球菌肺炎的分子分型研究

目的了解金黄色葡萄球菌杀白细胞毒素(PVL)的分布特征以及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)染色体mec(SCCmec)基因盒的分型情况。方法收集2015年1-3月在该院诊断为社区获得性肺炎患儿的非重复性金黄色葡萄球菌菌株141株(痰标本);用多重聚合酶链反应对金黄色葡萄球菌进行PVL基因检测和spa分型,对MRSA进行甲氧西林耐药决定子A(mecA)基因检测和SCCmec基因分型。结果 MRSA检出率为9.2%,均检出mecA基因;将141株金黄色葡萄球菌全部进行PVL基因检测,共检测PVL阳性菌株26株,其中从138株甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MSSA)中检出25株,占19.5%;从13株MRSA中检出1株,占7.7%。SCCmec分型结果 1株携带PVL基因的MRSA属于SCCmecⅢ型,其余12株MRSA有2株属于SCCmecⅢ型、10株属于SCCmecⅣ型。未检出SCCmecⅠ、Ⅱ和Ⅴ型。13株MRSA的spa分型未见典型的型别,比较分散;128株MSSA的spa分型以t132为主要型别,其次为t141、t124和t210。结论 MSSA携带PVL基因的阳性率高于MRSA,该院儿童社区获得MRSA以SCCmecⅣ型为主。Spa分型分析显示未见某一型菌株克隆流行,呈散发状态。