杀白细胞毒素基因阳性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的红霉素耐药基因的检测

目的了解杀白细胞毒素(PVL)基因阳性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MR-SA)的红霉素耐药基因(ermA/B/C)检出情况。方法收集2007年1月—2008年6月分离自河北医科大学第一医院临床患者的MRSA 45株,采用聚合酶链反应对45株MRSA的ermA/B/C和PVL基因进行检测,分析PVL基因阳性MRSA的ermA/B/C检出率。结果45株MRSA中有33株检出ermA/B/C,检出率为73%(33/45);有12株检出PVL基因,检出率为27%(12/45);12株PVL基因阳性MRSA中有9株检出ermA/B/C,检出率为75%(9/12);33株PVL基因阴性MRSA中仅24株检出ermA/B/C,检出率为73%(24/33)。结论PVL基因阳性与PVL基因阴性MRSA的ermA/B/C检出率基本一致,MRSA的重要致病基因——PVL的产生可能与红霉素耐药基因ermA/B/C无关。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌杀白细胞毒素基因的检测

目的了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌杀白细胞毒素基因的检出情况。方法收集2007年1月至2008年6月分离自河北医科大学第一医院临床患者的MRSA45株,采用聚合酶链式反应进行杀白细胞毒素基因的检测。结果45株MRSA中有12株检出杀白细胞毒素基因,检出率为26.7%。结论杀白细胞毒素基因PVL检出率较高,是MRSA的重要致病因子。

杀白细胞毒素基因阳性MRSA的临床和实验研究

目的了解2003—2006年我院MRSA临床分离株中杀白细胞毒素(PVL)基因的分布、SCCmec分型、药物敏感性及其临床特征。方法对2003年1月至2006年12月我院1 366株MRSA临床分离菌株,用PCR方法筛选PVL基因阳性菌株,用多重PCR方法进行SCCmec分型;并进行回顾性研究,分析PVL基因阳性及阴性株所致感染的临床特点及相关危险因素;用琼脂稀释法测定其对临床常用抗菌药的敏感性(MIC)。结果在1 366株MRSA菌株中共筛出5株PVL基因阳性菌株,阳性率为0.37%。50株MRSA临床分离菌株中,SCCmecⅠ型1株,占2%(1/50);SCCmecⅡ型26株,占52%(26/50);SCCmecⅢ型16株(其中包括SCCmecⅢA1株),占32%(16/50);SCCmecⅣ型1株,占2%(1/50);SCCmecⅤ型2株,占4%(2/50);4株(8%)未能分型。5株PVL基因阳性株中SCCmecⅢ型1株,SCCmecⅣ型1株,SCCmecⅤ型2株,未分型1株。MIC结果显示PVL基因阳性株较阴性株对多种非β内酰胺类抗生素更为敏感,未发现万古霉素不敏感菌株。该5株PVL阳性菌株所致感染分别为皮肤软组织感染2例、肺部感染2例和尿路感染1例。结论PVL基因阳性MRSA已在我院检出,应加强医院感染控制防治其播散流行。

