目的研究小鼠模型在评价13价肺炎球菌结合疫苗(pneumococcal conjugate vaccine,PCV)免疫原性中的作用。方法15批13价PCV免疫NIH小鼠,免疫3针后采血,检测血清抗不同血清型荚膜多糖IgG抗体的含量和调理吞噬杀菌抗体的水平。检测方法采用...目的研究小鼠模型在评价13价肺炎球菌结合疫苗(pneumococcal conjugate vaccine,PCV)免疫原性中的作用。方法15批13价PCV免疫NIH小鼠,免疫3针后采血,检测血清抗不同血清型荚膜多糖IgG抗体的含量和调理吞噬杀菌抗体的水平。检测方法采用WHO推荐的ELISA和OPA。系统性比较IgG抗体含量和调理吞噬杀菌滴度之间的相关关系,包括组内相关关系和均值相关关系以及两者之间在统计学上的差异。结果①各型的组内相关性在每个组之间有所不同23F型OPA滴度与IgG抗体水平之间相关系数比较低,而且各组之间的差异均有统计学意义(P均<0.05);3型的相关系数比较高,而且与大部分血清型(如4、6A、6B、9V、14、18C、19F和23F型)之间的差异均有统计学意义(P均<0.05);而7F型和几乎所有的型(23F型除外)之间差异均无统计学意义(P均>0.05)。另外,方差分析结果表明,各型之间总体的差异有统计学意义(P<0.05)。②每组有13个血清型,其在各组之间的差异除了G7组与其他12组的差异有统计学意义之外,其他各组之间的差异几乎没有统计学意义(P均>0.05)。另外,方差分析结果表明,各组之间总体上差异无统计学意义(P=0.17,P>0.05)。③均值相关性和组内相关性的均值有一定的差异,除了5型,其他血清型的均值相关性都高于组内相关性的均值。④对每个组13个血清型的组内相关性与均值相关性之间进行统计学上的差异比较:除了7、8、11组,其余都是均值相关性高。结论对15个组的几何平均滴度(geometric mean titer,GMT)和几何平均ELISA单位(geometric mean ELISA unit,GMU)进行相关性分析,得到均值相关性,均值相关性与组内在各种情况下的差异,说明均值相关性在一定程度上消除了这种个体的影响,能够比较准确地反映OPA滴度与IgG水平之间的相关关系。NIH小鼠作为13价PCV血清学评价的动物模型,其血清的GMU和GMT都能够反映疫苗的免疫原性。展开更多
目的:通过检测血清抗体滴度和杀菌抗体检测(SBA)评价重组H因子结合蛋白(factor H binding protein,fHBP)的免疫原性。方法:选择并合成fHBP序列,连接至pET43.1a质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),表达两个亚家族的重组fHBP蛋白,fHBPA和fHBPB,...目的:通过检测血清抗体滴度和杀菌抗体检测(SBA)评价重组H因子结合蛋白(factor H binding protein,fHBP)的免疫原性。方法:选择并合成fHBP序列,连接至pET43.1a质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),表达两个亚家族的重组fHBP蛋白,fHBPA和fHBPB,经过纯化后免疫家兔和小鼠,通过ELISA和SBA试验检测免疫抗血清效价和B群脑膜炎球菌流行菌株的杀菌滴度。结果:fHBP免疫兔血清效价均大于2.0×10^(6),免疫小鼠血清效价高于1.0×10^(6)。69株流行株SBA试验中fHBP免疫兔血清对41株A亚家族和20株B亚家族均有大于1∶128杀菌滴度,亚家族靶菌之间没有交叉保护作用。fHBPA小鼠血清对A亚家族流行株Nm210902、Nm211009、Nm450522平均滴度为1∶1024、1∶608、1∶861,对Nm510703、Nm311304、Nm431002流行株的滴度为1∶234、1∶861、1∶430;fHBPB小鼠血清对B亚家族流行株Nm311302、Nm311113和Nm321114的杀菌滴度分别是1∶2896、1∶1878和1∶430。而fHBPA和fHBPB混合蛋白质免疫鼠血清Nm210902、Nm510703和Nm311302平均滴度分别1∶876、1∶274、1∶1858,对3株靶菌均存在有效杀菌。结论:fHBP免疫抗血清效价均在1.0×10^(6)水平以上,对61株B群流行株的杀菌滴度大于1∶128,对69株B群脑膜炎球菌流行株有94.2%的保护效果。展开更多
