甲磺酸加替沙星等三种抗菌药物的体外杀菌曲线研究

目的:研究甲磺酸加替沙星、阿米卡星及哌拉西林三种药物的体外杀菌曲线特点.方法:采用菌落计数法对1/4、1、4、8、16、64MIC系列浓度的三种抗菌药物(甲磺酸加替沙星、阿米卡星、哌拉西林)进行体外杀菌曲线实验.结果:甲磺酸加替沙星与阿米卡星随着抗菌药物浓度的升高,其杀菌速度显著加快.哌拉西林4MIC较1MIC的杀菌时间有所缩短,但较8MCI、16MIC、64MIC哌拉西林的杀菌时间及杀菌程度无统计学差异.结论:甲磺酸加替沙星与阿米卡星的杀菌曲线显示了浓度依赖性,哌拉西林则显示了非浓度依赖性的杀菌曲线.

阿娜尔妇洁液体外抑菌试验及杀菌曲线测定

目的:研究阿娜尔妇洁液抗细菌及抗真菌体外抑菌作用。方法:采用微量稀释法测定最低抑菌浓度(MIC),最低杀菌浓度(MBC),选择104CFU/mL的接菌量,测定不同浓度的阿娜尔妇洁液对细菌及真菌的杀菌速度,绘制杀菌曲线KCs。结果:对金黄色葡萄球菌、白色念珠菌的MIC及MBC为0·04mg/mL,对铜绿假单胞菌、大肠杆菌、表皮葡萄球菌及沙门氏菌的MIC及MBC为0·06mg/mL。杀菌曲线KCs表明,24小时后对上述菌株的杀灭率为95%以上。结论:阿娜尔妇洁液对上述革兰氏阴性、革兰氏阳性菌及白色念珠菌均有杀灭作用并且杀菌作用快,效果明显。

芩榆烧伤凝胶体外抑菌试验及杀菌曲线的测定

目的:研究芩榆烧伤凝胶对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、表皮葡萄球菌、白色念珠菌的抗菌能力。方法:采用试管两倍稀释法测定芩榆烧伤凝胶对受试菌的最低抑菌浓度(MIC)及最低杀菌浓度(MBC)。选择芩榆烧伤凝胶对受试菌的最低抑菌浓度测定杀菌速度,绘制杀菌曲线(KC S)。结果:对金黄色葡萄球菌的MIC及MBC为0.48 mg·g-1,对铜绿假单胞菌的MIC及MBC为0.24 mg·g-1,对大肠埃希菌的MIC及MBC为1.91 mg·g-1,对表皮葡萄球菌的MIC及MBC为0.12 mg·g-1,对白色念珠菌的MIC为0.24 mg·g-1、MBC为0.48 mg·g-1。KC S表明,24 h后芩榆烧伤凝胶对受试菌的杀菌率为95%以上。结论:芩榆烧伤凝胶对上述革兰阳性菌、革兰阴性菌、白色念株菌均有杀灭作用并且杀菌作用快。

20味中药体外抑制奇异变形杆菌的研究

为探讨诃子、薄荷、黄连等20味中药提取物对犊牛腹泻粪便样本中分离鉴定的奇异变形杆菌的抑制效果。用水煮法分别提取中药有效成分,通过微量二倍稀释法分别测定各中药提取物对奇异变形杆菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),用棋盘法、时间杀菌-曲线绘制法测定中药提取物对奇异变形杆菌的联合抑菌效果。结果显示,诃子、薄荷、黄连、艾叶、金银花、知母、五倍子的抑菌效果明显,MIC值为3.9~62.5 mg/mL,MBC值为3.9~125 mg/mL;其中诃子与薄荷联用,表现协同作用;诃子和黄连、金银花、艾叶、五倍子联用,均表现相加作用;诃子和知母联用,表现无关作用。结果提示,诃子与不同中药组合能起到不同抑菌效果,为临床奇异变形杆菌引发的疾病治疗用药提供了参考。