杀白细胞毒素基因阴性金黄色葡萄球菌的基因分型、耐药性及其生物学特征

目的:研究杀白细胞毒素(pvl)基因阴性金黄色葡萄球菌对多种抗菌药物的耐药性、基因分型和生物膜形成能力。方法:收集于内蒙古医科大学附属医院住院患者送检标本中分离出的100株金黄色葡萄球菌,包括耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA),进行细菌鉴定和12种抗菌药物的药物敏感性试验(药敏试验),采用辅助基因调控子(agr)分型方法进行基因分型,采用PCR法检测pvl基因及其他31种毒力基因,结晶紫染色法检测菌株的生物膜形成能力。结果:100株pvl基因阴性金黄色葡萄球菌临床分离株中,38株为MSSA,62株为MRSA;金黄色葡萄球菌对万古霉素、利奈唑胺和奎奴普丁/达福普丁全部敏感,除红霉素以外,MRSA对其他产生耐药抗生素的耐药率均明显高于MSSA(P<0.01)。agr基因分型,agr-Ⅰ~Ⅳ均在金黄色葡萄球菌中发现,其中agr-Ⅰ为主要基因型(79.0%),其次为agr-Ⅱ基因型(16.0%);MSSA的agr-Ⅱ基因携带率(81.3%)明显高于MRSA(19.7%)(P<0.01);MRSA的agr-Ⅰ基因携带率(72.2%)明显高于MSSA(27.8%)(P<0.01)。32个毒力基因中,hla和hld基因阳性率均为100%,而edin、etb和pvl基因均阴性。MRSA中sdrE、sea、seb、seh、tsst、lukDE、lukM、hlb和mpHLG2-1基因携带率高于MSSA,其中sea和seh基因携带率(56.5%和79.0%)明显高于MSSA(7.9%和60.5%)(P<0.05或P<0.01),而其他18个基因携带率均低于MSSA,其中mpHLG、seo、sed和sej基因的携带率明显低于MSSA(P<0.05或P<0.01),MSSA中23.7%(9/38)同时携带≥15个毒力基因,明显高于MRSA[14.5%(9/62)]。MSSA和MRSA产膜株分别占100%(38/38)和85.5%(53/62)(P<0.05)。结论:pvl基因阴性金黄色葡萄球菌主要以agr-Ⅰ型为主,MRSA对多种抗菌药物耐药率高于MSSA,而MSSA整体毒力基因携带率明显高于MRSA,且MSSA生物膜形成能力高于MRSA。

MRSA杀白细胞素基因检测和SCCmec分子流行病学调查

目的了解我院临床分离的耐甲氧西林金葡菌(MRSA)葡萄球菌染色体mec基因盒(sta phyloccoccal cassette chromosomemec,SCCmec)的分布和杀白细胞毒素(Panton-Valentine Leukocidin,PVL)基因的携带状况。方法收集我院2005年10月—2006年6月从临床标本中分离的30株MRSA(mecA基因阳性)。运用多重PCR检测SCCmec的基因型和亚型;PCR扩增PVL基因;纸片扩散法检测MRSA对10种抗菌药物的耐药性。结果30株MRSA中,SCCmecⅡ型6株(20.0%);SCCmecⅢ型15株(50.0%);SCCmecⅣa型1株和SCCmecⅤ型2株。6株MecA基因阳性菌株未能分型。PVL总阳性率36.7%(1 1/30),其中SCCmecⅡ1株、SCCmecⅢ5株、SCCmecⅣa 1株,SCCmecⅤ2株、未分型2株。SCCmecⅡ型和SCCmecⅢ型菌株除对β内酰胺类抗生素耐药以外,对其他抗菌药物呈现多重耐药。SCCmecaⅣa和SCCmecⅤ型的菌株除对β内酰胺类抗生素耐药以外,对其他类抗菌药物均敏感。结论我院临床分离MRSA的SCCmec型别主要以SCCmecⅢ和SCCmecⅡ为主;PVL基因的阳性率较高;携带SCCmecⅡ和SCCmecⅢ的MRSA对抗菌药物呈现多重耐药现象。

老年病房耐甲氧西林金黄色葡萄球菌葡萄球菌染色体mec基因盒基因型和杀白细胞素基因的检测及特点

目的了解复旦大学附属华东医院老年科临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)葡萄染色体mec基因盒(SCCmec)的分布和杀白细胞毒素(PVL)基因的携带状况。方法收集复旦大学附属华东医院老年科病房2011年2—7月从临床标本中分离的不重复MRSA共57株。运用多重聚合酶链反应检测金黄色葡萄球菌16SrRNA基因、PVL基因和mecA基因,并同时检测SCCmec的基因型及亚型。采用琼脂稀释法进行13种药物的药物敏感试验。结果 57株MRSA中,SCCmecⅠ型1株(1.8%),SCCmecⅠA型5株(8.7%),SCCmecⅡ型30株(52.6%),SCCmecⅢ型15株(26.3%),SCCmecⅢA型2株(3.5%),4株(7.0%)未能分型。57株MRSA中,PVL基因均为阴性。MRSA菌株最敏感的药物为万古霉素和利奈唑胺(敏感率均为100.0%),其次为呋喃妥因和甲氧苄啶-磺胺甲口恶唑(98.2%、96.5%)。结论复旦大学附属华东医院老年科临床分离的MRSA呈多重耐药,其SCCmec型别主要以SCCmecⅡ型和SCCmecⅢ型为主,未发现PVL基因阳性菌株。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的红霉素耐药基因和杀白细胞基因的检测