文摘目的研究小鼠模型在评价13价肺炎球菌结合疫苗(pneumococcal conjugate vaccine,PCV)免疫原性中的作用。方法15批13价PCV免疫NIH小鼠,免疫3针后采血,检测血清抗不同血清型荚膜多糖IgG抗体的含量和调理吞噬杀菌抗体的水平。检测方法采用WHO推荐的ELISA和OPA。系统性比较IgG抗体含量和调理吞噬杀菌滴度之间的相关关系,包括组内相关关系和均值相关关系以及两者之间在统计学上的差异。结果①各型的组内相关性在每个组之间有所不同23F型OPA滴度与IgG抗体水平之间相关系数比较低,而且各组之间的差异均有统计学意义(P均<0.05);3型的相关系数比较高,而且与大部分血清型(如4、6A、6B、9V、14、18C、19F和23F型)之间的差异均有统计学意义(P均<0.05);而7F型和几乎所有的型(23F型除外)之间差异均无统计学意义(P均>0.05)。另外,方差分析结果表明,各型之间总体的差异有统计学意义(P<0.05)。②每组有13个血清型,其在各组之间的差异除了G7组与其他12组的差异有统计学意义之外,其他各组之间的差异几乎没有统计学意义(P均>0.05)。另外,方差分析结果表明,各组之间总体上差异无统计学意义(P=0.17,P>0.05)。③均值相关性和组内相关性的均值有一定的差异,除了5型,其他血清型的均值相关性都高于组内相关性的均值。④对每个组13个血清型的组内相关性与均值相关性之间进行统计学上的差异比较:除了7、8、11组,其余都是均值相关性高。结论对15个组的几何平均滴度(geometric mean titer,GMT)和几何平均ELISA单位(geometric mean ELISA unit,GMU)进行相关性分析,得到均值相关性,均值相关性与组内在各种情况下的差异,说明均值相关性在一定程度上消除了这种个体的影响,能够比较准确地反映OPA滴度与IgG水平之间的相关关系。NIH小鼠作为13价PCV血清学评价的动物模型,其血清的GMU和GMT都能够反映疫苗的免疫原性。
文摘目的:通过检测血清抗体滴度和杀菌抗体检测(SBA)评价重组H因子结合蛋白(factor H binding protein,fHBP)的免疫原性。方法:选择并合成fHBP序列,连接至pET43.1a质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),表达两个亚家族的重组fHBP蛋白,fHBPA和fHBPB,经过纯化后免疫家兔和小鼠,通过ELISA和SBA试验检测免疫抗血清效价和B群脑膜炎球菌流行菌株的杀菌滴度。结果:fHBP免疫兔血清效价均大于2.0×10^(6),免疫小鼠血清效价高于1.0×10^(6)。69株流行株SBA试验中fHBP免疫兔血清对41株A亚家族和20株B亚家族均有大于1∶128杀菌滴度,亚家族靶菌之间没有交叉保护作用。fHBPA小鼠血清对A亚家族流行株Nm210902、Nm211009、Nm450522平均滴度为1∶1024、1∶608、1∶861,对Nm510703、Nm311304、Nm431002流行株的滴度为1∶234、1∶861、1∶430;fHBPB小鼠血清对B亚家族流行株Nm311302、Nm311113和Nm321114的杀菌滴度分别是1∶2896、1∶1878和1∶430。而fHBPA和fHBPB混合蛋白质免疫鼠血清Nm210902、Nm510703和Nm311302平均滴度分别1∶876、1∶274、1∶1858,对3株靶菌均存在有效杀菌。结论:fHBP免疫抗血清效价均在1.0×10^(6)水平以上,对61株B群流行株的杀菌滴度大于1∶128,对69株B群脑膜炎球菌流行株有94.2%的保护效果。