去氢骆驼蓬碱体外杀菌作用的研究

目的 :研究去氢骆驼蓬碱在体外的杀菌作用。 方法 :采用试管法检测去氢骆驼蓬碱对金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、伤寒沙门菌、福氏志贺菌和白色念珠菌的最小杀菌浓度 (MBC)及对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、白色念珠菌的时间—杀菌曲线。 结果:去氢骆驼蓬碱对 6种细菌的 MBC为 12 5～ 2 5 0μg/m l,对白色念珠菌的 MBC为 80 0μg/m l。杀菌曲线表明 ,其可分别在 6 h和 2 4 h内完全杀死 10 6 cfu/m l的绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌。 结论:去氢骆驼蓬碱在体外对多种细菌和真菌具有较强的杀菌作用。

甲磺酸加替沙星等3种抗菌药物的体外杀菌作用研究

目的:研究甲磺酸加替沙星体外杀菌曲线特点。方法:采用菌落计数法对1/4、1、4、8、16、64最低抑菌浓度(MIC)系列浓度的3种抗菌药物(甲磺酸加替沙星、阿米卡星、哌拉西林)进行体外杀菌实验。结果:甲磺酸加替沙星与阿米卡星随着抗菌药物浓度的升高,其杀菌时间明显缩短。而4 MIC哌拉西林较1 MIC哌拉西林的杀菌时间有所缩短.但较8 MIC、16 MIC、64 MIC哌拉西林的杀菌时间及杀菌程度无统计学差异。结论:甲磺酸加替沙星与阿米卡星的杀菌曲线显示了浓度依赖性.哌拉西林则显示了非浓度依赖性的杀菌曲线。

左氧沙星与磷霉素联用对金黄色葡萄球菌的体外杀菌活性研究

目的:评价左氧沙星与磷霉素联用对金黄色葡萄球菌的联合抗菌效应。了解左氧沙星单用及与磷霉素联用的杀菌曲线特点。方法:选取3株MSSAATCC29213、临床分离菌SA99、SARN450(实验室菌株)和1株临床分离的MRS-AB6177,采用菌落计数法对不同浓度的左氧沙星或磷霉素单用及两药联合对3株MSSA和1株MRSA进行体外杀菌实验。结果:左氧沙星的杀菌曲线表现出浓度依赖性,磷霉素的杀菌曲线表现出非浓度依赖性。两药1/4MIC浓度单用时虽然均无法抑制MSSA的生长,而两药亚抑菌浓度联合使用后即表现出协同效应和杀菌效应。两药4MIC、8MIC联合时对MRSA表现出杀菌效应。结论:亚抑菌浓度的左氧沙星与磷霉素联合对MSSA即可出现协同杀菌效应。左氧沙星联合磷霉素对MRSA也表现出显著的杀菌活性。

头孢他啶-阿维巴坦对肠杆菌科细菌和铜绿假单胞菌的体外杀菌活性研究

目的研究头孢他啶-阿维巴坦对肠杆菌科细菌和铜绿假单胞菌的体外杀菌活性特点。方法以0.5~32倍最低抑菌浓度(MIC)的头孢他啶分别联合4 mg/L阿维巴坦对肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌和铜绿假单胞菌共8株受试菌进行头孢他啶-阿维巴坦体外杀菌动力学观察及记录描述,并绘制杀菌曲线。结果头孢他啶-阿维巴坦对肠杆菌科细菌及部分铜绿假单胞菌具有较强杀菌作用,其杀菌曲线下降趋势与时间成正相关,且不随药物浓度改变有明显变化。7株受试菌株在其相应的4 MIC药物浓度时,存活菌落数在6 h内下降约3 lgCFU/mL。1株铜绿假单胞菌(17-W07-23)在4倍以上MIC的药物浓度条件下,仍能观察到细菌存活数减少后再次增多,曲线出现反跳。结论头孢他啶-阿维巴坦对抗菌谱内的肠杆菌科细菌及部分铜绿假单胞菌具有较强的杀菌活性,属时间依赖型抗生素。提示在临床治疗中可采取适当缩短给药间隔的方式维持其血药浓度以达到更好的疗效。

抗菌药物联合用药体外研究方法的现状及进展

多重耐药、广泛耐药细菌的出现和迅速传播已成为一个重大的公共卫生问题,临床可用的抗菌药物有限。为有效控制多重耐药、广泛耐药菌所致严重感染,防止耐药性的进一步产生,抗菌药物联合用药成为一个重要的治疗手段。抗菌药物联合用药对多重耐药菌的抗菌活性及协同作用可通过E试验,棋盘法、时间杀菌曲线等体外研究方法评估[1],荟萃分析显示以体外协同作用为导向的抗菌药物联合治疗与生存率显著相关[2],体外研究发现具有协同作用的联合用药可进一步用于临床研究。因此,本文对抗菌药物联合用药体外研究方法的现状及进展进行综述,以期为多重耐药、广泛耐药菌感染的联合治疗体外研究提供参考。