目的了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)红霉素耐药基因和杀白细胞毒素基因的检出情况。方法收集MRSA 45株,采用聚合酶链式反应对45株MRSA的红霉素耐药基因ermA/B/C和杀白细胞毒素基因(PVL)进行检测。结果45株MRSA中有33株检出红霉素耐药基因,检出率为73.3%;有12株检出杀白细胞毒素基因,检出率为26.7%。结论在红霉素耐药基因ermA/B/C多重耐药的MRSA中检出率较高,是MRSA对大环内酯类抗生素耐药的主要机制;PVL基因检出率较高,是MRSA的重要致病因子。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌杀白细胞素基因检测

目的调查临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)杀白细胞毒素基因携带率。方法收集非重复MRSA菌株83株,按照美国疾病预防控制中心的CA-MRSA 定义分为HA-MRSA和CA-MRSA两组。采用多重PCR法进行SCCmec分型,普通PCR+测序法进行spa分型,普通PCR检测杀白细胞素(PVL)基因。结果83株MRSA中HA-MRSA、CA-MRSA分别占47.0%、53.0%,SCCmec分型中SCCmecⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳa型和未分型各占1.2%、3.6%、65.1%、28.9%、1.2%,spa分型中83株MRSA共检出15个型,主要分型为t437,t062,t015分别占39.8%, 21.7%,10.8%;PVL阳性的MRSA中HA-MRSA和CA-MRSA分别10.3%、36.4%,两者差异有显著性(P=0.006);33株spa t437中有18株携带PVL基因,阳性率54.5%,50株其他spa分型中仅2株携带PVL基因,阳性率4.0%,两者差异有显著性(P=0.000)。PVL基因阳性的MRSA特征CA-MRSA-Ⅳa-t437 9株,HA-MRSA-Ⅲ-t437 4株,HA-MRSA-Ⅳa-t437 3株;20株PVL基因阳性的MRSA中10株分离自皮肤软组织感染病例,6株分离于耳鼻喉科感染病例,3株分离于呼吸道感染病例,1株分离于败血症病例。结论CA-MRSA菌株较HA-MRSA菌株的 PVL基因阳性率更高,同时也发现携带有更高毒力的CA-MRSA的克隆已经播散到医院的环境中,引起医院获得性相关感染。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性,SCCmec分型及毒素基因的检测

目的调查北京大学第一医院致病性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec分型情况、耐药状况、PVL、TSST-1基因携带率,初步了解临床耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药原因,为临床感染控制提供依据。方法收集2007年9月至2008年3月住院患者首次分离的53株有致病意义MRSA,用全自动微生物分析仪进行药敏试验,应用PCR方法检测MRSA的SCCmec基因型、PVLT、SST-1基因。结果53株MRSA呈多重耐药特点,SCCmec分型以ⅢA为主(47.2%),PVL基因均为阴性,12株(22%)MRSA TSST-1阳性。结论53株MRSA的多重耐药性与SCCmec结构密切相关,SCCmec分型技术是探索MRSA多重耐药性与耐药结构有效的分子生物学手段,TSST-1基因阳性株在临床分离的金黄色葡萄球菌中占有较高的比例。

金黄色葡萄球菌致病毒素基因与耐药性的相关性研究

目的研究金黄色葡萄球菌的致病毒素基因与耐药性的关系。方法对临床收集的74株金黄色葡萄球菌,采用聚合酶链反应(PCR)检测耐药基因mecA和致病毒素基因中毒休克综合征毒素-1(TSST-1)、杀白细胞毒素(PVL),采用纸片扩散法进行药敏试验,对红霉素耐药和克林霉素敏感的菌株做D-试验。结果 74株金黄色葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的检出率为55.4%。MRSA除对万古霉素、呋喃妥因敏感外,对其他抗菌药物均高度耐药,甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)对抗药物的耐药性较轻,两组间的耐药性差异有统计学意义(P<0.05)。PVL基因阳性的MRSA耐药性与PVL基因阴性的MRSA比较,两组间耐药性差异无统计学意义(P>0.05)。PVL基因阳性的MSSA耐药性比不携带PVL基因的MSSA强,两者间差异有统计学意义(P<0.05)。携带TSST-1基因的MRSA除对万古霉素、呋喃妥因无耐药菌株外,对其他16种抗菌药物100%耐药。D-试验阳性菌株占所检菌株的10.8%,占红霉素耐药、克林霉素敏感菌株的88.9%。只有1株PVL基因阳性的MRSA D-试验阳性。结论 MRSA的耐药性非常严重,表现为对多种抗菌药物同时耐药,并且具有较高的红霉素诱导克林霉素耐药率;PVL和TSST-1可增强金黄色葡萄球菌的致病力及MSSA的耐药性,增加了临床抗感染治疗的难度。

金黄色葡萄球菌毒素基因的检测及临床应用

目的:了解医院获得性金黄色葡萄球菌(HA-SA)和社区获得性金黄色葡萄球菌(CA-SA)所携带肠毒素、表皮剥脱性毒素(ETs)、中毒性休克综合征毒素-1(TSST-1)及杀白细胞素基因(PVL)的特点。方法:应用PCR法检测肠毒素A、B、C、D、E基因,ETs A、B基因,TSST-1以及PVL。结果:116株金黄色葡萄球菌中,85株为HA-SA,检出肠毒素A基因6株,肠毒素C基因1株,肠毒素D基因1株,PVL2株;31株为社区获得性金黄色葡萄球菌,检出肠毒素A基因1株,肠毒素B基因1株,肠毒素D基因1株,PVL7株;所有菌株均未检测到肠毒素E、ETs A、B和TSST-1基因。CA-SA PVL检出率显著高于HA-SA,两者比较差异有统计学意义(P<0.005),而肠毒素、ETs和TSST-1基因检出率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:金黄色葡萄球菌可分泌多种毒素,在分离金黄色葡萄球菌的同时,应注意其毒素检测。

金黄色葡萄球菌耐药基因及致病毒素基因的研究

目的研究金葡菌耐药基因及致病因子中毒休克综合征毒素-Ⅰ(TSST-Ⅰ)基因和杀白细胞毒素(PVL)基因的分布特征。方法收集临床分离的74株金葡菌,PCR法检测毒素基因TSST-Ⅰ、PVL和mecA耐药基因。结果74株金葡菌PCR法对其行mecA基因检测,检出率为55.4%(41/74)。PVL阳性菌株的分离率为29.7%(22/74),PVL阳性的MRSA为15株(15.41,36.6%),PVL阳性的MSSA为7株(7 33,21.2%),差异无统计学意义(P>0.05)。TSST-Ⅰ基因检出率为6.8%,MSSA中未检出TSST-Ⅰ基因。结论MRSA呈多重耐药性,易造成医院内暴发流行,携带PVL和TSST-Ⅰ的金葡菌其致病力更强,应加强医院感染控制,防止其播散流行。

皮肤软组织及创伤感染金黄色葡萄球菌分离株的毒素基因检测

目的了解皮肤软组织及创伤感染的金葡菌携带的杀白细胞素(Panton—Valentine Leukocidin,PVL)基因、表皮剥脱性毒素(ETs)基因、中毒性休克综合征毒素-1(TSST-1)的tst基因的特点。方法对连续收集的皮肤软组织感染中分离的90株金葡菌,采用多重PCR同时检测金葡菌特异性16SrRNA基因、mecA基因、PVL基因,采用PCR法检测TSST-1及EtsA、B基因。结果金葡菌mecA基因阳性47株(占金葡菌52.2%)为耐甲氧西林金葡菌(MRSA)。有1株MRSA的EtsB基因阳性,1株MRSA的TSST-1阳性,有7株金葡菌携带PVL基因,其中3株为mecA基因阳性株(MRSA)。结论金葡菌可分泌多种毒素,携带PVL毒素的金葡菌常可以引起严重的侵袭性感染,尤其对产毒的MRSA感染引起足够的重视,是防控的重点。