抗菌药物体外联合药物敏感性试验方法

近年来,多重耐药菌(MDR)日益流行,但相关治疗方法有限,抗菌药物相互作用相关研究成为热点。体外联合药物敏感性试验可以判断2种及以上抗菌药物是否有协同作用,为临床联合使用抗菌药物提供参考。目前,临床常用体外联合药物敏感性试验方法有时间-杀菌曲线(TKA)、棋盘稀释法(CB)、E试验和纸片法。文章就上述方法进行综述,为临床应用提供参考。

抗菌肽杀菌效果、机制研究方法进展

抗生素的广泛应用已造成大量耐药菌的产生,同时也导致环境污染,抗菌肽有望作为抗生素的替代品,已受到广泛关注和研究。研究者通过分离纯化、体外合成、表达等方式获得抗菌肽,进而研究抗菌肽体外和体内的杀菌效果及杀菌机制,在此过程中建立很多相关的研究方法。本文旨在对抗菌肽杀菌效果、最小抑菌浓度、杀菌动力学曲线及杀菌机制等常用的研究方法进行综述,以期为后续抗菌肽抑菌研究提供参考。

多西环素联合利福平对耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌体内外抗菌活性

目的 探究多西环素联合利福平对耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae, CRKP)体内外抗菌活性。方法 收集宜春市人民医院临床分离的非重复CRKP,测定多种常用抗菌药物对其最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)。通过棋盘稀释法进行联合药敏试验,计算部分抑菌浓度指数(fractional inhibitory concentration index,FIC)判定联合效果。体外时间-杀菌曲线观察联合杀菌作用。采用结晶紫染色法测定两药联用对生物膜形成的抑制作用及清除作用。鼻腔滴注法建立小鼠肺部肺炎克雷伯菌感染模型,检测鼠肺部细菌浓度变化、血清C-反应蛋白(CRP)、IL-6水平。HE染色观察肺组织病理形态学改变。结果 棋盘法显示多西环素联合利福平效果最好,两药联用时多西环素的MIC值从(4~256μg/mL)下降到(2~8μg/mL),利福平的MIC值从(16~256μg/mL)下降到(2~16μg/mL)。时间-杀菌曲线显示,多西环素联合利福平对细菌作用24 h内,使细菌数较初始细菌数降低≥2lg CFU/mL,呈现抑菌或杀菌作用。结晶紫染色法测定,联合组对细菌生物膜抑制生长和破坏作用较对照组差异性明显(P<0.05)。动物实验表明,联合组小鼠肺部组织细菌数、C-反应蛋白(CRP)、IL-6水平显著降低,感染情况明显改善,肺泡结构清晰,充血减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 体外实验表明,多西环素联用利福平对CRKP具有协同抗菌或杀菌作用,动物实验证实多西环素联用利福平可降低炎性指标,有效治疗肺组织细菌感染,有体内抗菌作用。此结果可供临床参考。

丁香酚体外抑菌作用研究

应用微量稀释法对丁香酚体外抑菌活性进行了研究。结果表明，丁香酚对12种常见细菌具有较好的抑菌作用，其中对大肠杆菌ATCC25922（质控菌）的效果最好，其最低抑菌浓度（MIC）、最低杀菌浓度（MAC）分别为5μg／ml和10μg／ml；对蜡状芽孢杆菌作用较差，MIC和MBC分别为320μg／ml和64μg／ml其余菌株的MIC和MBC分别在20-80μg／ml和40-16μg／ml之间。而时间．杀菌曲线法实验结果表明，丁香酚抑菌作用特性表现为较强的浓度依赖性，其良好的抑菌活性可作为潜在的天然食品防腐剂进一步研究和开发。

夫西地酸对葡萄球菌体外抗菌作用研究

目的评价夫西地酸对临床分离葡萄球菌的体外抗菌作用及影响因素。方法以琼脂二倍稀释法测定抗菌药物最低抑菌浓度,棋盘法测定联合抗菌作用并以杀菌曲线测定夫西地酸杀菌特征。结果对临床分离的359株葡萄球菌MIC测定结果显示夫西地酸对苯唑西林耐药葡萄球菌MIC50及MIC90值分别为0.25～1及1～8mg/L;对苯唑西林敏感葡萄球菌MIC50及MIC90值分别为0.25～0.5及0.5～1mg/L;抗菌活性与万古霉素、替考拉宁相似或稍强,93.16%的葡萄球菌对夫西地酸敏感,耐药菌主要为凝固酶阴性葡萄球菌;未发现万古霉素耐药葡萄球菌,但3.62%细菌对替考拉宁耐药。夫西地酸与亚胺培南、帕尼培南和美罗培南3种碳青霉烯类抗生素联用具有协同或相加作用,其中协同作用分别为87.5%、70.83%和43.75%,无拮抗作用;糖肽类药物与碳青霉烯类药物联用以协同与相加效果为主。夫西地酸对苯唑西林耐药和敏感葡萄球菌杀菌作用迅速,但杀菌作用在较高浓度时并没有进一步提高杀菌速度,提示该产品可能属于非浓度依赖性抗菌药物。结论夫西地酸对各种葡萄球菌,包括耐苯唑西林葡萄球菌,具有良好抗菌作用,其抗菌作用可能属于非浓度依赖性;夫西地酸与碳青酶烯类抗生素联用具有明显协同抗菌效果。

康宁木霉(Trichoderma koningii)SMF2分泌的peptaibols类抗菌肽Trichokonins抑菌活性研究

Peptaibols是一类来源于土壤微生物,由非核糖体合成酶(nonribosomal peptide synthetase,NRPS)合成的富含α-氨基异丁酸(-αaminoisobutyric acid,Aib)的抗菌肽的总称.Trichokonins属于长链peptaibols第一亚家族,其对普通金黄色葡萄球菌和1株临床分离的多抗金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)均为50μg/mL,但时间杀菌曲线表明后者对MIC浓度的Trichokonins耐受性明显大于前者.在含50μg/mL浓度Tri-chokonins的培养基中连续转接20次后普通金黄色葡萄球菌和多抗金黄色葡萄球菌对Trichokonins的敏感性都明显降低,MIC值均提高到200μg/mL以上,表明金黄色葡萄球菌对Trichokonins产生了明显的抗性.这与目前普遍认为的抗菌肽不易产生抗性的观点不一致,其抗性产生的具体机制有待于进一步的研究.

3种抗生素对3种常见鱼类病原菌的抑菌活性研究

为研究盐酸恩诺沙星、乳酸恩诺沙星和乳酸诺氟沙星对嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、鳗弧菌(Vibrio anguillarum)和哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)的体外抑菌活性,本实验通过测定抑菌圈直径、最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC)和杀菌曲线,研究3种常用喹诺酮类抗生素药物对3种水产病原菌的体外药效学特性。结果表明:乳酸诺氟沙星对嗜水气单胞菌和哈维氏弧菌抑菌效果最好,MIC分别为0.244μg/mL和1.954μg/mL;盐酸恩诺沙星对鳗弧菌抑菌效果最好,MIC为0.122μg/mL;8 MIC的乳酸诺氟沙星药液在12 h内完全杀灭嗜水气单胞菌,在24 h内也能全部杀灭哈维氏弧菌,8 MIC的盐酸恩诺沙星药液在24 h内全部杀灭鳗弧菌。本研究为3种抗生素在水产养殖中的应用提供实验依据。

重组溶葡球菌酶的体外抗菌活性研究

目的:评价重组溶葡球菌酶对545株临床分离葡萄球菌的体外抗茵活性。方法:采用平皿二倍稀释法,测定重组溶葡球菌酶对545株葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC);采用试管二倍稀释法和平皿计数法测定此酶对45株葡萄球菌的最低杀菌浓度(MBC);采用不同浓度重组溶葡球菌酶不同时间的杀菌结果绘制杀菌曲线,检测其对4株受试葡萄球菌的动态杀菌趋势;此外,测定不同培养条件对MIC的影响。结果:此酶对257株金葡球菌具有较强的体外抗菌活性,对288株凝固酶阴性葡萄球菌的抗菌活性相对较弱;结合MBC和杀菌曲线结果,可以判断此酶对敏感菌为快速杀菌作用,并呈浓度依赖性;pH,细菌接种量及高浓度血清蛋白对MIC有一定影响,受试浓度的二价金属离子对MIC影响不明显。结论:重组溶葡球菌酶主要对金葡菌体现强大的抗菌活性,对耐甲氧西林金葡菌(MRSA)和甲氧西林敏感金葡菌(MSSA)的抗菌作用没有明显差别,有进一步研究的价值。