多重PCR法检测金黄色葡萄球菌耐药基因及致病毒素基因

目的:了解金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)耐药基因及所携带致病毒素基因PVL与TSST-1的特点。方法:应用多重PCR法检测mecA基因、TSST-1基因及PVL基因。结果:84株金葡球经多重PCR法对其mecA基因进行检测,检出率为58.3%(49/84)。PVL基因阳性菌株的分离率为23.8%(20/84),PVL阳性的MRSA为13株(13/49,26.5%),PVL阳性的MSSA为7株(7/35,20.0%),差异无统计学意义(P>0.05);未检出TSST-1基因。结论:金葡菌的耐药性呈上升趋势,且金葡菌可产生多种毒素,在分离金葡菌的同时,应加强其耐药基因及毒素基因的检测。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药基因及致病毒素基因的研究

目的研究金黄色葡萄球菌耐药基因及致病因子中毒休克综合征毒素-1（TSST-1）基因和杀白细胞毒素（PVL）基因的分布特征及致病性。方法收集临床分离的80株金黄色葡萄球菌，PCR法检测毒素基因TSST-1，PVL和mecA耐药基因。结果80株金黄色葡萄球菌经PCR法，mecA基因检出率为56．3％（45／80），其中2006年为65．8％（25／38），2007年为47．6％（20／42），2007年的mecA基因检出率低于2006年。PVL^＋菌株的分离率为30．3％，PVL阳性的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）为13株（13／45，28．9％），金黄色葡萄球菌（MSSA）为11株（11／35，31．4％），差异无统计学意义（P〉0．05）。TSST-1基因检出率为6．3％（5／80），MSSA中未检出TSST-1基因。结论产PVL和TSST-1的MRSA致病力更强，增加了临床治疗的难度，对MRSA引起的感染应加强控制，防止其在医院播散流行。

41株金黄色葡萄球菌耐药性分析及PVL基因检测

目的了解临床分离金葡菌对常用抗生素的耐药性和杀白细胞毒素(PVL)基因携带情况。方法采用头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA),K-B法检测临床分离的41株金葡菌对常用抗生素的敏感性,PCR法检测mecA基因和PVL基因携带情况。结果 41株金葡菌中MRSA占51.2%,MRSA对克林霉素、红霉素、氨基糖苷类和喹诺酮类耐药率明显高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA),MRSA和MSSA对复方新诺明敏感率分别为90.5%和95%,未发现对万古霉素、替考拉林和利奈唑胺耐药株。21株MRSA mecA基因均阳性,41株金葡菌中共检出2株携带PVL基因,MRSA与MSSA各占1株,均分离自骨科病房。结论该院临床分离MRSA耐药率高,应规范临床用药,加强MRSA耐药性监测,加强PVL基因的检测,防止此类菌株的播散。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性分析及mecA和PVL基因检测

目的检测临床分离耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)mec A基因和杀白细胞素(PVL)基因携带情况,并分析其对常用抗菌药物的耐药性,指导临床上合理规范用药。方法应用96孔肉汤微量稀释法对菌株进行10种常用抗菌药物敏感性试验,全部药物敏感试验采用MIC法鉴定,采用聚合酶链反应(PCR)法检测mec A基因和PVL基因携带情况,并对PVL基因阳性菌株感染患者的临床资料进行分析。结果 60株MRSA对克林霉素、庆大霉素、利福平耐药率均>80%,环丙沙星、莫西沙星、左氧氟沙星耐药率均>90%,对呋喃妥因,复方新诺明较敏感,耐药率<10%,60株MRSA对万古霉素,利奈唑胺均敏感。60株MRSA的mec A基因均为阳性,其中检出3株菌株携带PVL基因,占5.0%,另外57株MRSA为PVL基因阴性,占95.0%。结论本地区临床分离出的MRSA耐药性较高,以携带mec A耐药基因为主,因此治疗应以糖肽类抗生素为主,合理规范用药。MRSA-PVL基因阳性率相对较低,但其与一些严重的金黄色葡萄球菌感染有关,临床应予以关注并加强对PVL基因的监测,有效控制及防止此类菌株播散流行。