头孢噻呋混悬剂体外抗菌活性及抗生素后效应研究

【目的】评价头孢噻呋混悬剂对兽医临床常见的3种标准菌株的体外抗菌活性及抗生素后效应。【方法】以试管二倍稀释法对3种标准菌株进行最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)的测定;采用菌落计数法绘制3种标准菌株的时间-杀菌曲线(KCs);采用平板计数法测定了头孢噻呋混悬剂对3种标准菌株的抗生素后效应(post-antibiotic effect,PAE)。【结果】头孢噻呋混悬剂对大肠杆菌、放线杆菌及猪兽疫链球菌的MIC值分别为:0.076、0.304、0.00475μg·mL-1;MBC值分别为:0.61、0.304、0.00475μg·mL-1;头孢噻呋混悬剂对放线杆菌的杀菌速率最快,对链球菌次之;头孢噻呋混悬剂对大肠杆菌PAE较短,呈现非浓度依赖性,对放线杆菌的PAE较长,呈明显的浓度依赖性,而对猪兽疫链球菌呈现部分浓度依赖性。【结论】头孢噻呋混悬剂具有强效、速效、持效的杀菌作用,可广泛应用于兽医临床。

利奈唑胺与万古霉素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌体外抗菌活性

目的评价利奈唑胺(噁唑烷酮类抗菌药)、万古霉素(胺基糖苷类抗生素)2种抗菌药物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的体外抗菌活性。方法用琼脂二倍稀释法,测定抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC);用肉汤稀释法,测定抗菌药物的最低杀菌浓度(MBC),绘制杀菌曲线(KCs)。结果利奈唑胺对临床分离的98株MRSA的MIC50为1μg.mL-1,MIC90为2μg.mL-1,MBC50为8μg.mL-1,MBC90为32μg.mL-1,敏感率为100%;万古霉素对临床分离的98株MRSA的MIC50为1μg.mL-1,MIC90为1μg.mL-1,MBC50为8μg.mL-1,MBC90为32μg.mL-1,敏感率为100%。随着抗菌药物浓度的升高,其杀菌时间缩短不甚明显,呈现非浓度依赖性的特点。结论利奈唑胺对MRSA的体外抗菌活性与万古霉素相当,均显示非浓度依赖性的杀菌曲线。

肺炎链球菌适应性评价的方法学探索

目的测定肺炎链球菌在无抗菌药和有抗菌药选择压力下适应性实验方法的评价。方法选用肺炎链球菌国际耐药克隆Taiwan19F-14、Spain23F-1各1株和肺炎链球菌标准菌株ATCC49619,采用分光光度法和菌落计数法分别测定肺炎链球菌生长曲线和杀菌曲线,以修正的Gompertz方程拟合曲线,计算生长动力学参数,对两种方法测定的生长曲线和杀菌曲线进行比较。结果两种方法测定的生长曲线在肺炎链球菌对数生长期所测的结果基本一致,同时还发现肺炎链球菌菌液的A600值和菌落计数之间,在对数生长期有很好的相关性,并确定了两者的函数关系。两种方法测定的杀菌曲线,分光光度法拟合1/2MIC,1MIC药物浓度杀菌曲线与对照曲线相比,随着药物浓度升高无明显下降趋势。分光光度法所测定杀菌曲线中达到99.9%杀菌率的2MIC浓度曲线,基本与X轴相重合。结论分光光度法作为测定肺炎链球菌生长曲线、计算生长动力学参数的实验方法 ,与菌落计数法比较结果一致,且更为简便,可以替代后者用于评价肺炎链球菌在无抗菌药条件下的适应性。但分光光度法测定肺炎链球菌杀菌曲线、评价杀菌效果,无法替代菌落计数法评价肺炎链球菌在抗菌药选择压力下的适应性。