临床分离金黄色葡萄球菌ST22克隆毒力及耐药基因分析

目的了解金黄色葡萄球菌ST22克隆临床分离株的毒力及耐药特征,为防控其感染提供依据。方法收集临床分离的经鉴定为ST22克隆的104株金黄色葡萄球菌,以及1株病房空气中分离到ST22菌株,应用SCCmec分型、spa分型等分子分型方法对菌株进行分子分型,检测pvl等18种毒力基因的携带率,检测erm基因的携带率,检测菌株对苯唑西林、红霉素、四环素等13种临床常用抗生素的耐药性,分析菌株的耐药情况。结果 104株ST22菌株中,76株为CA-SA,28株为HA-SA;其中6株为MRSA,98株为MSSA。6株MRSA均为ST22-MRSA-IV-t309。98株MSSA分为12种spa型,主要型别为t309型(87.8%,86/98)。ST22克隆的pvl毒力基因检出率为79.8%(83/104),ST22主要携带有seg,sei,sem,sen及seo 5种肠毒素基因,75%(78/104)的ST22菌株携带有这5种基因。药敏结果显示ST22主要对青霉素耐药,对红霉素也有较高的耐药率,erm耐药基因检出率较低。结论乌鲁木齐地区流行的ST22克隆能够引起社区及医院内感染,携带有较多的致病基因,并且有MRSA菌株的出现。

鄂尔多斯地区蒙古族人群耐甲氧西林金黄色葡萄球菌基因分型

目的：探讨鄂尔多斯地区蒙古族人群耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的分子流行病学特点，明确本地区MRSA基因型别及其分布规律。方法收集2009年1月至2011年8月临床分离的MRSA菌株54株。应用多重聚合酶链反应（PCR）对MRSA菌株进行葡萄球菌染色体mec（SCCmec）基因分型、杀白细胞毒素（PVL）毒力基因（pvl）和多位点序列分型（MLST）检测。结果 MRSA菌株的SCCmec Ⅰ～Ⅴ基因分型分别占0．00％、50．00％、46．30％、1．85％和1．85％；检测出1株pvl基因阳性；24株MRSA菌株MLST分型显示，ST23913株（54．17％），ST59株（37．50％），ST59和ST7各1株（4．17％）。结论鄂尔多斯地区蒙古族人群MRSA菌株以SCCmec Ⅱ型和SCCmecⅢ型为主。

新疆乌鲁木齐地区PVL阳性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性检测

目的了解乌鲁木齐地区杀白细胞素(PVL)阳性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药情况,指导临床合理用药。方法采用PCR法进行PVL基因的检测;采用Kirby-Bauer法进行药敏试验,分析其耐药性。结果 49株MRSA中PVL基因扩增阳性菌株为31株,阳性率为63.27%,PVL阳性MRSA对青霉素G、苯唑西林、红霉素、阿奇霉素、左氧氟沙星、利福平、庆大霉素、阿米卡星、克林霉素和环丙沙星的耐药率分别为100%、100%、83.87%、80.65%、90.32%、90.32%、87.10%、87.10%、90.32%和90.32%,对呋喃妥因的耐药率为3.23%,未发现对万古霉素耐药的菌株。结论与国内其他地区相比,乌鲁木齐地区MRSA杀白细胞毒素基因检出率较高,且PVL阳性的MRSA耐药严重,呈多重耐药,应该加强医院感染控制,防止其播散流行。